DB35∕T 1798-2018 云纹石斑鱼人工育苗技术规范

ICS67.120.30DB35DB35/T1798—2018云纹石斑鱼人工育苗技术规范TechnicalspecificationsforartificialbreedingofEpinephelusmoara2019-02-22实施福建省市场监督管理局发布IDB35/T1798—2018前言 12规范性引用文件 13环境条件 14亲鱼培育 1 26苗种培育 47病害防治 58苗种出池 5附录A（资料性附录）激素植埋亲鱼雄性化技术 6DB35/T1798—2018本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则编写。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由福建省海洋与渔业局提出并归口。本标准起草单位：福建省水产研究所、罗源县水产技术推广站、诏安县水产技术推广站、东山县裕昌水产养殖有限公司云纹石斑鱼省级良种场、宁德市蕉城区渔业经营管理站。本标准主要起草人：曾庆民、王在文、许朝晖、沈琼仙、游玉、柳财文。DB35/T1798—20181云纹石斑鱼人工育苗技术规范本标准规定了云纹石斑鱼（Epinephelusmoara）人工育苗的环境条件、亲鱼培育、人工繁殖、苗种培育、病害防治和苗种出池等技术要求。本标准适用于云纹石斑鱼人工育苗。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NYNYNYNY5052507150725362无公害食品无公害食品无公害食品无公害食品海水养殖用水水质渔用药物使用准则渔用配合饲料安全限量海水养殖产地环境条件SC/T2013浮动式海水网箱养鱼技术规范DB35/T1074福建省水产苗种场建设规范3环境条件3.1产地应符合NY5362规定的要求。3.2水质应符合NY5052规定的要求。3.3设施应符合DB35/T1074规定的要求。4亲鱼培育4.1海区选择设置网箱海域应符合SC/T2013规定的要求。4.2网箱规格2DB35/T1798—2018DB35/T1798—20184.3来源以人工养殖群体为主，并适时补充海区捕捞个体。4.4选择4.4.1一般要求应选择体质健壮，无伤病和无畸形的成鱼作为亲体。4.4.2雄鱼提前1年，选择6龄以上（体重≥4000g）成鱼，采用人工性转化技术，在其背肌中植入17α-甲基睾丸酮药条。药条制作和植入操作技术参见附录A。体外挂标志牌或体内植入鱼类PIT电子标签，移入亲鱼培育网箱培育。已性转化成功的亲鱼，同样做好标记，移入网箱培育。注：PIT电子标签是一种植入式电子标签，是已写入鉴定序号的计算机芯片。晶片装在一个很小的光滑的、不会引4.4.3雌鱼提前6个月，选择4龄以上（体重≥2000g）作为亲体，移入网箱培育。4.4.4雌雄比例雌雄比例为20:1～30:1。4.5培育密度不高于3kg/m3。亲鱼的饵料应以鳀鱼、蓝圆鰺、鱿鱼等新鲜小杂鱼为主，每日投喂1次，日投饵量为体重的5%左右。如无新鲜饵料，可使用鲜度良好的冷冻小杂鱼饵料。使用前置于海水中解冻，即化即用。繁殖季节前3个月，投饵时，每千克饵料中加入含量1.0g～1.5g的维生素E软胶囊。5人工繁殖5.1备产亲鱼的选择和运输5.1.1选择春季海区水温上升至19℃时，挑选体质健康、腹部柔软的亲鱼移入培育池。5.1.2运输海上采用活水船运输；陆上采用直径大于亲鱼全长的鱼篓或边长大于亲鱼全长的容器充氧运输。运输密度以亲鱼总重不高于承载容器实际水量的20%。