BJS 201808 食品中5种α-受体阻断类药物的测定

BJS201808食品中5种α-受体阻断类药物的测定一、标准概况BJS201808是国家市场监督管理总局批准发布的食品补充检验方法，全称为《食品中5种α-受体阻断类药物的测定》，由陕西省食品药品监督检验研究院起草制订，于2019年2月2日以市场监管总局2018年第28号公告正式发布，应用于全国食品监管领域，填补了食品中此类药物检测的监管空白。本标准的核心目的是规范食品（含保健食品）中α-受体阻断类药物的检测方法，打击不法商家非法添加此类药物的行为，保障消费者饮食安全与身体健康。α-受体阻断类药物多为处方药，常用于临床治疗高血压、血管痉挛等疾病，不当摄入会引发低血压、心悸、头晕等不良反应，甚至诱发心脑血管意外，部分不法商家会将其非法添加至保健食品中，虚假宣称具有“速效降压”“增强性功能”等功效，因此建立统一、可靠的检测方法至关重要。二、适用范围本方法规定了食品（含保健食品）中5种α-受体阻断类药物的高效液相色谱-串联质谱测定方法，具体适用于以下品类：食品类：糖果（硬质糖果、凝胶糖果）、酒、茶饮料等；保健食品类：片剂、口服液、胶囊剂等；其他：其他类似基质的食品及保健食品可参照本方法进行检测。本标准测定的5种α-受体阻断类药物分别为：酚妥拉明、哌唑嗪、特拉唑嗪、育亨宾、妥拉唑林。三、检测原理试样经甲醇超声提取后，通过过滤去除杂质，取滤液供高效液相色谱-串联质谱仪测定，采用外标法进行定量分析。核心原理是利用高效液相色谱的分离能力，将试样中的目标化合物与基质干扰物分离，再通过串联质谱的高灵敏度和高特异性，对目标化合物进行定性确认和定量计算，确保检测结果的准确性和可靠性。四、试剂与材料4.1试剂要求除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，实验用水为符合GB/T6682规定的一级水，核心试剂包括：乙腈（CH₃CN）：色谱纯；甲酸（CH₂O₂）：色谱纯；甲醇（CH₃OH）：色谱纯；0.1%甲酸水溶液：精密量取1mL甲酸，用水稀释至1000mL；0.1%甲酸乙腈溶液：精密量取1mL甲酸，用乙腈稀释至1000mL。4.2标准品需使用以下5种标准品，其详细信息（英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量、折算系数）详见标准附录A，纯度要求如下：甲磺酸酚妥拉明、盐酸哌唑嗪、盐酸育亨宾、盐酸妥拉唑林：纯度均≥99%；盐酸特拉唑嗪：纯度≥92%。4.3标准溶液配制标准溶液需严格按照以下步骤配制，确保浓度准确，储存条件符合要求：标准储备液（500μg/mL）：精密称取各标准品，分别折算成酚妥拉明、哌唑嗪、特拉唑嗪、育亨宾、妥拉唑林各10mg，用甲醇溶解并转移至20mL容量瓶中，定容至刻度，-18℃保存，有效期6个月；标准中间液（10μg/mL）：准确吸取各标准储备液1mL，置于50mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，4℃避光保存，有效期3个月；混合标准中间液：准确吸取酚妥拉明、哌唑嗪标准中间液各2mL，特拉唑嗪、育亨宾标准中间液各1mL，妥拉唑林标准中间液8mL，置于同一100mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，临用新制（各组分浓度：酚妥拉明、哌唑嗪200ng/mL，特拉唑嗪、育亨宾100ng/mL，妥拉唑林800ng/mL）；混合标准工作溶液：分别吸取混合标准中间液0.1mL、0.2mL、1.0mL、2.0mL、5.0mL，置于20mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，作为系列标准工作溶液，临用新制（可根据仪器响应情况调整浓度）。五、仪器与设备本方法需使用以下高精度仪器设备，确保检测顺利开展：高效液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）；分析天平：感量分别为0.00001g和0.0001g，用于精准称量样品和试剂；超声波清洗器：用于试样的超声提取；其他：容量瓶、具塞试管、有机相滤膜（0.22μm）等常规实验器皿。