淋巴瘤免疫治疗耐药的信号通路分析

淋巴瘤免疫治疗耐药的信号通路分析演讲人CONTENTS淋巴瘤免疫治疗耐药的信号通路分析淋巴瘤免疫治疗的现状与耐药的临床挑战淋巴瘤免疫治疗耐药的核心信号通路分析耐药信号通路间的交叉调控网络基于信号通路的耐药逆转策略与展望总结与展望目录01淋巴瘤免疫治疗耐药的信号通路分析淋巴瘤免疫治疗耐药的信号通路分析作为临床研究者，我们始终在探索淋巴瘤治疗的新路径。免疫治疗的出现，尤其是PD-1/PD-L1抑制剂、CAR-T细胞疗法等的应用，彻底改变了部分淋巴瘤的治疗格局，让既往“无解”的患者看到了长期生存的希望。然而，临床实践中一个不容忽视的现实是：相当比例的患者在初始治疗有效后最终出现耐药，导致疾病进展或复发。耐药机制复杂多变，其中信号通路的异常调控是核心环节之一。本文将从淋巴瘤免疫治疗的现有策略出发，系统分析耐药过程中涉及的信号通路网络，探讨其分子机制及潜在干预靶点，为克服耐药、优化治疗策略提供理论依据。02淋巴瘤免疫治疗的现状与耐药的临床挑战淋巴瘤免疫治疗的主要策略及疗效淋巴瘤是一组异质性极高的恶性肿瘤，根据病理类型可分为霍奇金淋巴瘤（HL）和非霍奇金淋巴瘤（NHL）。近年来，免疫治疗在多种淋巴瘤亚型中展现出显著疗效：1.免疫检查点抑制剂（ICIs）：以PD-1/PD-L1抑制剂（如帕博利珠单抗、纳武利尤单抗、阿替利珠单抗）为代表，通过阻断PD-1/PD-L1通路恢复T细胞抗肿瘤活性。在经典型霍奇金淋巴瘤（cHL）中，PD-L1阳性率高达95%，PD-1抑制剂单药缓解率可达60%-70%；在复发/难治性（R/R）弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）、滤泡性淋巴瘤（FL）等NHL中，联合化疗或单药也显示出一定疗效。2.CAR-T细胞疗法：以CD19CAR-T（如tisagenlecleucel、axicabtageneciloleucel）为代表，通过基因修饰改造患者自身T细胞，使其特异性识别肿瘤表面抗原。在R/RDLBCL中，CAR-T治疗的完全缓解（CR）率可达40%-50%，部分患者可实现长期无病生存。淋巴瘤免疫治疗的主要策略及疗效3.其他免疫治疗：包括免疫调节剂（如来那度胺）、治疗性疫苗、双特异性抗体（如CD20/CD3靶向的epcoritamab）等，通过不同机制增强抗肿瘤免疫应答。耐药的临床表现与分类尽管免疫治疗疗效显著，但耐药问题始终是制约其长期疗效的关键。根据耐药发生的时间，可分为：1.原发性耐药：指初始治疗即无效或疾病持续进展，多见于肿瘤负荷高、微环境免疫抑制明显的患者。2.继发性耐药：指初始治疗有效后，在治疗过程中或停药后出现疾病进展，是临床更常见的类型，如PD-1抑制剂治疗后中位缓解时间约12-18个月，部分患者最终耐药进展。从耐药机制层面，可分为：-肿瘤细胞内在耐药：肿瘤细胞自身基因突变或信号通路异常，导致免疫原性降低或免疫逃逸能力增强。耐药的临床表现与分类-肿瘤微环境（TME）介导的耐药：免疫抑制细胞（如Tregs、MDSCs）、抑制性细胞因子（如TGF-β、IL-10）或代谢产物（如腺苷）重塑微环境，抑制效应T细胞功能。-免疫细胞功能异常：T细胞耗竭、耗竭相关受体（如PD-1、TIM-3、LAG-3）高表达，或CAR-T细胞在体内增殖、持久性能力下降。