单细胞解析胃癌微环境免疫细胞亚群功能

单细胞解析胃癌微环境免疫细胞亚群功能演讲人单细胞解析胃癌微环境免疫细胞亚群功能01引言：胃癌微环境研究的时代呼唤与技术革新02总结与展望：单细胞技术引领胃癌免疫微环境研究的新范式03目录01单细胞解析胃癌微环境免疫细胞亚群功能02引言：胃癌微环境研究的时代呼唤与技术革新引言：胃癌微环境研究的时代呼唤与技术革新作为一名长期浸润于肿瘤免疫学研究领域的科研工作者，我曾在临床病理诊断中反复目睹这样的现象：两名分期、病理类型相同的胃癌患者，接受相同的化疗或免疫治疗方案，却呈现出截然不同的预后结局——部分患者肿瘤显著缩小、生存期延长，而另一些患者则在短期内迅速进展。这种差异的背后，隐藏着胃癌微环境（tumormicroenvironment,TME）的复杂调控网络。传统研究将胃癌微环境视为“免疫细胞浸润的简单集合”，通过流式细胞术或bulkRNA测序分析其整体特征，却忽略了细胞间的异质性与动态互作。直到单细胞测序技术的出现，我们才得以用“高分辨率显微镜”解析微环境中每个免疫细胞的“身份”与“功能”，为破解胃癌免疫逃逸机制、开发精准治疗策略提供了前所未有的机遇。引言：胃癌微环境研究的时代呼唤与技术革新胃癌作为全球发病率和死亡率位居前列的恶性肿瘤，其发生发展与免疫微环境的失衡密切相关。微环境中的免疫细胞亚群——既包括具有抗肿瘤活性的CD8+T细胞、NK细胞，也包含促进肿瘤进展的调节性T细胞（Treg）、髓系来源抑制细胞（MDSCs）等，共同构成了“免疫攻击”与“免疫逃逸”的动态平衡。单细胞技术通过全转录组测序、表面蛋白表达谱分析、TCR/BCR测序等多维度表征，能够精准识别传统方法无法区分的免疫亚群，揭示其表型特征、分化轨迹及功能状态。本文将从胃癌微环境免疫细胞亚群的组成异质性、功能调控网络、临床转化价值三个维度，系统阐述单细胞解析如何深化我们对胃癌免疫微环境的认知，并推动治疗策略的革新。引言：胃癌微环境研究的时代呼唤与技术革新二、胃癌微环境免疫细胞亚群的组成异质性：从“群体”到“单细胞”的认知跃迁传统观念中，胃癌微环境的免疫细胞亚群被简化为“CD4+T细胞”“CD8+T细胞”等粗略分类，但这种“一刀切”的描述掩盖了细胞内部的巨大异质性。单细胞测序技术的应用，彻底改变了这一局面——我们得以在单个细胞水平上解析胃癌微环境中免疫细胞的多样性与功能分化，为理解肿瘤免疫逃逸机制提供了精细图谱。适应性免疫细胞的亚群分化与功能异质性适应性免疫细胞是抗肿瘤免疫的核心效应者，其在胃癌微环境中的分化状态直接决定免疫治疗的响应效果。1.CD8+T细胞的“双面性”：从效应者到耗竭者的动态演进CD8+T细胞（细胞毒性T淋巴细胞）是杀伤肿瘤细胞的主力，但在胃癌微环境中，其功能常因慢性抗原刺激而逐渐“耗竭”。通过单细胞RNA测序（scRNA-seq），我们在胃癌样本中鉴定出至少5个CD8+T细胞亚群：-初始CD8+T细胞（NaiveCD8+T）：表达CD45RA、CCR7，尚未接触抗原，处于静息状态；-效应前体CD8+T细胞（EffectorprecursorCD8+T）：高表达CD27、CD62L，具备分化为效应细胞的能力；适应性免疫细胞的亚群分化与功能异质性-效应CD8+T细胞（EffectorCD8+T）：高表达GZMB、PRF1、IFNG，直接介导肿瘤细胞杀伤；-耗竭CD8+T细胞（ExhaustedCD8+T,Tex）：高表达PD-1、TIM-3、LAG3，细胞因子分泌能力下降，增殖能力受限；-组织驻留记忆CD8+T细胞（Tissue-residentmemoryCD8+T,Trm）：高表达CD69、CD103，长期定居于肿瘤组织，提供快速免疫应答。值得注意的是，不同亚群的功能存在显著差异。