血液成分分离基本知识专家讲座

血液成份分离基本知识血液成份分离机应用第1页主要内容一、血液成份分离相关基础知识介绍二、血液成份分离方法三、血液成份分离方法相关技术介绍第2页一、血液成份分离相关基础知识介绍第3页血站职能

血站是指不以营利为目标，采集、提供临床用血且经国家授权、由国家拨款运行公益性卫生机构。第4页血站成份科职责

负责制备各种成份血液制品。第5页血液制品分类

血液制品全血

成份血红细胞类病院体灭火血浆浓缩血小板新鲜冰冻血浆冷凝沉淀凝血因子辐照成份血单采成份浓缩红细胞悬浮红细胞浓缩少白细胞红细胞悬浮少白细胞红细胞洗涤红细胞冰冻解冻去甘油红细胞单采血小板单采少白细胞血小板单采粒细胞单采新鲜冰冻血浆单采红细胞第6页成份科分离血液制品

血液制品全血

成份血红细胞类病原体灭火血浆浓缩血小板新鲜冰冻血浆冷凝沉淀凝血因子辐照成份血单采成份浓缩红细胞悬浮红细胞浓缩少白细胞红细胞悬浮少白细胞红细胞洗涤红细胞冰冻解冻去甘油红细胞单采血小板单采少白细胞血小板单采粒细胞单采新鲜冰冻血浆单采红细胞第7页浓缩红细胞

将采集到多联袋内全血中大部分血浆在全封闭条件下分离出后剩下部分所制成红细胞成份血。

1.制备方法：

（1）原料全血要求：有效保留期内全血均可，提议采血后6～8小时内内制备。

（2）塑料袋要求：双联袋、三联袋均可。

（3）联袋全血平衡后对称装入离心机中。

（4）离心条件设置：5000g，7min,温度2～6℃，刹车5～6min。

（5）离心后血液应轻轻拿出，放入分浆夹内或用虹吸方式将血浆分出。

2.浓缩红细胞特点：

（1）体积大约是全血二分之一左右；

（2）血细胞比容0.65～0.80；

（3）红细胞含量几乎和全血相同；

（4）白细胞含量也和全血基本相同；

3.用途：

（1）普通用于各种血容量正常贫血病人；

（2）急性出血或手术病人失血低于1500ml者；

（3）心肝肾功效不全者；

（4）小儿或老人输血；

（5）妊娠晚期伴有贫血者和一氧化碳中毒者等。

4.输入剂量及方法：

对于一个60千克体重成年人，每输入2个单位浓缩红细胞（每单位由200ml全血制备）能够提升血红蛋白10g/L。输注前需交叉配血，必要时可用生理盐水稀释后输注。第8页悬浮红细胞

也称为红细胞悬液，是全血经离心除去大部分血浆后，加入红细胞保留液制备而成。是当前临床上用量最大一个红细胞制剂。

1.制备方法

基本与浓缩红细胞相同，只是最终血浆分出后，将红细胞添加剂加入到浓缩红细胞袋中并混匀。

2.悬浮红细胞特点：

（1）血细胞比容0.50～0.65；

（2）红细胞含量和浓缩红细胞相同；

（3）白细胞含量也和浓缩红细胞基本相同；

（4）它是在浓缩红细胞基础上加入红细胞添加液,降低了红细胞粘稠度使输注时愈加顺利,全部操作在密闭条件下完成。

3.用途：

与浓缩红细胞相同。

4.输入剂量及方法：

与浓缩红细胞相同。

第9页悬浮少白细胞红细胞1.制备方法：

（1）离心去白膜法：先按制备浓缩红细胞程序离心，然后将红细胞与血浆交界处白膜层与血浆一起挤出。（2）过滤法：过滤方式基本上分为以下三种：一个是血液采集后24小时内过滤，我们称为贮存前过滤；另一个是血液输注前先过滤；第三种是在输血时过滤；后两种都能够称为保留后过滤。（研究数据表明最好过滤时机应该是血液贮存前，它不但能够减除白细胞数量，还能够预防因为细胞因子和炎性因子应起发烧反应。）