03淋巴瘤免疫治疗耐药的核心信号通路分析淋巴瘤免疫治疗耐药的核心信号通路分析耐药的发生并非单一因素所致，而是多信号通路交叉调控的结果。本文将从肿瘤细胞内在、TME及免疫细胞三个维度，系统分析关键信号通路在耐药中的作用。肿瘤细胞内在耐药信号通路1.Wnt/β-catenin信号通路异常激活Wnt/β-catenin通路是调控细胞增殖、分化的经典通路，在多种肿瘤中异常激活。在淋巴瘤免疫治疗耐药中，其作用机制包括：-抑制T细胞浸润：β-catenin可上调肿瘤细胞趋化因子（如CXCL12、CCL28）表达，招募Tregs和髓系来源抑制细胞（MDSCs），同时减少效应T细胞趋化因子（如CXCL9、CXCL10）分泌，形成“冷肿瘤”微环境。临床研究显示，DLBCL中β-catenin激活患者PD-1抑制剂疗效显著低于非激活患者。-降低肿瘤免疫原性：β-catenin可下调MHC-I类分子、抗原加工相关蛋白（如TAP1、LMP2）表达，减少肿瘤抗原呈递，使T细胞无法有效识别肿瘤细胞。-促进肿瘤干细胞（CSC）富集：Wnt/β-catenin信号维持CSC自我更新能力，而CSC常对免疫治疗不敏感，是耐药和复发的重要来源。肿瘤细胞内在耐药信号通路JAK-STAT信号通路失调JAK-STAT通路是细胞因子信号转导的核心，在淋巴瘤中常存在突变或异常激活，如STAT3、STAT6持续磷酸化。其耐药机制包括：01-介导免疫抑制微环境：STAT3可上调PD-L1、IL-10、VEGF等表达，抑制效应T细胞功能，促进Tregs分化。在R/RHL患者中，STAT3高表达与PD-1抑制剂耐药显著相关。02-促进肿瘤细胞增殖与存活：STAT3可激活Bcl-2、CyclinD1等抗凋亡和细胞周期蛋白，增强肿瘤细胞对免疫攻击的耐受能力。03-干扰CAR-T细胞功能：肿瘤细胞分泌的IL-6等细胞因子通过JAK-STAT3通路抑制CAR-T细胞的增殖和细胞毒性，是CAR-T治疗耐药的重要原因之一。04肿瘤细胞内在耐药信号通路PI3K/AKT/mTOR信号通路过度激活PI3K/AKT/mTOR通路是调控细胞代谢、增殖和存活的关键通路，在B细胞淋巴瘤（如DLBCL、FL）中常因PIK3CA突变、PTEN缺失而激活。其耐药机制包括：-抑制T细胞活化：肿瘤细胞通过分泌IL-10、TGF-β等，激活PI3K/AKT通路，诱导T细胞无能或耗竭。-促进代谢重编程：AKT/mTOR信号增强肿瘤细胞糖酵解和氧化磷酸化，消耗微环境中葡萄糖，剥夺效应T细胞的能量来源，导致T细胞功能衰竭。-上调PD-L1表达：PI3K/AKT/mTOR通路可激活NF-κB信号，上调PD-L1表达，增强免疫检查点抑制效应。3214肿瘤细胞内在耐药信号通路B细胞受体（BCR）信号通路异常BCR通路是B细胞淋巴瘤的关键存活信号，在DLBCL（尤其活化B细胞亚型，ABC-DLBCL）中常存在CD79B、MYD88突变，导致BCR通路持续激活。其耐药机制包括：-促进肿瘤细胞增殖与存活：BCR通路激活NF-κB、MAPK等信号，上调抗凋亡蛋白（如Bcl-xL），增强肿瘤细胞对免疫杀伤的抵抗。-诱导免疫逃逸：BCR通路可上调PD-L1、CD47等免疫检查分子，通过“别吃我”信号抑制巨噬细胞吞噬，同时通过PD-L1/PD-1通路抑制T细胞功能。-影响CAR-T细胞疗效：BCR通路激活可上调CD19抗原表达调控因子（如USP22），导致CD19抗原表达下调或丢失，是CAR-T治疗耐药的主要机制之一。