DB41∕T 1926-2019 高油酸花生四级种子质量标准

ICS65.020.01B05DB41标标河南省市场监督管理局发布IDB41/T1926—2019本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由河南省农业农村厅提出并归口。本标准起草单位：河南省农业科学院经济作物研究所。本标准主要起草人：郝西、臧秀旺、刘娟、张俊、郑峥、郭秀璞、汤丰收、高伟、徐静、张忠信、孙子淇、苗利娟、杜红、张香萍、王桂芳、崔亚男、张曼。DB41/T1926—20191高油酸花生四级种子质量标准本标准规定了高油酸花生四级种子质量的术语和定义、质量要求、检验方法与检验规则。本标准适用于河南省高油酸花生四级种子质量的评价。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T3543.2农作物种子检验规程扦样GB/T3543.3农作物种子检验规程净度分析GB/T3543.4农作物种子检验规程发芽试验GB/T3543.5农作物种子检验规程真实性和品种纯度鉴定GB/T3543.6农作物种子检验规程水分测定GB5009.168食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定GB20464农作物种子标签通则NY/T2237植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南花生3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1高油酸花生种子脂肪中油酸含量≥75%的花生。3.2种子纯度品种在特征特性方面典型一致的程度，用本品种的种子数占供检本作物样品种子数的百分率表示。3.3种子净度在一定量的种子中，正常种子的重量占总重量（包含正常种子之外的杂质）的百分比。3.4四级种子在种子生产中，以育种家种子为种源，运用重复繁殖技术路线，按世代顺序繁殖的育种家种子、原原种、原种和大田用种的种子。3.5育种家种子育种家育成的最初种子。具有该品种特异性、一致性和遗传稳定性。用白色标签作标记。2DB41/T1926—20193.6原原种由育种家种子直接繁殖的种子。具有该品种特异性、一致性和遗传稳定性。用白色标签作标记。3.7原种由原原种直接繁殖的种子。具有该品种特异性、一致性和遗传稳定性。用紫色标签作标记。3.8大田用种由原种繁殖用于大田生产的种子。具有该品种特异性、一致性和遗传稳定性。用蓝色标签作标记。4质量要求高油酸花生种子质量指标应符合表1的要求。表1高油酸花生种子质量指标0000杂草种子/（粒/kg）≤000100005检测方法5.1真实性和品种纯度5.1.1表型鉴定5.1.1.1田间鉴定按品种地上部性状的典型性和荚果性状的典型性进行鉴定。鉴定方法按NY/T2237的规定执行。5.1.1.2油酸含量测定按GB5009.168的规定执行；油酸含量指标应符合该品种本质特征。5.1.2分子标记采用固定数目的单核苷酸多态性（SingleNucleotidePolymorphism，SNP）引物，通过与标准样品比较或与SNP指纹数据比对平台比对的方式，对品种真实性进行验证或身份鉴定。检测方法按附录A执行。DB41/T1926—201935.2净度和杂质按GB/T3543.3的规定执行。5.3发芽试验按GB/T3543.4的规定执行。5.4水分按GB/T3543.6的规定执行。5.5其他作物、杂草种子和有毒（害）杂草种子数目按GB/T3543.3的规定执行。6检验规则6.1扦样按GB/T3543.2的规定执行。6.2质量判定按GB20464的规定执行。DB41/T1926—20194（规范性附录）花生品种真实性分子标记鉴定方法A.1引物合成利用已遴选的14个核心SNP引物和36个扩展SNP引物作为品种真实性验证和身份鉴定的检测引物，构建已知品种的SNP指纹数据比对平台。根据真实性验证或身份鉴定的要求，采用序贯式方法，选定SNP引物。（36umol/μL）、Primer_CoA.2脱氧核糖核酸（DeoxyribonucleicAcid，DNA）提取在种子生产基地随机取样，供检样品为叶片或种子，采用混合样品检测（至少含有30个个体的材料先单独提取DNA，再取等量DNA混合。DNA提取方法应保证提取的DNA数量和质量符合PCR扩增的要求，DNA无降解，溶液的紫外光吸光度OD260与OD280的比值宜介于1.8～2.0。DNA提取可选CTAB法或试剂盒法。A.3PCR扩增SNP反应可以在96等不同规格孔板进行，体系的总体积可相应采用10μL或5μL，在板上设无模板对照。A.4SNP基因分型将PCR扩增产物用能检测荧光信号的检测平台（如可以检测FAM和HEX波长荧光的酶标仪FLUOstarOmega及实时定量PCR仪）进行读板，并根据荧光量比值进行SNP分型。A.5结果计算与表示统计位点差