DB34∕T 3715-2020 白鹤芋组培快繁技术规程

ICS65.020.20CCSB05DB34DB34/T3715—2020白鹤芋组培快繁技术规程TechnicalregulationsfortissuecultureandrapidpropagationofSpathiphyllumkochii安徽省市场监督管理局发布IDB34/T3715—2020本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由阜阳师范大学提出。本文件由安徽省林业局归口。本文件起草单位：阜阳师范大学、安徽大汇生态科技发展有限公司、亳州市花易捷花卉经营管理有限公司、安徽农之源生态农业有限公司、安徽省农业科学院、太和县淼林现代农业发展有限公司。本文件主要起草人：兰伟、凌飞东、郑萍、任杰、尚冰冰、刘晓艳、谢欣雨、张源、胡新、王静宇、王显梅、刘峰、王先亮、侯林威。DB34/T3715—20201白鹤芋组培快繁技术规程本文件规定了白鹤芋（Spathiphyllumkochii）组培快繁的组培设施、培养基配制、愈伤组织诱导培养、继代增殖培养、生根培养、炼苗、组培苗分级、档案管理。本文件适用于白鹤芋组培育苗生产。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。LY/T2289林木种苗生产经营档案NY/T2306花卉种苗组培快繁技术规程3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4组培设施按照NY/T2306的规定执行。5培养基配制5.1培养基类型的选择选择MS培养基为基本培养基。5.2MS培养基配制按照NY/T2306的规定执行。5.3培养基配方5.3.1腋芽诱导培养基MS＋6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+卡拉胶5.5g/L。5.3.2继代增殖培养基2DB34/T3715—2020MS＋6-BA2.0mg/L+NAA0.05mg/L＋KT（6-糠基氨基嘌呤）0.1mg/L+白砂糖30g/L+卡拉胶5.3.3生根培养基1/2MS＋NAA0.5mg/L＋AC（活性炭）0.3g/L+白砂糖20g/L+卡拉胶5.5g/L。5.4培养基pH值用pH计或pH试纸测培养基pH值，用1mol/LHCL或1mol/LNaOH调节培养基pH值至5.8。5.5培养基分装利用自动灌装机分装，每升分装25～30瓶。分装时培养基不得沾在培养瓶口周围。5.6培养基灭菌-2～1.2kg-2、121℃下，培养基灭菌15min～20min，并尽快取出存放固定位置，不得与未灭菌物品混放。配制的培养基应12h内进行灭菌。6愈伤组织诱导培养6.1外植体选取在生长健壮、无病虫害的白鹤芋植株上，选取幼嫩的侧芽为外植体备用。6.2外植体清洗将选取的外植体在自来水下流水冲洗15min～20min。6.3外植体消毒在超净工作台上，用无菌滤纸吸干外植体表面水分，浸入70％乙醇中消毒20s～30s后，将70%乙醇倒去，用无菌水冲洗3次，再浸入2.0％次氯酸钠溶液消毒15min～20min，倒出次氯酸钠溶液，用无菌水冲洗4～5次，置于无菌滤纸上晾干备用。6.4外植体接种6.4.1接种工具消毒将剪刀、镊子等接种工具在高压灭菌锅中灭菌后，放置在超净工作台上。接种时，接种工具用电热灭菌器灭菌，然后在无菌工具放置架上冷却至室温备用。6.4.2接种将已消毒的外植体去除外层苞叶和下端切口，留取1.5cm～2.0cm长顶芽，接种在4.3.1腋芽诱导培养基上。每瓶培养基接种2个～3个顶芽。6.4.3标记接种后，每批用记号笔将品种代号、培养基编号、工作人员编号及接种日期等信息标示在培养瓶上；记录本人的接种数量，包括母瓶数和接种瓶数。DB34/T3715—202036.5培养条件培养温度为24℃~26℃,光照强度2000lx～3000Lx，连续定时光照时间12h/d。6.6培养时间外植体接种后，连续培养20d左右，外植体逐渐膨大，叶腋处萌发许多不定芽。继续培养45d~50d后，不定芽长成芽丛。7继代增殖培养7.1转接将芽丛分成大小相对一致的两半，转接到4.3.2继代增殖培养基上培养。如此反复，通过以芽丛倍增的方式，实现幼苗大量增殖。7.2培养条件培养温度为24℃~26℃,光照强度2000lx～3000Lx，连续定时光照时间12h/d。7.3培养时间一般为45d左右。7.4培养代数继代增殖次数控制在10代以内。8生根培养8.1转接将苗高3.0cm以上，生长健壮、长势一致的无根组培苗，转接到生根培养基中。8.2培养条件培养温度为24℃~26℃,光照强度2000lx～3000Lx，连续定时光照时间12h/d。8.3培养时间一般为30d左右。9炼苗9.1炼苗标准培养瓶内生长的根、茎、叶俱全的完整植株，基部长出3～5条不定根，株高4.0cm～6.0cm，3~4片叶时，便可炼苗。9.2炼苗条件DB34/T3715—20204将培养瓶放置在遮阳度为5070温度为24℃~26℃的温室中，把培养瓶盖全部打开或半打开炼苗。9.3炼苗时间一般炼苗时间为3d～5d，然后再移栽。10组培苗分级根据植株长势，叶片色泽，结合苗高，可将白鹤芋组培苗分为一级苗、二级苗、三级苗和不合