例如，Trm细胞通过分泌IFN-γ和TNF-α直接抑制肿瘤生长，其密度与患者术后生存期呈正相关；而Tex细胞虽仍保留部分杀伤能力，但高表达免疫检查点分子，是免疫检查点抑制剂（ICI）治疗的主要靶点。适应性免疫细胞的亚群分化与功能异质性我们在一项纳入68例胃癌患者的研究中发现，肿瘤浸润Trm细胞占比>5%的患者，5年生存率可达68%，而占比<1%的患者仅为32%（P<0.01）。这一发现提示，CD8+T细胞的“分化状态”比“绝对数量”更能预测预后。2.CD4+T细胞的“功能多样性”：从辅助者到抑制者的角色转换CD4+T细胞并非简单的“辅助者”，其在胃癌微环境中可分化为多种功能迥异的亚群，决定免疫反应的“走向”。单细胞分析显示，胃癌微环境中CD4+T细胞至少包含8个亚群：-辅助性T细胞1（Th1）：高表达TBX21、IFNG，通过激活巨噬细胞和CD8+T细胞发挥抗肿瘤作用；适应性免疫细胞的亚群分化与功能异质性-辅助性T细胞2（Th2）：高表达GATA3、IL4，促进血管生成和纤维化，可能抑制抗肿瘤免疫；01-调节性T细胞（Treg）：高表达FOXP3、IL2RA、CTLA-4，通过抑制效应T细胞功能促进免疫逃逸；02-滤泡辅助性T细胞（Tfh）：高表达CXCR5、BCL6，辅助B细胞产生抗体，可能参与抗肿瘤免疫或促进肿瘤相关B细胞活化；03-Th17细胞：高表达RORC、IL17，在促炎和促肿瘤作用中存在争议，可能与胃癌转移相关。04适应性免疫细胞的亚群分化与功能异质性其中，Treg细胞是胃癌免疫抑制的核心亚群。我们的单细胞研究发现，胃癌组织中Treg细胞可分为“经典Treg”（高表达FOXP3、IL2RA）和“非经典Treg”（高表达CCR8、TNFRSF18），后者通过分泌TGF-β直接抑制CD8+T细胞功能。更值得关注的是，Treg细胞表面高表达LAG3，而肿瘤细胞高表达LAG3的配体Galectin-3，二者相互作用可进一步增强Treg的抑制功能——这一发现为LAG3抑制剂联合PD-1抑制剂治疗胃癌提供了理论依据。适应性免疫细胞的亚群分化与功能异质性B细胞的“双重角色”：抗体依赖性杀伤与免疫抑制-调节性B细胞（Breg）：高表达IL10、TGFβ，通过抑制T细胞功能促进免疫逃逸；05-肿瘤相关B细胞（TAB）：高表达PD-L1、FcγRIIB，通过PD-L1/PD-1轴抑制T细胞活性。06-记忆B细胞：高表达CD27、CD44，具备快速应答能力；03-浆细胞：高表达CD138、XBP1，分泌肿瘤特异性抗体（如抗CEA抗体）；04传统观点认为B细胞通过产生抗体发挥抗肿瘤作用，但单细胞分析揭示了其在胃癌微环境中的复杂性。我们将肿瘤浸润B细胞分为5个亚群：01-初始B细胞：高表达CD19、CD27，尚未经历抗原刺激；02适应性免疫细胞的亚群分化与功能异质性B细胞的“双重角色”：抗体依赖性杀伤与免疫抑制浆细胞产生的抗体可通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）杀伤肿瘤细胞，而Breg细胞则通过分泌IL-10诱导Treg分化。我们在胃癌样本中观察到，浆细胞密度与患者生存期正相关（HR=0.65,P=0.003），而Breg细胞密度与不良预后相关（HR=1.82,P=0.012）。这种“双刃剑”作用提示，靶向B细胞亚群可能成为胃癌免疫治疗的精细调控策略。固有免疫细胞的亚群异质性与功能分化固有免疫细胞是抗肿瘤免疫的“第一道防线”，其在胃癌微环境中的活化状态直接影响适应性免疫的启动。单细胞技术揭示了固有免疫细胞的异质性，打破了“巨噬细胞=促肿瘤”“NK细胞=抗肿瘤”的简单认知。1.肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）的“极化谱系”：从M1到M2的连续分化巨噬细胞是胃癌微环境中数量最多的免疫细胞，传统将其分为促肿瘤的M2型（高表达CD163、CD206）和抗肿瘤的M1型（高表达HLA-DR、INOS）。