亲鱼的搬动应使用鱼夹。DB35/T1798—201835.2亲鱼的培育5.2.1培育池面积30m2～50m2，有效水深1.5m～1.8m，圆形或抹角方形的室内水泥池为宜。5.2.2水质及光照条件培育用水经沉淀、砂滤，水质应符合NY5052要求；盐度23～32，光照强度200lx～300lx。5.2.3水温控制配备水温控制设备，控制水温19℃~23℃。5.2.4入池前处理亲鱼入池前用淡水浸泡10min或用药物消毒处理，药物使用符合NY5071规定的要求。5.2.5亲鱼培育密度和雌雄比例按每口培育池20～30尾雌性亲鱼配1尾雄性配置亲鱼。5.2.6亲鱼日常管理采用流水培育，每天的流水量为实际水体的2～3倍。每天上午和下午各投饵1次；饵料为新鲜或冷冻的鳀鱼、蓝圆鲹或鱿鱼。投喂前每千克饵料加入含量1.0g的维生素E软胶囊，DHA和EPA粉剂各0.3g的营养强化剂。视摄食情况调整投饵量，及时清除残饵。5.3人工授精5.3.1采卵亲鱼的选择雄鱼发情时侧线以上呈均匀的深灰暗色，腹部呈白色；雌鱼发情时体表呈明显的黑白相间斑纹。选择发情1h后的雌鱼直接采卵。未发情的雌鱼可视性腺发育程度和生产安排，注射催产激素。注射剂量为促黄体素释放激素类似物（LRH-A3）1mg/kg～3mg/kg鱼体重，行胸鳍基部注射。5.3.2人工授精操作轻轻挤压雌鱼腹部，将卵挤入擦干的干净容器中，随即挤精液到鱼卵上（一次取精液0.2mL～0.5mL将精卵轻轻搅拌后加入清洁海水充分搅匀。雄鱼可多次采精。5.3.3受精卵的收集和处理将受精卵轻轻搅拌后静置5min后，用80目筛绢网制作成的小抄网捞取上浮的受精卵，清水冲洗后直接移入育苗池孵化。5.4受精卵孵化5.4.1育苗池规格以圆形或方形四角抹圆、规格为15m2～20m2、水深1.2m～1.5m，排水口置于池底中央的育苗池DB35/T1798—201845.4.2孵化条件及时间孵化水温21℃~26℃,pH8.0～8.2，盐度30～35，连续充气，溶解氧≥5mg/L，保持水质稳定。孵化时间为18h～36h。5.4.3孵化管理孵化密度（按育苗池实际有效水体计）1.5×104粒/m3～2.5×104粒/m3。受精卵入池时水位为1.0m，每天加水20cm，加至实际有效水位后开始每天换水。仔鱼孵出后及时吸污，除去池底污物和死卵。6苗种培育6.1环境条件适宜水温23℃~30℃,最适水温25℃~28℃；适宜盐度20～33，最适盐度23～28；pH8.0～8.3；控制光照强度5000lx。育苗期间，育苗池每2m2左右布设一个气石，连续充气，保持溶解氧5mg/L以上。前期气量以小且均匀为宜，随着鱼苗的生长，逐渐加大充气量。应尽量避免环境条件突变。6.2培育密度仔鱼期1.0×104尾/m3～2.0×104尾/m3，稚鱼期0.8×104尾/m3～1.8×104尾/m3，幼鱼期0.1×104尾/m3～1.5×104尾/m3。6.3饵料及投喂方法6.3.1牡蛎受精卵和担轮幼虫从仔鱼开口后，每天投喂1次，投喂量100ind./mL～300ind./mL，连续3天。6.3.2褶皱臂尾轮虫投喂时间为4～25日龄，每天投喂1～2次，投喂密度为5ind./mL～20ind./mL。轮虫投喂前需经6h以上EPA和DHA的强化培养。强化方法按营养强化剂市售商品使用说明进行。6.3.3卤虫无节幼体投喂时间为20～45日龄，每天早晚各投喂1次，投喂量视鱼苗规格、密度调整，投喂密度0.5ind./mL～2ind./mL。卤虫无节幼体投喂前需经EPA和DHA营养强化剂3h以上的强化培养。