肿瘤微环境介导的耐药信号通路肿瘤微环境是免疫治疗耐药的重要“土壤”，其中免疫抑制细胞、细胞因子及代谢产物通过特定信号通路重塑免疫抑制状态。肿瘤微环境介导的耐药信号通路TGF-β信号通路过度激活TGF-β是免疫抑制的核心细胞因子，在淋巴瘤微环境中高表达，通过Smad依赖和非依赖通路发挥抑制作用：-抑制效应T细胞功能：TGF-β可下调T细胞中IFN-γ、TNF-α等细胞因子分泌，抑制其增殖和细胞毒性；同时诱导T细胞分化为Tregs，增强免疫抑制。-促进上皮-间质转化（EMT）：TGF-β激活EMT程序，增强肿瘤细胞侵袭和转移能力，同时减少肿瘤细胞与T细胞的接触，降低免疫识别效率。-抑制NK细胞和树突状细胞（DC）功能：TGF-β可抑制NK细胞的细胞毒性及DC的抗原呈递能力，削弱先天免疫抗肿瘤效应。临床研究显示，TGF-β高表达的淋巴瘤患者对PD-1抑制剂和CAR-T治疗疗效均较差。肿瘤微环境介导的耐药信号通路腺苷信号通路激活腺苷是肿瘤微环境中重要的代谢抑制分子，由CD39/CD73通路催化产生（ATP→AMP→腺苷）。其耐药机制包括：1-抑制T细胞和NK细胞功能：腺苷通过A2A受体（A2AR）激活cAMP-PKA信号，抑制T细胞增殖、细胞因子分泌及细胞毒性，诱导T细胞耗竭。2-促进免疫抑制细胞浸润：腺苷可招募Tregs、MDSCs至肿瘤微环境，并通过A2AR增强其抑制功能。3-影响CAR-T细胞疗效：CAR-T细胞在腺苷高微环境中，A2AR激活导致其增殖能力下降、细胞因子分泌减少，甚至凋亡增加。4肿瘤微环境介导的耐药信号通路腺苷信号通路激活3.CSF-1/CSF-1R信号通路介导的髓系抑制集落刺激因子-1（CSF-1）与其受体CSF-1R在肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）和MDSCs中高表达，形成免疫抑制微环境：-TAMs的M2型极化：CSF-1/CSF-1R信号促进TAMs向M2型（免疫抑制型）分化，分泌IL-10、TGF-β等抑制性细胞因子，抑制T细胞活化。-MDSCs的扩增与活化：CSF-1可诱导MDSCs增殖，并通过STAT3/STAT6信号增强其精氨酸酶1（ARG1）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达，消耗微环境中精氨酸，抑制T细胞功能。-阻断抗原呈递：M2型TAMs低表达MHC-II和共刺激分子（如CD80、CD86），无法有效呈递肿瘤抗原，导致T细胞耐受。免疫细胞功能异常相关的耐药信号通路效应T细胞和CAR-T细胞的功能耗竭是免疫治疗耐药的直接原因，涉及多条抑制性信号通路。1.免疫检查点分子持续高表达除PD-1/PD-L1外，多种抑制性受体在T细胞耗竭中发挥协同作用，形成“抑制性受体网络”：-CTLA-4：在T细胞活化早期高表达，通过与CD80/CD86结合抑制T细胞活化，促进Tregs分化。CTLA-4抑制剂（如伊匹木单抗）联合PD-1抑制剂在部分淋巴瘤中显示出协同效应，但部分患者仍因CTLA-4通路持续激活而耐药。免疫细胞功能异常相关的耐药信号通路-TIM-3（Tcellimmunoglobulinandmucindomain-containingprotein3）：可与Galectin-9、HMGB1等结合，诱导T细胞凋亡，抑制IFN-γ分泌。