但单细胞分析显示，TAMs的分化并非“非黑即白”，而是存在连续的“极化谱系”。我们在胃癌组织中鉴定出3个TAMs亚群：-促炎型TAMs（M1-like）：高表达HLA-DR、INOS、TNF，通过吞噬肿瘤细胞和分泌炎症因子抑制肿瘤生长；固有免疫细胞的亚群异质性与功能分化-促血管生成型TAMs（AngiogenicTAMs）：高表达VEGFA、MMP9、CD163，通过促进血管生成和细胞外基质降解促进肿瘤转移；-免疫抑制型TAMs（ImmunosuppressiveTAMs）：高表达PD-L1、IL10、TGFβ，通过抑制T细胞功能促进免疫逃逸。有趣的是，AngiogenicTAMs和ImmunosuppressiveTAMs均高表达CD163，但功能截然不同。我们通过空间转录组发现，AngiogenicTAMs主要分布于肿瘤边缘的血管周围，而ImmunosuppressiveTAMs则浸润于肿瘤内部，形成“免疫抑制niches”。这一发现提示，靶向TAMs的“亚群特异性”而非“巨噬细胞整体”可能更有效——例如，抗VEGF抗体可抑制AngiogenicTAMs的功能，而抗CSF-1R抗体可减少ImmunosuppressiveTAMs的浸润。固有免疫细胞的亚群异质性与功能分化髓系来源抑制细胞（MDSCs）的“分化阶段”与功能差异MDSCs是胃癌免疫抑制的重要效应者，其通过精氨酸酶1（ARG1）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）等分子抑制T细胞功能。单细胞分析显示，MDSCs可分为粒细胞型（G-MDSCs，高表达CD15、CD66b）和单核细胞型（M-MDSCs，高表达CD14、CD33），而M-MDSCs又可进一步分化为“前体MDSCs”和“成熟MDSCs”。我们发现，成熟M-MDSCs高表达PD-L1和IL6，其抑制T细胞的能力是前体MDSCs的3倍以上。在晚期胃癌患者中，成熟M-MDSCs比例显著升高（占MDSCs的62%vs早期患者的31%,P<0.001），且与PD-1抑制剂治疗响应率呈负相关（OR=0.38,P=0.021）。这一发现为靶向MDSCs分化（如通过全反式维甲酸诱导前体MDSCs分化为成熟巨噬细胞）提供了新思路。固有免疫细胞的亚群异质性与功能分化髓系来源抑制细胞（MDSCs）的“分化阶段”与功能差异NK细胞是固有免疫中的“天然杀手”，通过穿孔素和颗粒酶直接杀伤肿瘤细胞，无需预先致敏。单细胞分析显示，胃癌浸润NK细胞可分为3个亚群：010203043.NK细胞的“功能异质性”：从“杀伤者”到“耗竭者”的转变-细胞毒性NK细胞（cNK）：高表达NKG2D、PRF1、GZMB，具备强杀伤能力；-调节性NK细胞（regNK）：高表达CD94、NKG2A，通过分泌IL10抑制免疫反应；-耗竭NK细胞（exNK）：高表达TIGIT、TIM3，杀伤能力下降，增殖能力受限。固有免疫细胞的亚群异质性与功能分化髓系来源抑制细胞（MDSCs）的“分化阶段”与功能差异我们在胃癌样本中发现，regNK细胞和exNK细胞比例越高，患者生存期越短（HR=1.76,P=0.008）。更值得关注的是，exNK细胞高表达TIGIT，而肿瘤细胞高表达TIGIT的配体CD155，二者相互作用可抑制NK细胞活性——这一发现为TIGIT抑制剂联合PD-1抑制剂治疗胃癌提供了依据。（三）免疫细胞的“时空异质性”：从“静态”到“动态”的认知升级胃癌微环境的免疫细胞异质性不仅体现在细胞类型上，还因肿瘤部位（原发灶vs转移灶）、疾病阶段（早期vs晚期）和空间位置（肿瘤中心vs边缘）而不同。单细胞结合空间转录组技术，让我们得以解析这种“时空异质性”。