强化方法按营养强化剂市售商品使用说明进行。6.3.4桡足类及其无节幼体投喂时间为40～60日龄，每天投喂次数4～6次，视水温、鱼苗的摄食情况调整，投喂密度为0.2ind./mL～0.5ind./mL。桡足类及其幼体在使用前应集中于100目筛绢制成的网袋中，用清洁海水冲洗3遍后投喂。6.3.5配合饲料鱼苗鳞片长全后，开始逐步驯化投喂配合饲料，直至完全使用配合饲料。投喂时，一般一天投喂2次（上午、下午各一次）。配合饲料的质量应符合NY5072的规定，蛋白质含量≥48%。DB35/T1798—201856.4.1水质调控6.4.1.1接入小球藻从受精卵孵化开始，直至停止投喂轮虫前（大约25日龄），每天上午投饵前，在育苗池中接入小球藻，使池水中小球藻的密度达3.0×105cell/mL左右。6.4.1.2换水和清污从3日龄开始，每天换水1次，换水量20%～30%，隔天吸污1次，清除池底的残饵、死苗及其他杂物。20日龄开始投喂卤虫无节幼体后，每天换水量50%，吸污1次；吸污后换水。40日龄开始投喂桡足类后，每天换水量60%～100%，吸污1次；吸污后一次性换水50%，其余换水量采用流水方式完成。投喂配合饲料后每天换水100%～200%，每次投饵后吸污1次，一次性换水50%，并视水质情况加以适当流水。换水时，进水与池水的温差≤±1℃。仔稚鱼阶段换水网袋的网目为60目；进入幼鱼阶段后网目换成20目。6.4.2分苗育苗期间，在鱼苗90%以上鳞片长全后，开始第一次分苗。第一次分苗用瓢带水手工操作，将鱼苗分成大中小三类，分养在不同的育苗池中。此后一般每周分苗一次，可采用合适的苗筛分苗。每批鱼苗一般需要经过4～6次分苗。每天观察鱼苗摄食、活动、生长及死亡等情况，检查育苗水体中的饵料密度；测定水温、盐度、pH值、溶解氧和光照强度等理化因子，并作好记录。7病害防治以防为主，防治结合。保证饵料质量，保持水质良好。用药必须符合NY5071的规定，并做好用药记录。8苗种出池当培育至幼鱼平均全长≥10.0cm时，即可出池。出池前停食1天。出苗时放低水位至50cm～60cm，用8～10目网目规格的尼龙筛绢做成的围网，拉网集苗，带水捞苗出池。DB35/T1798—20186（资料性附录）激素植埋亲鱼雄性化技术激素植埋亲鱼雄性化技术是一种在亲鱼背肌中植埋激素药条，促使石斑鱼亲鱼雄性化的技术。操作分二步。第一步：激素药条的制作。取二个100mL烧杯，用移液管分别加入18mL蒸馏水，一个烧杯加入2g明胶颗粒，另一个烧杯加入2g阿拉伯胶颗粒，分别用酒精灯加热使其溶解，加热时用玻璃棒轻轻搅拌使其受热溶解均匀，制成10%的明胶溶液和10%的阿拉伯胶溶液。再取一个50mL烧杯，加入10g激素粉剂（17α-Methyltestosterone，纯度≥97%）和一滴植物油，在明胶和阿拉伯胶冷却至接近常温时，用移液管取2.5mL10%明胶水溶液和2.5mL阿拉伯胶水溶液加入已放置激素的烧杯中，用玻璃棒搅拌使其均匀成糊状，然后将药团移入体积为2.0cm（长）×2.0cm（宽）×0.2cm（厚）的玻璃制成型盘中；将药剂铺平，使其在成型盘中成为2.0cm（长）×2.0cm（宽）×0.2cm（厚）的平板状；一个小时后，移去固化盘边框，用手术刀片将成型盘中尚未完全固化的平板状药剂按0.2cm的间隔横切9刀，所制药剂即成10条2.0cm长、横切面为0.2cm×0.2cm的药条。在药条完全固化后即可装入50mL试剂瓶中密闭放入冰箱待用。以上所有制作过程需在无菌操作箱中进行。第二步：植入鱼体。在繁殖季节前6个月左右，选择需要雄性化的健康大型石斑鱼成体，移入池边便