生物技术生物研发中心生物技术员实习报告

生物技术生物研发中心生物技术员实习报告一、摘要2023年6月5日至8月22日，我在生物技术生物研发中心担任生物技术员，负责基因编辑实验体系搭建与优化。通过改造CRISPRCas9系统，将脱靶率从12.3%降至4.8%，成功构建3株高产重组蛋白表达菌株，纯化蛋白纯度达89.5%；运用qPCR技术对10个临床样本进行病毒载量检测，准确率达99.2%。熟练掌握分子克隆、细胞培养、蛋白质纯化等核心技能，并建立标准化操作流程（SOP），将单次实验耗时缩短30%。通过数据统计分析，验证了低温离心（4℃）对细胞裂解效率提升15.7%的结论，形成可复用的实验优化方法论。二、实习内容及过程2023年6月5日到8月22日，我在生物技术生物研发中心当生物技术员，跟着团队搞基因编辑和蛋白表达这摊子事儿。刚开始是熟悉实验室的分子克隆流程，把质粒提取、酶切、连接这些步骤跑了几遍，导师让我每天记录琼脂糖凝胶电泳结果，看条带是不是对齐，纯化后的质粒浓度用Qubit仪测了10次，练就了看透200bp条带的能力。后来参与了个项目，改造CRISPRCas9系统，老版本的脱靶率有12.3%，我负责优化PAM位点和gRNA设计，跑了20组平行实验，最后把脱靶率降到了4.8%，数据在实验室信息管理系统里留了痕。期间遇到过细胞转染效率低的问题，一开始挺懵的，后来查文献发现是培养基pH值没调对，改到7.27.4后转染效率直接翻倍，从45%提到85%，这让我意识到细节挺重要的。还参与了重组蛋白表达优化，把诱导温度从37℃降到30℃，收获的蛋白多了1.5倍，纯化后HPLC图峰纯度从82%提到89.5%。每天跟蛋白纯化、细胞培养打交道，跑得最多的肯定是WesternBlot，做膜前处理、一抗二抗孵育这块儿，我得反复调条件，有时候一抗体孵育12小时都没信号，最后发现是抗体浓度设低了，调高10%就好了。这段经历让我对实验设计有了更直观的认识，以前觉得CRISPR就是扔几条gRNA进去，现在明白得考虑GC含量、二聚化这些因素。实验室的SOP挺完善的，但有时候培训不够细致，比如离心的时候转速和时间的具体含义没讲透，我都是靠师兄师姐演示才掌握。我感觉自己最大的进步是学会用数据说话，以前做实验靠感觉，现在得靠实验数据来调整策略。最大的收获是明白做科研得有耐心，有时候一个实验跑一周都没结果，得静下心来分析问题，而不是急着改方案。这段实习让我对分子生物学这块儿更感兴趣了，以后想往基因治疗方向试试，毕竟手头这些基因编辑的经验挺扎实的。三、总结与体会这8周，从2023年6月5日到8月22日，在生物技术生物研发中心的经历，让我对课本里的那些分子克隆、蛋白纯化不再是空话。每天看着超低温冰箱里储存的细胞系，或者离心机转动的培养皿，心里特别踏实。最让我有成就感的是那个CRISPRCas9改造项目，当初脱靶率12.3%的数据看着挺吓人，我花了两周时间调整gRNA序列，每次实验做完都去实验室信息管理系统里录入数据，最后把脱靶率降到4.8%，这个0.5个百分点的变化，让我觉得付出是值得的。做WesternBlot的时候也经历过挫折，有时候一抗孵育12小时都没条带，反复试了3次才找到问题所在，抗体浓度得调高10%，这个细节差点就给我绕进去了。这些经历让我明白，做科研得有耐心，也得会动手解决问题，光看书是远远不够的。实习最大的收获是学会了怎么把理论用在实践里。比如之前学基因编辑，觉得CRISPR就是扔几条gRNA进去，现在知道得考虑GC含量、二级结构这些因素，才能提高效率。实验室的SOP很完善，但有时候培训不够细致，比如离心机的具体转速和时间得怎么设置，还得靠自己摸索。这段经历让我意识到，自己以前做实验太依赖师兄师姐，现在得主动去学，去承担更多责任。从学生到职场人的心态转变挺明显的，以前做实验怕失败，现在明白失败是常态，关键是怎么分析原因，怎么改进。对我未来的职业规划挺有启发。这次实习让我对基因治疗方向更感兴趣了，特别是看到自己改造的gRNA提高了效率，就觉得很有前景。接下来打算深化这方面的学习，比如考个基因编辑相关的证书，或者多看些前沿文献，把实验室里的经验系统化。行业里现在挺重视基因治疗的，像CART、基因疗法这些领域都在快速发展，掌握核心技术肯定有优势。实习也让我意识到，自己还得提升数据分析能力，有时候实验结果一堆数据，得会用统计软件处理，才能得出靠谱结论。总的来说，这段经历让我更有信心了，以后不管是继续深造还是找工作的，都能把实习经验用上，毕竟真实的项目经历比书本知识更有说服力。致谢在此，我想感谢生物技术生物研发中心给我这次实习机会。这段从2023年6月5日到8月22日的经历，让我学到了很多。特别感谢我的导师，在基因编辑项目上给了我很多指导，尤其是在gRNA设计这块，帮我避开了不少弯路。师兄师姐们也帮了我不少忙，比如教我怎么优化WesternBlot条件，还有那个