检验科生物安全柜操作与防护行为规范

检验科生物安全柜操作与防护行为规范演讲人2026-01-08

04/操作中：标准化流程与关键行为控制03/操作前：从环境确认到个人防护的全方位准备02/生物安全柜的核心功能与风险认知01/引言：生物安全柜——检验科生物安全的核心屏障06/操作后：清洁消毒与设备维护的闭环管理05/应急处置：从突发状况到风险阻断的快速响应08/总结：规范为基，责任为魂，筑牢生物安全防线07/人员培训与意识提升：安全行为的根基目录

检验科生物安全柜操作与防护行为规范01ONE引言：生物安全柜——检验科生物安全的核心屏障

引言：生物安全柜——检验科生物安全的核心屏障作为一名在检验科工作十余年的专业人员，我深知实验室生物安全是检验质量的基石，而生物安全柜（BiologicalSafetyCabinet,BSC）作为实验室中handling感染性样本的核心设备，其操作规范与防护行为直接关系到实验人员、样本及环境的三重安全。犹记2018年，某科室因未严格遵循生物安全柜操作流程，导致一例布鲁菌样本疑似气溶胶扩散，造成2名工作人员出现发热、乏力等临床症状，虽及时干预未引发严重后果，但这一事件让我深刻意识到：生物安全柜的操作绝非简单的“开关机器”，而是需要系统认知、规范动作与责任意识共同支撑的“生命工程”。本文将从生物安全柜的核心功能与风险认知出发，系统梳理操作前准备、操作中规范、应急处置、维护保养及人员培训全流程要点，旨在为检验科同仁提供一套“可执行、可追溯、可优化”的操作与防护行为规范，筑牢实验室生物安全防线。02ONE生物安全柜的核心功能与风险认知

1生物安全柜的定义与分类生物安全柜是一种负压过滤排风柜，通过高效空气过滤器（HEPA）对操作区域空气进行过滤，实现对操作人员、实验样本及环境的保护。根据《生物安全实验室建筑技术规范》（GB50346-2011），生物安全柜分为I级、II级和III级，其中检验科最常用的是II级生物安全柜（A1/A2型）和部分III级生物安全柜（手套箱型）。-I级生物安全柜：仅保护操作人员和环境，样本不保护，适用于对样本无挥发性毒害物质的操作；-II级生物安全柜：同时保护人员、样本和环境，是目前检验科处理临床样本（如血液、体液、分泌物）的主流设备；-III级生物安全柜：提供最高级别防护，全密闭操作，适用于高致病性病原体（如埃博拉病毒、炭疽杆菌）的操作。

2生物安全柜的核心功能01生物安全柜的核心功能通过“三重保护”实现：02-人员保护：通过操作区负压设计，使柜内气流从操作人员方向流向柜内，结合HEPA过滤器过滤可能携带病原体的气溶胶；03-样本保护：通过HEPA过滤器送入洁净空气，避免外界微生物污染样本；04-环境保护：通过HEPA过滤器过滤排风，避免柜内病原体扩散至实验室环境。

3检验科常见风险点识别结合多年工作经验，检验科生物安全柜操作中的风险主要集中在以下四类：-管理流程风险：如未定期进行设备认证、操作人员无资质培训、应急处置预案缺失等，增加事故发生概率；-设备本身风险：如HEPA滤器泄漏、风机故障、紫外灯失效等，导致保护功能丧失；-操作行为风险：如物品摆放遮挡回风区、操作动作幅度过大产生气溶胶、未及时消毒等，直接破坏气流平衡；-样本特性风险：如处理高浓度菌液、离心后样本、具有传染性的临床标本时，若操作不规范，极易引发暴露事件。010203040503ONE操作前：从环境确认到个人防护的全方位准备

操作前：从环境确认到个人防护的全方位准备操作前的充分准备是保障生物安全柜功能发挥的“第一道关口”，任何环节的疏漏都可能埋下安全隐患。根据《临床实验室质量保证》（CLSI指南）要求，操作前需完成“环境-设备-人员-物品”四维确认。