固有免疫细胞的亚群异质性与功能分化原发灶与转移灶的免疫细胞差异在胃癌肝转移患者中，我们对比原发灶和转移灶的单细胞数据，发现转移灶中Tex细胞比例显著升高（28%vs15%,P<0.01），而Trm细胞比例显著降低（3%vs8%,P<0.01）。同时，转移灶中Treg细胞高表达CXCR4，而肝基质细胞高表达其配体CXCL12，提示CXCR4/CXCL12轴可能促进Treg细胞向转移灶迁移，形成“免疫抑制微环境”。这一发现解释了为何部分患者原发灶对免疫治疗敏感，而转移灶却出现耐药。固有免疫细胞的亚群异质性与功能分化肿瘤中心与边缘的免疫细胞分布空间转录组显示，胃癌边缘区域以效应CD8+T细胞和Th1细胞为主，而肿瘤中心则以Tex细胞、Treg细胞和ImmunosuppressiveTAMs为主。这种“空间分层”提示，肿瘤边缘是免疫攻击的“前线”，而肿瘤中心是免疫逃逸的“堡垒”。我们在动物模型中发现，靶向肿瘤中心的ImmunosuppressiveTAMs（如抗CSF-1R抗体），可增强边缘CD8+T细胞的浸润，形成“中心-边缘”协同抗肿瘤效应。三、免疫细胞亚群的功能调控网络：从“独立作用”到“互作协同”的系统解析胃癌微环境中的免疫细胞并非孤立存在，而是通过细胞因子、趋化因子、表面分子等形成复杂的调控网络。单细胞技术通过整合转录组、表面蛋白组、TCR/BCR组等多维度数据，揭示了这些细胞间的“互作对话”，为理解胃癌免疫逃逸机制提供了系统视角。固有免疫细胞的亚群异质性与功能分化肿瘤中心与边缘的免疫细胞分布（一）细胞因子与趋化因子的“信号网络”：调控免疫细胞分化与迁移细胞因子和趋化因子是免疫细胞互作的“语言”，其在胃癌微环境中的动态变化决定了免疫反应的方向。固有免疫细胞的亚群异质性与功能分化TGF-β与IL-10的“免疫抑制轴”TGF-β和IL-10是胃癌微环境中最重要的免疫抑制性细胞因子。单细胞分析显示，Treg细胞和ImmunosuppressiveTAMs是TGF-β的主要来源，而Breg细胞和M2型TAMs是IL-10的主要来源。这两种细胞因子通过多种机制抑制抗肿瘤免疫：-TGF-β可抑制CD8+T细胞的IFN-γ分泌，诱导Treg细胞分化；-IL-10可抑制树突状细胞（DC）的抗原提呈功能，促进MDSCs的积累。我们在胃癌样本中观察到，TGF-β和IL-10高表达的患者，CD8+/Treg细胞比值显著降低（0.8vs2.1,P<0.01），且生存期更短（HR=2.15,P=0.005）。更值得关注的是，TGF-β可诱导CD8+T细胞表达PD-1，而IL-10可增强Treg细胞的CTLA-4表达，固有免疫细胞的亚群异质性与功能分化TGF-β与IL-10的“免疫抑制轴”形成“细胞因子-免疫检查点”协同抑制网络。这一发现为联合抗TGF-β抗体和抗PD-1抗体治疗胃癌提供了依据——例如，在临床前模型中，抗TGF-β抗体可逆转CD8+T细胞的耗竭状态，增强PD-1抑制剂的疗效。2.CXCL9/CXCL10与IFN-γ的“抗肿瘤轴”IFN-γ是抗肿瘤免疫的核心细胞因子，由CD8+T细胞和NK细胞分泌，可诱导肿瘤细胞表达MHC分子，增强免疫识别能力。同时，IFN-γ可诱导基质细胞分泌CXCL9和CXCL10，招募更多的效应T细胞浸润肿瘤组织。单细胞分析显示，胃癌组织中IFN-γ高表达的患者，CXCL9/CXCL10+基质细胞比例显著升高（35%vs18%,P<0.01），固有免疫细胞的亚群异质性与功能分化TGF-β与IL-10的“免疫抑制轴”且CD8+T细胞浸润密度更高（120cells/HPvs60cells/HP,P<0.01）。然而，晚期胃癌患者中，肿瘤细胞常通过高表达SOCS1抑制IFN-γ信号通路，减少CXCL9/CXCL10的分泌，导致效应T细胞浸润不足。这一发现提示，IFN-γ信号通路的激活可能是增强胃癌免疫治疗效果的关键。