TIM-3高表达与PD-1抑制剂耐药相关，联合阻断PD-1和TIM-3可部分逆转耐药。-LAG-3（Lymphocyteactivationgene-3）：通过与MHC-II类分子结合，抑制T细胞活化，促进Tregs功能。LAG-3高表达见于多种R/R淋巴瘤，是PD-1抑制剂耐药的潜在标志物。免疫细胞功能异常相关的耐药信号通路T细胞耗竭相关转录程序异常T细胞耗竭是一系列表观遗传和转录调控异常的结果，关键转录因子包括TOX、NR4A、TCF1等：-TOX高表达：TOX可维持T细胞耗竭状态，抑制效应分子（如IFN-γ、颗粒酶B）表达，促进耗竭相关受体（PD-1、TIM-3、LAG-3）持续高表达。临床研究显示，TOX高表达的淋巴瘤患者CAR-T治疗后持久缓解率显著降低。-NR4A家族激活：NR4A1/NR4A3可通过表观遗传修饰（如组蛋白乙酰化）稳定耗竭状态，抑制T细胞增殖和效应功能。-TCF1表达缺失：TCF1是维持T细胞干细胞样状态的关键因子，其表达缺失导致T细胞无法从耗竭状态恢复，是继发性耐药的重要原因。免疫细胞功能异常相关的耐药信号通路CAR-T细胞内在信号通路异常CAR-T细胞在体内的功能依赖于其信号转导、增殖和存活能力，以下通路异常可导致CAR-T疗效下降：01-PI3K/AKT/mTOR通路抑制：CAR-T细胞中PI3K/AKT信号可促进其增殖和存活，若该通路受抑（如PTEN表达），可导致CAR-T细胞数量减少、功能衰竭。02-MAPK/ERK通路失调：ERK信号调控CAR-T细胞的细胞因子分泌和细胞毒性，其激活不足可减弱抗肿瘤效应。03-代谢通路重编程：CAR-T细胞在肿瘤微环境中常面临葡萄糖、氨基酸等营养物质缺乏，若无法有效进行代谢适应（如糖酵解增强、氧化磷酸化上调），则功能受损，导致耐药。0404耐药信号通路间的交叉调控网络耐药信号通路间的交叉调控网络上述信号通路并非独立作用，而是形成复杂的交叉调控网络，共同驱动耐药进程。理解这些通路间的相互作用，对制定克服耐药的策略至关重要。信号通路的串扰与协同抑制1.Wnt/β-catenin与TGF-β通路协同：β-catenin可上调TGF-β受体表达，增强TGF-β信号活性；反过来，TGF-β也可激活β-catenin，形成正反馈环路，共同抑制T细胞浸润和功能。2.PI3K/AKT与PD-L1通路串扰：PI3K/AKT/mTOR通路可通过NF-κB和STAT3信号上调PD-L1表达，而PD-L1/PD-1信号又可通过抑制T细胞分泌IFN-γ，减弱PI3K/AKT通路的抑制，形成免疫逃逸闭环。3.腺苷与TGF-β通路协同：腺苷可通过A2AR激活TGF-β/Smad信号，促进Tregs分化；同时，TGF-β可上调CD73表达，增强腺苷生成，形成免疫抑制放大效应。肿瘤细胞与微环境的双向信号交流肿瘤细胞通过分泌细胞因子（如IL-6、IL-10）、趋化因子（如CCL2、CXCL12）等，激活TME中的免疫抑制细胞；而TAMs、MDSCs等又可通过分泌EGF、HGF等促进肿瘤细胞增殖和侵袭，形成“肿瘤-微环境恶性循环”。例如，DLBCL中肿瘤细胞分泌的IL-6可激活JAK2/STAT3信号，促进MDSCs招募，而MDSCs分泌的IL-10又可抑制T细胞功能，共同导致PD-1抑制剂耐药。