1环境评估与准备-3.1.1实验室布局要求：生物安全柜应放置在远离人员频繁走动区域、门窗及通风口的位置，避免气流干扰。理想情况下，安全柜周围应留有≥30cm的维护空间，顶部留有≥30cm的排风空间。我曾见过某实验室将安全柜紧贴墙壁放置，导致排风不畅，风机频繁报警，经调整位置后才恢复正常。-3.1.2电力与通风系统检查：确认生物安全柜电源为独立专用回路，避免与其他大功率设备共用，防止电压波动影响风机运行。同时，实验室应具备独立的通风系统，确保生物安全柜排风可直排室外或通过高效过滤后排放，严禁将排风管道接入实验室空调系统。

2生物安全柜状态检查-3.2.1开机预检流程：（1）紫外灯消毒：操作前30分钟开启紫外灯，对操作区进行表面消毒（注意：紫外灯消毒仅对物体表面有效，不能替代空气过滤，且人员不得在紫外灯开启时进入操作区）；（2）风机运行测试：开启风机，运行5分钟后，用风速仪检测操作区平均风速（II级生物安全柜标准风速为0.35-0.54m/s），若风速异常需停机检修；（3）气密性检查：对于III级生物安全柜，需每月进行气密性测试，确保在500Pa压差下，泄漏率＜0.5%/min；（4）HEPA滤器完整性测试：每年至少一次，采用DOP（邻苯二甲酸二辛酯）气溶胶或PAO（邻苯二甲酸辛酯）进行扫描检测，滤器无泄漏为合格。-3.2.2常见故障识别：如风机启动后噪音异常、操作区玻璃门无法正常升降、紫外灯不亮等，需立即停止操作，联系设备工程师维修，严禁“带故障运行”。

3个人防护装备（PPE）的选择与穿脱-3.3.1PPE配置原则：根据样本的生物危害等级（BSL-1至BSL-3）选择相应防护级别。检验科常规操作（如血清检测、普通细菌培养）至少需佩戴：-一次性乳胶手套（或丁腈手套，需无粉、耐酸碱）；-防护服（长袖、防水、无纽扣）；-医用外科口罩（或N95口罩，若操作产生气溶胶）；-护目镜/防护面屏（处理具有喷溅风险的样本时）。-3.3.2穿脱规范：（1）穿戴顺序：先洗手→戴口罩→穿防护服→戴护目镜→戴手套（手套袖口需覆盖防护服袖口）；（2）脱卸顺序：先脱手套→消毒双手→脱防护服（反面朝外）→脱护目镜→脱口罩→洗手

3个人防护装备（PPE）的选择与穿脱。特别强调：脱卸过程中需避免手套接触面部或防护服外表面，全程保持“内uncontaminated、外contaminated”原则。

4样品与试剂预处理-3.4.1样品标识与分类：所有样本需清晰标注“生物危害标识”（如BSL-2标识），并按检测项目分类存放，避免交叉污染。-3.4.2试剂与耗材准备：将实验所需试剂、耗材（如移液管、离心管、培养皿）提前放入生物安全柜内，用75%乙醇擦拭表面消毒。需注意：-避免一次性放入过多物品，确保操作区留有足够空间；-液体试剂应放置在操作区后部，固体试剂放置在前部，减少手臂移动幅度；-移液管、tip枪头等需拆除外包装后放入，避免包装材料污染操作区。04ONE操作中：标准化流程与关键行为控制

操作中：标准化流程与关键行为控制操作过程中的行为规范是保障生物安全的核心环节，任何不规范动作都可能破坏生物安全柜的气流平衡，导致暴露风险。根据WHO《生物安全实验室操作手册》，操作中需遵循“最小化动作、单向流动、及时消毒”三大原则。