2.少白细胞红细胞特点：

它是在浓缩红细胞或悬浮红细胞基础上去除绝大部分白细胞从而降低了由白细胞引发免疫性输血反应和疾病传输。用过滤法制备少白细胞红细胞残余白细胞数量≤2.5×106/200ml全血。

3.用途：

（1）该成份适合用于各类需要输注红细胞病人；

（2）尤其适合于已经有白细胞抗体病人、骨髓移植和器官移植病人第10页洗涤红细胞1.洗涤红细胞特点：

洗涤红细胞是在少白细胞红细胞基础上用无菌生理盐水重复洗涤三遍以上制备而成。经过洗涤红细胞去除了80％以上白细胞和98％血浆蛋白，也去除了大量细胞碎屑、代谢产物、抗凝剂、乳酸盐、钾、氨和微聚物，同时也损失了大约20％以上红细胞。

2.适应证：（1）该成份适合用于各类需要输注红细胞病人；

（2）更适合于对血浆蛋白有严重过敏反应病人；

（3）本身免疫性溶血性贫血；

（4）阵发性血红蛋白尿；

（5）高血钾症及肝肾功效障碍者以及新生儿换血等。

3.注意事项：

（1）开放制备洗涤红细胞应在制备后24小时内输注。（2）因为该成份内已基本不含抗A抗B抗体，输注前可只做主侧配血。（3）输注剂量要比浓缩红细胞增加30％左右。

第11页冰冻解冻去甘油红细胞

红细胞加入甘油保护剂后，在－80或－196℃低温条件下保留，最长保留期可达10年。使用前将贮存红细胞放在37℃水浴中解冻,然后洗净甘油，再用生理盐水悬浮，24小时内输注。

该成份主要用于稀有血型血液贮存也可用于自体血液长久贮存。该成份内也基本不含抗A抗B抗体，输注前可只做主侧配血。在输注剂量上应考虑到红细胞损失部分。第12页浓缩血小板1.制备方法：

先使用多联采血袋采集全血,然后6～8小时内在20～24℃条件下，用大容量离心机将血小板分离出，并悬浮在血浆内制成浓缩血小板。

200ml全血制备血小板含量是≥2.0×1010，容量为25～35ml。2.用途：

浓缩血小板在临床上主要用于止血或预防出血。⑴血小板数量降低如：白血病、再生障碍性贫血、恶性肿瘤、特发性血小板降低性紫癜、多发性骨髓瘤、感染、化疗或放疗后、大量输注库存血等；⑵血小板功效障碍而如：血小板无力症、药品（阿斯匹林类）、白血病、DIC、尿毒症、发烧、感染以及创伤和手术病人等。3.注意事项：

⑴患有血栓性血小板降低性紫癜（TTP）患者不易输血小板。⑵血小板在输注时无需交叉配血,要求ABO血型相同输注。

第13页新鲜冰冻血浆（FFP）

1.制备方法：血液采集后6~8小时内将血浆分离出，并在-30℃以下，用含有风冷装置速冻冰箱或在酒精浴中速冻而制成，也可用-196℃液氮快速冻结。

2.特点：

FFP中几乎含有血浆中全部蛋白成份和凝血因子,包含不稳定第V因子和第Ⅷ因子。未经特殊处理血浆中还含有各种抗体和一些致病物质，如肝炎病毒。1ml新鲜正常人血浆大约含有1单位凝血因子活性。新鲜冰冻血浆在-18℃以下能够保留1年。

3.用途：

它主要用于各种凝血因子缺乏引发出血，同时需要补充血容量或血浆蛋白患者：肝衰竭伴取得性凝血障碍者；肝移植；口服香豆素类药品过量引发出血者；抗凝血酶III缺乏；血栓性血小板降低性紫癜（TTP）；免疫缺点综合征等。

4.血浆输注剂量:

每千克体重10~15ml,可使大多数凝血因子提升到正常人25％以上，并可到达止血效果，剂量过大可造成循环超负荷。输注速度普通不超出10ml/min。

5.注意事项：

应按ABO血型相容标准输注，不需做交叉配血。

第14页普通冰冻血浆

新鲜冰冻血浆保留一年以上，或制备新鲜冰冻血浆冷沉淀后所剩下血浆以及全血在使用期内分离出血浆统称为普通血浆。它主要特点是缺乏凝血因子V和凝血因子Ⅷ。能够在-18℃以下继续保留5年。普通冰冻血浆主要用于凝血因子V和凝血因子Ⅷ以外凝血因子缺乏患者。