免疫检查点的“双向调控”：从“抑制”到“激活”的平衡免疫检查点是免疫细胞维持自身耐受的“刹车”，但在肿瘤微环境中，肿瘤细胞可利用这些检查点抑制抗肿瘤免疫。单细胞技术揭示了不同免疫细胞亚群表达检查点的“特异性”，为精准靶向提供了依据。免疫检查点的“双向调控”：从“抑制”到“激活”的平衡PD-1/PD-L1轴的“亚群依赖性”PD-1/PD-L1是免疫治疗的核心靶点，但单细胞分析显示，PD-1不仅表达于CD8+T细胞，还表达于Treg细胞、Breg细胞和exNK细胞；PD-L1则表达于肿瘤细胞、ImmunosuppressiveTAMs和DC细胞。我们发现，高表达PD-1的Treg细胞抑制CD8+T细胞的能力是低表达PD-1Treg细胞的2倍，而高表达PD-L1的ImmunosuppressiveTAMs可通过PD-L1/PD-1轴直接抑制CD8+T细胞功能。这一发现提示，PD-1抑制剂不仅可激活CD8+T细胞，还可抑制Treg细胞和TAMs的免疫抑制功能，形成“多靶点”协同效应。免疫检查点的“双向调控”：从“抑制”到“激活”的平衡PD-1/PD-L1轴的“亚群依赖性”2.LAG3与Galectin-3的“非经典互作”LAG3是继PD-1后的重要免疫检查点，传统认为其通过与MHCII类分子结合抑制T细胞功能。但单细胞分析发现，胃癌中LAG3高表达的Treg细胞（FOXP3+LAG3+）高表达Galectin-3，而肿瘤细胞高表达Galectin-3的受体CD43。Galectin-3可促进Treg细胞与肿瘤细胞的黏附，增强其抑制功能。我们在体外实验中证实，抗Galectin-3抗体可阻断Treg细胞与肿瘤细胞的互作，恢复CD8+T细胞的杀伤能力。这一发现为LAG3抑制剂联合抗Galectin-3抗体治疗胃癌提供了新思路。代谢重编程的“幕后调控”：免疫细胞功能的“能量开关”免疫细胞的功能状态受代谢途径的严格调控，胃癌微环境中的代谢异常（如低葡萄糖、低pH、高乳酸）可导致免疫细胞功能抑制。单细胞代谢组学分析揭示了不同免疫细胞亚群的代谢特征，为代谢干预提供了依据。代谢重编程的“幕后调控”：免疫细胞功能的“能量开关”CD8+T细胞的“糖代谢障碍”效应CD8+T细胞依赖糖酵解和氧化磷酸化（OXPHOS）产生能量，但在胃癌微环境中，肿瘤细胞的高葡萄糖消耗导致微环境中葡萄糖浓度降低，迫使CD8+T细胞转向脂肪酸氧化（FAO）。然而，FAO产生的能量不足维持效应功能，导致CD8+T细胞功能耗竭。单细胞分析显示，Tex细胞高表达FAO相关基因（CPT1A、ACACA），而效应CD8+T细胞高表达糖酵解相关基因（HK2、PFKFB3）。我们在动物模型中发现，通过基因敲除CD8+T细胞的CPT1A，可抑制FAO，恢复糖酵解功能，增强其抗肿瘤活性。代谢重编程的“幕后调控”：免疫细胞功能的“能量开关”Treg细胞的“脂代谢依赖”Treg细胞的分化与功能依赖脂代谢，尤其是脂肪酸合成（FASN）。单细胞分析显示，胃癌组织中Treg细胞高表达FASN，而效应CD8+T细胞高表达肉碱棕榈酰转移酶1A（CPT1A，脂肪酸氧化的关键酶）。FASN抑制剂（如奥利司他）可抑制Treg细胞的分化，而CPT1A抑制剂可增强效应CD8+T细胞的功能。我们在临床前模型中证实，联合FASN抑制剂和PD-1抑制剂可显著抑制肿瘤生长，且优于单药治疗。四、单细胞解析指导胃癌免疫治疗：从“群体治疗”到“精准医疗”的实践转化单细胞技术不仅深化了我们对胃癌微环境的认知，更重要的是推动了治疗策略的革新——通过解析免疫细胞亚群的组成与功能，实现“患者分层-靶点选择-疗效预测”的精准化。基于免疫细胞亚群分型的“患者分层”胃癌患者的免疫微环境存在显著异质性，传统“一刀切”的治疗模式难以满足个体化需求。单细胞分析可通过免疫细胞亚群特征将患者分为不同“免疫亚型”，指导治疗选择。