1标准操作流程（SOP）制定与执行-4.1.1开机与参数确认：（1）完成操作前检查后，开启风机和照明灯，运行10-15分钟，待操作区气流稳定；（2）将风速仪放置在操作区中央及四角，确认风速在标准范围内（II级安全柜0.35-0.54m/s）；（3）将装有培养基的培养皿敞开15分钟，盖上后置于37℃培养24小时，监测无菌状况（若有菌落生长，提示HEPA滤器可能泄漏或操作区消毒不彻底）。-4.1.2样本操作规范：（1）样本开盖：将样本管倾斜45，用镊子或移液管轻轻开盖，避免垂直开盖产生气溶胶；

1标准操作流程（SOP）制定与执行231（2）移液操作：使用正向移液法（慢吸快排），避免反复吹打；若需混匀，应涡旋振荡而非剧烈震荡；（3）离心处理：离心管需加盖密封，离心后静置1分钟再开盖，开盖时管口朝向远离操作者的方向；（4）阳性样本处理：对HIV、HBV等阳性样本，需在生物安全柜内加入含有效氯5000mg/L的消毒剂作用30分钟后，再移出处理。

2操作行为“红线”与“底线”（1）在生物安全柜内进行样本离心、剧烈震荡等可能产生大量气溶胶的操作（除非使用安全离心杯）；在右侧编辑区输入内容（3）在生物安全柜内放置与实验无关的物品（如手机、个人衣物）；在右侧编辑区输入内容（1）采用“无接触操作”：如使用三用枪头吸取液体，避免手直接接触移液管尖端；在右侧编辑区输入内容（3）及时清理污染物：若有样本泼洒，立即用吸水纸覆盖，倒入5000mg/L含氯消毒剂作用30分钟后擦拭。在右侧编辑区输入内容-4.2.1严禁行为：在右侧编辑区输入内容（2）将手臂伸入操作区上方或操作区外进行操作（如取用远处试剂）；在右侧编辑区输入内容（4）使用明火（如酒精灯）消毒，破坏气流平衡并可能损坏HEPA滤器。-4.2.2推荐行为：（2）减少手臂移动幅度：操作时肘部贴近身体，动作缓慢平稳；在右侧编辑区输入内容

3气溶胶产生风险的控制气溶胶是实验室感染的主要途径，直径1-5μm的颗粒可进入肺泡并导致感染。检验科常见气溶胶产生场景包括：-样本混匀时剧烈震荡；-离心管破裂或未加盖；-移液时枪头尖端触碰管壁；-开盖时液体飞溅。控制措施：-使用带滤芯的移液器（如正压移液器）；-离心前确认离心管平衡，使用密封离心罐；-在生物安全柜内操作时，将样本管置于带网格的架子上，减少晃动；-定期进行气溶胶发生实验（如用荧光素标记样本），评估操作规范性。05ONE应急处置：从突发状况到风险阻断的快速响应

应急处置：从突发状况到风险阻断的快速响应即使严格遵循操作规范，突发情况仍可能发生（如样本泄漏、设备故障、人员暴露）。完善的应急处置机制是降低事故后果的关键。

1常见突发情况分类与处置流程在右侧编辑区输入内容-5.1.1样本泄漏或泼洒：在右侧编辑区输入内容（1）立即停止操作，关闭生物安全柜风机（若泄漏为大量传染性物质，可保持风机运行以防止扩散）；在右侧编辑区输入内容（2）佩戴双层手套，穿上防水围裙和鞋套，用吸水纸覆盖泄漏区域；在右侧编辑区输入内容（3）倾倒含氯5000-10000mg/L消毒液，作用30分钟后，用镊子将污染废弃物放入生物危害垃圾袋；在右侧编辑区输入内容（4）用消毒液擦拭操作区表面，开启风机运行30分钟后重新消毒；-5.1.2人员暴露（如黏膜接触、皮肤破损）：（5）记录泄漏事件（时间、样本类型、处置过程），上报实验室负责人。