六、分析步骤6.1试样制备根据试样形态（固体、液态）分别处理，同时进行空白试验，避免基质干扰：固体试样：取适量混匀、研细，称取1g（精确至0.001g）置于具塞试管中，精密加入10mL甲醇，密塞后超声提取30min，冷却至室温，摇匀，经0.22μm有机相滤膜过滤，取滤液（根据实际浓度适当稀释至线性范围）备用；液态试样：取适量摇匀，称取1g（精确至0.0001g）于10mL容量瓶中，加入8mL甲醇，超声提取30min，冷却至室温，用甲醇定容至10mL，经0.22μm有机相滤膜过滤，取滤液（适当稀释）备用；空白试验：不加试样，按上述相同步骤处理，制得空白溶液；同时称取与试样等量的空白基质，按同法处理，制得空白基质试样溶液，用于扣除基质干扰。6.2仪器参考条件6.2.1色谱条件色谱柱：C18柱（2.1×100mm，2.6μm），或性能相当者；流动相：A相为0.1%甲酸水溶液，B相为0.1%甲酸乙腈溶液，梯度洗脱程序详见表1；流速：300μL/min；柱温：40℃；进样量：5μL。注：若有共流出成分干扰目标化合物检测，可适当调节流动相比例，实现干扰成分与目标化合物的有效分离。梯度时间/min流动相A（%）流动相B（%）0.0090101.0090107.00109011.00109011.50901015.009010表1参考梯度洗脱程序表6.2.2质谱条件电离方式：电喷雾正离子模式（ESI⁺）；检测方式：多反应监测（MRM）；电喷雾电压：5500V；离子源温度：550℃；雾化气压力：55psi；气帘气压力：35psi；辅助气体压力：55psi；定性、定量离子对及相关质谱参数详见表2（*为定量离子，各实验室可根据仪器情况适当调整参数）。序号化合物名称母离子（m/z）子离子（m/z）碰撞能量（eV）去簇电压（V）1酚妥拉明282.191.0*41100212.0121002哌唑嗪384.2247.0*3870366.235703特拉唑嗪388.1247.1*41120290.2301204育亨宾355.2144.2*28120212.0311205妥拉唑林161.265.1*4412090.540120表25种α-受体阻断类药物离子选择参数表6.3定性测定按照上述仪器条件测定试样溶液和标准工作溶液，同时满足以下条件，可确认试样中检出相应目标化合物：试样中目标化合物色谱峰的保留时间，与相应标准溶液色谱峰的保留时间相比，变化范围在±2.5%以内；所选监测离子对的相对丰度比，与相当浓度标准溶液的离子相对丰度比偏差，不超过表3规定的范围；每个定性离子的信噪比（S/N）≥3。相对离子丰度（%）＞50＞20~50＞10~20≤10允许的相对偏差（%）±20±25±30±50表3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差6.4定量测定标准曲线制作：将系列混合标准工作溶液按仪器条件测定，以标准溶液浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线；必要时，可用空白基质试样溶液配制基质混合标准工作溶液，减少基质效应影响（标准品MRM色谱图参见标准附录B）；试样溶液测定：将试样溶液按仪器条件测定，记录色谱峰面积，根据标准曲线计算待测液中目标化合物的浓度。七、结果计算将高效液相色谱-串联质谱测得的待测液浓度，代入以下公式计算试样中目标化合物的含量：X=式中：X——试样中目标化合物的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；c——由标准曲线计算得到的试样溶液中目标化合物的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；V——试样溶液的最终定容体积，单位为毫升（mL）；m——试样的称样量，单位为克（g）；K——试样溶液的稀释倍数（无稀释时K=1）；1000——单位换算系数。计算结果保留三位有效数字，当含量低于检出限时，按检出限的一半计。八、标准意义与应用BJS201808作为食品补充检验方法，为食品及保健食品中5种α-受体阻断类药物的检测提供了统一、科学、