第15页输成份血好处输成份血有以下几点好处：

1.对病情需要选择，缺什么输什么，提升治疗效果。如：贫血输红细胞，粒细胞缺乏输粒细胞、血小板降低输浓缩血小板，烧伤患者输血浆等。

2.降低输血不良反应，提升输血安全性。因为输入不需要血液成份不但是浪费，而且可引发输血不良反应。

3.便于保留，使用方便。不一样血液成份能够有不一样保留方式，长久如新鲜冰冻血浆、冷沉淀物能够保留1年；短期如血小板在22C震荡箱内保留3～5天随时可用。

4.一血多用，节约血源。血液来自健康人无私贡献，是宝贵资源，将一袋血分成各种成份就可派各种用途，治疗多个患者。如某市每年献血35万单位，而制成成份血即有70～100万单位。

5.降低输血传染病。因为血液中一些致病因子多藏在白细胞、冷沉淀和凝血因子等制品中，大多数输血患者并不需要这些成份。第16页二、血液成份分离方法第17页血液成份分离方法

全血全血分层血浆红细胞血小板白细胞离心机分浆夹/血液成份分离机第18页多联袋第19页多联袋第20页血液成份分离机①②③④⑤第21页三联袋血分离流程示意图XXXXXXX①③⑤离心分血浆保养液到原袋XXX第22页四联袋血成份分离XXXXX①②③离心分血浆清洗白膜X⑤XXXXXXXXXXX将保养液挤回母袋X第23页多联袋血-红细胞和冰冻血浆制备1）第1次重离心后将尽可能多血浆转移至转移袋；

2）将红细胞保留液袋内红细胞保留液转移至红细胞袋，充分混合即为悬浮红细胞；

3）查对血袋上献血条形码，如一致则热合断离，生成1袋悬浮红细胞和1袋血浆；

4）血浆红细胞混入量少（目视观察）即可将血浆袋热合断离；

5）如血浆红细胞混入量较多，应该经过第2次重离心后，把上清血浆转移至已移空红细胞保留液袋，热合断离（如欲制备冷沉淀，则不热合断离）；

6）将血浆速冻，低温保留。第24页红细胞和冰冻血浆制备全血红细胞悬浮红细胞冰冻血浆重离心成份分离机或分浆夹成份分离保养液加保养液血浆目视红细胞较少，速冻目视红细胞较多，重离心红细胞沉淀丢弃(保养液空袋)成份分离血浆冰冻血浆速冻第25页

红细胞、浓缩血小板和冰冻血浆制备

——富血小板血浆法1）第1次轻离心(280g)后将富含血小板血浆转移至转移袋；

2）将红细胞保留液袋内红细胞保留液转移至红细胞袋；

3）查对血袋上献血条形码，如一致则热合断离，生成1袋悬浮红细胞和1袋富血小板血浆；

4）将富含血小板血浆袋重离心（2100g），上清为血浆，沉淀物为血小板；

5）留取适量血浆，将多出血浆转移至已经移空红细胞保留液袋，热合断离，生成1袋浓缩血小板和1袋血浆；6）将血浆袋速冻，低温保留；

7）将浓缩血小板袋在室温静置1～2小时，待自然解聚后，轻轻均匀血袋，制成浓缩血小板混悬液，在22±2℃环境下振荡保留。第26页红细胞、浓缩血小板和冰冻血浆制备

——富血小板血浆法全血红细胞悬浮红细胞轻离心成份分离机或分浆夹成份分离保养液加保养液重离心富血小板血浆上层血浆，下层血小板沉淀血浆(保养液空袋)冰冻血浆低温保留速冻浓缩血小板大部分血浆少许血浆+血小板成份分离浓缩血小板悬浮液室温静置1～2小时，自然解聚22±2℃环境下振荡保留第27页红细胞、浓缩血小板和冰冻血浆制备