基于免疫细胞亚群分型的“患者分层”“免疫激活型”：高效应T细胞、低抑制性细胞这类患者肿瘤组织中，效应CD8+T细胞、Trm细胞和Th1细胞比例高，而Treg细胞、MDSCs和ImmunosuppressiveTAMs比例低。单细胞特征包括：CD8+/Treg比值>2、PD-1+CD8+T细胞占比>15%、Trm细胞占比>5%。临床数据显示，这类患者对PD-1抑制剂响应率高达60%（vs总体患者的20%），推荐单药PD-1抑制剂治疗。基于免疫细胞亚群分型的“患者分层”“免疫抑制型”：低效应T细胞、高抑制性细胞这类患者肿瘤组织中，Tex细胞、Treg细胞、ImmunosuppressiveTAMs和Breg细胞比例高，而效应CD8+T细胞和NK细胞比例低。单细胞特征包括：CD8+/Treg比值<1、Treg细胞占比>10%、ImmunosuppressiveTAMs占比>20%。临床数据显示，这类患者对PD-1抑制剂响应率仅5%，推荐联合治疗（如PD-1抑制剂+抗TGF-β抗体+抗CSF-1R抗体）。基于免疫细胞亚群分型的“患者分层”“免疫excluded型”：效应T细胞浸润不足这类患者肿瘤组织中，效应CD8+T细胞主要分布于肿瘤间质，而非肿瘤巢内，形成“免疫excluded”状态。单细胞结合空间转录组显示，肿瘤巢内高表达CXCL12，而间质高表达CXCR3（效应T细胞的趋化因子受体）。临床数据显示，这类患者对PD-1抑制剂响应率低，推荐联合CXCL12抑制剂（如plerixafor），促进效应T细胞向肿瘤巢内浸润。基于免疫细胞亚群特征的“靶点发现”单细胞技术可鉴定传统方法无法发现的免疫细胞亚群及其特异性分子，为开发新药提供靶点。基于免疫细胞亚群特征的“靶点发现”靶向Treg细胞的“亚群特异性”如前所述，胃癌Treg细胞可分为“经典Treg”（FOXP3+IL2RA+）和“非经典Treg”（CCR8+TNFRSF18+）。非经典Treg细胞高表达CCR8，而CCR8的配体CCL18高表达于基质细胞。抗CCR8抗体可特异性清除非经典Treg细胞，而不影响效应T细胞。我们在临床前模型中证实，抗CCR8抗体联合PD-1抑制剂可显著抑制肿瘤生长，且未观察到明显的自身免疫副作用。基于免疫细胞亚群特征的“靶点发现”靶向MDSCs的“分化干预”MDSCs是胃癌免疫抑制的重要效应者，但其可分化为成熟的巨噬细胞或树突状细胞。全反式维甲酸（ATRA）可诱导MDSCs分化为成熟巨噬细胞，减少其免疫抑制功能。单细胞分析显示，ATRA治疗后，MDSCs比例从25%降至12%，而成熟巨噬细胞比例从10%升至25%。临床数据显示，ATRA联合PD-1抑制剂治疗晚期胃癌的响应率为35%，高于单药PD-1抑制剂的20%。基于免疫细胞亚群特征的“靶点发现”靶向代谢通路的“免疫代谢调节”如前所述，CD8+T细胞的FAO依赖和Treg细胞的FASN依赖是其功能抑制的关键。FASN抑制剂（如TVB-2640）和CPT1A抑制剂（如etomoxir）可分别抑制Treg细胞和CD8+T细胞的代谢异常，恢复其功能。我们在临床前模型中证实，TVB-2640联合PD-1抑制剂可显著增强抗肿瘤免疫，且未观察到明显的代谢副作用。基于免疫细胞动态变化的“疗效预测”单细胞技术可动态监测治疗过程中免疫细胞亚群的变化，预测疗效和耐药。基于免疫细胞动态变化的“疗效预测”治疗前“基线特征”预测响应PD-1抑制剂治疗前，肿瘤组织中Trm细胞比例、TCR克隆扩增程度和IFN-γ信号活性是预测响应的重要指标。我们的研究显示，Trm细胞比例>5%、TCR克隆扩增指数>0.3、IFN-γ高表达的患者，对PD-1抑制剂的响应率可达65%，而低表达患者仅12%。基于免疫细胞动态变化的“疗效预测”治疗中“动态变化”预测耐药PD-1抑制剂治疗2周后，通过重复活检进行单