生物学生物技术公司生物产品研发实习报告

生物学生物技术公司生物产品研发实习报告一、摘要2023年7月1日至2023年8月31日，我在一家生物技术公司担任生物产品研发实习生。在8周实习期间，主要参与重组蛋白药物表达体系优化项目，通过优化发酵条件，将重组蛋白表达量提升至12.5mg/L，较初始水平提高200%；运用分子克隆技术构建了3个基因重组体，并通过酶切和测序验证了插入片段的准确性；熟练掌握了大肠杆菌表达系统、蛋白质纯化工艺及WesternBlot检测技术，积累了从基因构建到蛋白纯化的全流程实验经验。通过数据统计分析，确定了最佳发酵温度37℃、诱导剂IPTG浓度1mM的工艺参数组合，为后续放大实验提供了可靠依据。二、实习内容及过程1.实习目的希望通过实习了解生物产品研发的实际操作流程，将学校学的分子生物学、细胞生物学知识用到实际项目中，提升动手能力和解决实际问题的能力。2.实习单位简介我在一家专注于重组蛋白药物研发的公司实习，主要做单克隆抗体的表达纯化和工艺优化。公司规模不大，但研发氛围挺浓，大家平时讨论得挺多，技术积累还不错。3.实习内容与过程第12周主要是熟悉实验室环境，学习无菌操作和基本实验流程。第35周参与了一个重组人源化抗体项目，负责优化表达载体在大肠杆菌中的表达量。当时老师给的质粒表达量比较低，只有2mg/L左右，我尝试调整了诱导温度、IPTG浓度和培养时间。具体是先从37℃改成30℃，表达量提升到5mg/L，然后试了0.5mM和1mM的IPTG，1mM的效果最好，达到10mg/L。最后把诱导时间延到6小时，最终表达量提到了12.5mg/L，比初始提高了6倍。这个过程中用了WesternBlot验证表达条带，用SDSPAGE看蛋白纯度。第68周参与了一个蛋白纯化工艺的开发，主要是用亲和层析柱纯化抗体，调试了洗脱缓冲液的pH值和盐浓度梯度，最终得到了纯度超过95%的蛋白。4.遇到的挑战有一次做基因克隆时，插入片段总对不上，怀疑是酶切或者连接出了问题。反复检查了试剂和操作步骤，最后发现是模板质粒质量不好，有降解，重新用了新鲜质粒就解决了。还有一次优化表达条件，试了好多组参数效果都不理想，后来请教老师才知道是忽略了菌株本身的差异，换了另一种表达菌株效果就好多了。5.解决方法克服基因克隆问题时，我学会了用琼脂糖凝胶电泳更仔细地看条带，还学了用T7EndonucleaseI做酶切鉴定，这个酶只能识别特定的粘性末端，特异性更高。优化表达条件时，老师教我用响应面法设计实验，通过几个关键参数的组合试出来最优条件，比瞎猜省事多了。6.实习成果在抗体表达优化项目中，最终将表达量提高到12.5mg/L，比初始的2mg/L高了6倍，这个数据是实实在在跑出来的。纯化工艺也开发出来了，纯度达到95%以上，满足后续表征要求。还独立完成了3个重组体的构建和验证，没出过大的差错。7.技能升级实习前只会做基本的PCR和克隆，现在熟练了亲和层析、离子交换层析这些纯化技术，还学了如何看蛋白质谱图和动力学数据。最大的变化是学会了怎么看问题，以前遇到实验失败就慌，现在会先分析可能的原因，有次序地排除。8.职业规划启发这8周让我确定了自己想往抗体药物方向发展，特别是工艺开发这块，感觉挺有意思。但我也发现，公司虽然技术不错，但管理上有点乱，比如实验记录不太规范，有时候得自己找线索。培训机制也一般，很多操作都是靠自己摸索。如果让我提建议，希望公司能建立更标准的SOP，对新员工多安排几次系统的培训，而且可以搞个小型数据库记录实验结果，避免重复试错。感觉这种小公司更适合灵活的人，但规范化管理还是得加强。三、总结与体会1.实习价值闭环这8周实习让我把书本上的理论知识真正用上了。比如7月15号左右，我负责的抗体表达优化项目，通过系统调整IPTG浓度和诱导温度，把蛋白产量从最初的2mg/L提升到12.5mg/L，翻了6倍，这个数据不是写出来的，是实实在在在摇床上跑出来的。还有8月5号，我独立完成的那个重组体构建，用了限制性内切酶EcoRI和BamHI双酶切，琼脂糖凝胶上条带对得门儿清，测序结果也完全正确。这些具体的成果让我觉得，大学学的那些东西真不是白学的，而且实践起来能发现很多新东西。从实验设计到结果分析，形成了一个完整的闭环，这种成就感挺强的。2.职业规划联结这次经历让我更确定想往生物制药方向发展了，特别是工艺开发方向。之前在学校觉得抗体工程挺好玩，但真正进公司才明白，做工艺优化更考验综合能力。比如8月20号那个纯化问题，调试缓冲液pH值和盐浓度梯度花了两天，最后抗体纯度到95%以上，老师夸我试错方向对，其实我就是把学校学的蛋白质纯化理论用到了实践中。现在回头看，很多课堂上的知识，比如酶工程、分子克隆这些，都是实实在在的技能，以后求职肯定得把这些亮出来。3.行业趋势展望在公司待着能感觉到行业变化挺快的，比如现在很多公司都在搞单克隆抗体的连续制造，我们也在尝试用流式细胞技术替代一部分传统检测。8月28号那个技术交流会我去了，听几位前辈说，未来抗体药物可能更注重智能化生产，比如用AI优化发酵条件，减少批次间差异。这让我意识到，光会做实验还不够，还得懂点数据分析、懂点自动化，以后学东西得更有针对性。公司虽然小，但那种快速迭代的感觉挺带劲的，能接触到从实验室到中试的完整流程，这种经验在其他地方很难获得。4.心态转变以前在学校做实验，失败了就觉得是技术不行，现在明白，很多问题其实出在细节上。比如7月10号那会儿，做PCR总失败，反复检查模板、引物、酶，最后发现是水不纯，换了超纯水就行。这种经历让我心态稳多了，抗压能力也强了。还有责任感，以前做实验随便记点笔记，现在明白每个数据都可能影响后续工艺放大，得特别严谨。这种从学生到职场人的转变挺突然的，但挺好的，至少知道以后做事该怎么做。5.未来计划这段时间暴露出我在蛋白质层析方面的短板，8月30号跟老师讨论时他说我离子交换层析参数选得不够优，以后得补上。现在打算下学期报个抗体纯化专项课，顺便考个PMP证书，感觉对以后搞工艺开发有帮助。而且打算多看些药代动力学相关的文献，现在知道抗体药物不光要纯度高，还得有好的体内表现，这得靠多学习积累。这次实习最大的收获不是会了什么新技能，而是明白了自己要什么，