——白膜法

1）第1次重离心后，将血浆转移至第1个转移袋，将适量血浆及白膜层转移至第2个转移袋；

2）将红细胞保留液袋内红细胞保留液转移至红细胞袋，充分混合即为悬浮红细胞；

3）查对血袋上献血条形码，如一致则热合断离悬浮红细胞袋和血浆袋；

4）将白膜成份袋和1个空袋一起进行轻离心，将富含血小板血浆（上层）转移至空袋，制成浓缩血小板，热合断离，弃去白细胞袋。第28页红细胞、浓缩血小板和冰冻血浆制备

——白膜法全血红细胞悬浮红细胞重离心成份分离机或分浆夹成份分离富血小板血浆上层血浆，下层血小板沉淀白膜保养液加保养液轻离心富血小板血浆血浆(保养液空袋)冰冻血浆低温保留速冻浓缩血小板大部分血浆少许血浆+血小板成份分离浓缩血小板悬浮液室温静置1～2小时，自然解聚22±2℃环境下振荡保留丢弃第29页三、相关技术介绍第30页冷沉淀凝血因子制备

——离心法⑴取出待制备冷沉淀新鲜冰冻血浆，置4±2℃冰箱中过夜融化或在4±2℃水浴装置中融化。⑵当血浆基本融化时，取出血浆，在4±2℃环境下重离心。⑶将大部分上层血浆移至空袋，制成冰冻血浆。将留下20～30ml血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子。第31页冷沉淀凝血因子制备

——虹吸法

⑴将新鲜冰冻血浆袋置于4±2℃水浴装置中，另一空袋悬于水浴箱外，位置低于血浆袋，两袋之间形成一定高度落差。⑵血浆融化后，随时被虹吸至空袋中，当融化至剩下40～50ml血浆与沉淀物时，闭合导管，阻断虹吸。将血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子。将冰冻血浆袋和冷沉淀凝血因子袋热合断离。第32页虹吸第33页洗涤红细胞制备

⑴待用洗涤溶液联袋提前放置冷藏保留，无破损渗漏，溶液外观正常，在使用期内。⑵将合格红细胞悬液用作制备洗涤红细胞悬液起始血液，无破损渗漏，血液外观正常，在使用期内。⑶使用无菌接合机将待洗涤红细胞悬液袋导管和洗涤溶液联袋进行无菌接合连通。⑷将洗涤溶液移至红细胞袋内，液体量约为100ml/单位，夹紧导管，混匀。⑸按照制备红细胞离心程序进行离心操作。⑹离心后将血袋取出，防止震荡，垂直放入分浆夹中，把上清液转移至空袋内，夹紧导管。

⑺重复⑷～⑹步骤，洗涤3次。

⑻将适量（50ml/单位）保留液（生理盐水或红细胞保留液）移入已完成洗涤红细胞，混匀。

⑼热合，贴签，入库。⑽假如是在开放环境制备，应严格遵从无菌操作。⑾假如在开放环境制备或最终以生理盐水混悬，洗涤红细胞保留期为24小时。假如是在闭合无菌环境中制备且最终以红细胞保留液混悬，洗涤红细胞保留期与洗涤前红细胞悬液相同。

第34页去除白细胞⑴使用白细胞过滤技术去除全血或红细胞悬液中白细胞。

⑵依据白细胞过滤器生产方说明书要求进行过滤操作。

⑶应该在密闭环境（使用白细胞过滤多联血袋或无菌接合技术）制备。

⑷应该在采血后2天内（采血次日为第1天）完成白细胞过滤。

⑸检验待滤过血液外观，并充分混匀后进行过滤。

⑹假如在进行白细胞过滤操作前，血液已经处于保留温度（4±

2℃），需要在室温进行过滤时，室温应≤26℃，而且应该尽快放回至既定保留温度环境中，从取出到放回时间应＜3小时。

⑺假如在白细胞过滤后，将血液转移至不属于原联体血袋其它血袋，应该建立与实施标识控制机制，确保过滤后血液正确标识。

第35页去除白细胞第36页冰冻红细胞红细胞甘油化⑴取拟冰冻保留全血或悬浮红细胞，离心去除上清液，用无菌接合技术将红细胞转移至容量适当、