动态演化的耐药信号网络耐药是一个动态过程，随着治疗时间延长，信号通路调控网络可发生“演化”。例如，初始PD-1抑制剂治疗可能通过PD-L1/PD-1通路抑制T细胞，但长期治疗可诱导肿瘤细胞Wnt/β-catenin通路激活，导致T细胞浸润减少，形成“冷肿瘤”；若联合Wnt抑制剂，可能逆转耐药，但同时可能激活TGF-β通路，需进一步联合TGF-β阻断剂，形成“多通路协同干预”策略。05基于信号通路的耐药逆转策略与展望基于信号通路的耐药逆转策略与展望针对耐药信号通路的多层次、交叉性特点，克服耐药需采取“精准阻断、联合干预”的策略，从肿瘤细胞、TME及免疫细胞三个维度协同调控。靶向肿瘤细胞内在通路的联合治疗1.Wnt/β-catenin通路抑制剂：如tankyrase抑制剂（XAV939）、β-catenin/TCF4抑制剂（PRI-724），可阻断Wnt信号，恢复T细胞浸润和肿瘤免疫原性。临床前研究显示，联合PD-1抑制剂可部分逆转耐药。012.JAK-STAT通路抑制剂：如JAK1/2抑制剂（鲁索利替尼）、STAT3抑制剂（Stattic），可抑制STAT3磷酸化，下调PD-L1和IL-10表达，增强T细胞功能。在R/RHL中，鲁索利替尼联合PD-1抑制剂显示出初步疗效。023.PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂：如PI3Kδ抑制剂（idelalisib）、AKT抑制剂（capivasertib），可逆转肿瘤细胞代谢重编程，增强PD-1抑制剂敏感性。但需注意血液学毒性等不良反应。03调节肿瘤微环境的靶向干预1.TGF-β通路抑制剂：如TGF-β受体激酶抑制剂（galunisertib）、中和抗体（fresolimumab），可阻断TGF-β信号，抑制EMT和Tregs分化，联合CAR-T治疗可提高其体内持久性。2.腺苷通路抑制剂：如CD73抑制剂（oleclumab）、A2AR抑制剂（ciforadenant），可减少腺苷生成，阻断其对T细胞的抑制。临床前研究显示，联合PD-1抑制剂可增强抗肿瘤效应。3.CSF-1/CSF-1R通路抑制剂：如CSF-1R抗体（emactuzumab）、小分子抑制剂（pexidartinib），可减少TAMs和MDSCs浸润，改善免疫微环境。在R/RDLBCL中联合化疗显示出一定疗效。优化免疫细胞功能的策略1.多免疫检查点联合阻断：如PD-1/CTLA-4、PD-1/TIM-3、PD-1/LAG-3双抗或联合用药，可克服单一检查点阻断的局限性，逆转T细胞耗竭。例如，PD-1/TIM-3双抗（cobolimab）联合PD-1抑制剂在R/R淋巴瘤中已进入临床研究。2.CAR-T细胞优化设计：-共刺激分子改造：如引入4-1BB、ICOS等共刺激信号，增强CAR-T细胞增殖和持久性；-耗竭抵抗改造：敲除TOX、NR4A等耗竭相关基因，或表达dominant-negativeTGF-β受体，阻断抑制信号；-逻辑门控CAR-T：如AND-gateCAR-T（需识别两种抗原）或NOT-gateCAR-T（避免靶向正常组织），提高特异性和安全性。优化免疫细胞功能的策略3.过继细胞治疗联合：如CAR-T联合TILs（肿瘤浸润淋巴细胞）或TCR-T（T细胞受体修饰T细胞），多免疫细胞协同抗肿瘤；或联合PD-1抑制剂，改善C