1常见突发情况分类与处置流程（1）黏膜暴露：立即用大量生理盐水或流动清水冲洗15分钟（如眼睛冲洗需翻开眼睑）；在右侧编辑区输入内容（2）皮肤破损：立即从伤口近心端向远心端挤压，排出污染物，再用肥皂水和流动水冲洗15分钟；在右侧编辑区输入内容（3）及时就医，告知医生暴露样本的生物危害信息，并填写职业暴露报告表。-5.1.3生物安全柜故障（如风机停转、紫外灯失效）：（1）立即停止操作，将柜内物品用75%乙醇擦拭后移出；在右侧编辑区输入内容（2）若为风机停转，关闭电源，防止外界空气进入；若为紫外灯失效，暂停使用需要紫外消毒的操作；在右侧编辑区输入内容（3）联系设备工程师维修，维修后需重新进行风速、HEPA滤器检测，合格方可使用。在右侧编辑区输入内容

2应急物资储备与演练-5.2.1应急物资配置：检验科应配备应急药箱（含生理盐水、碘伏、消毒棉签）、个人防护装备（备用防护服、口罩、手套）、消毒剂（含氯消毒液、75%乙醇）及生物危害垃圾袋等，并定期检查物资有效期。-5.2.2定期演练：每季度组织一次应急演练，模拟样本泄漏、人员暴露等场景，检验人员处置能力及流程有效性，演练后需总结问题并改进预案。06ONE操作后：清洁消毒与设备维护的闭环管理

操作后：清洁消毒与设备维护的闭环管理操作后的清洁消毒与设备维护是确保生物安全柜长期稳定运行的“最后一公里”，需形成“操作-清洁-检测-记录”的闭环。

1清洁消毒流程在右侧编辑区输入内容-6.1.1物品清理：在右侧编辑区输入内容（1）将实验废弃物分类放入专用容器：生物危害垃圾（污染耗材、样本）放入黄色垃圾袋，锐器放入利器盒；-6.1.2操作区消毒：（2）可重复使用的器材（如镊子、离心管架）用含氯2000mg/L消毒液浸泡30分钟后，清洗干净烘干备用。在右侧编辑区输入内容（1）用75%乙醇从内到外、从上至下擦拭操作区表面（包括玻璃门、侧壁、工作台面）；在右侧编辑区输入内容（2）对格栅回风口用软毛刷清除灰尘，再用消毒液擦拭；在右侧编辑区输入内容（3）开启紫外灯消毒30分钟，关闭风机和照明灯，锁好生物安全柜。

2设备定期维护与认证-6.2.1日常维护：（1）每日记录风机运行时间、紫外灯使用时间；（2）每周清洁生物安全柜外表面及防尘网；（3）每月检查风机皮带松紧度，必要时更换。-6.2.2定期认证：（1）每年由具备资质的第三方机构进行生物安全柜性能检测（包括风速、HEPA滤器完整性、沉降菌、浮游菌等）；（2）若设备移动、维修或更换滤器后，需重新进行认证；（3）认证报告需存档保存，确保设备状态可追溯。

3记录与追溯管理建立生物安全柜使用记录表，内容包括：使用日期、使用人、操作项目、设备运行状态、清洁消毒情况、异常事件及处置措施等。记录需保存至少3年，便于追溯问题事件及分析改进。07ONE人员培训与意识提升：安全行为的根基

人员培训与意识提升：安全行为的根基再完善的设备与流程，若缺乏具备安全意识的人员，也无法发挥有效作用。人员培训与意识提升是生物安全管理的“灵魂工程”。

1培训体系构建21-7.1.1岗前培训：新入职人员需完成生物安全理论培训（包括生物安全柜原理、操作规范、应急处置）和实操考核（物品摆放、PPE穿脱、样本处理），考核合格后方可独立操作。-7.1.3专项培训：针对高致病性样本操作、应急演练等场景，开展小班化、实操性专项培训，提升人员应对复杂情况的能力。-7.1.2在岗培训：每年至少组织2次生物安全知识更新培训，内容包括新颁布的法规（如