牛冷冻胚胎移植技术规程

牛冷冻胚胎移植技术规程本标准由秦皇岛市畜牧局提出；本标准在秦皇岛市畜牧局归口；本标准起草单位：秦皇岛市畜牧工作站。本标准起草人：郑庆半、郭瑞芬、鲍淑琴、孙红梅。选择时间宜确定在实施胚胎移植以前2个月左右(即2个发情周期),以便于观察受体牛的发情周期。2.1.2品种2.1.6繁殖性能受体牛在移植前6周~8周开始补饲，根据首体牛的膘情日喂精料1kg/日。在日粮组成中岩不添加苜蓿，则豆饼等蛋白饲料应占20-25%,添加苜蓿至粗饲料喂量的40%时，料1-1.5%。食盐添加量0.5-1%,同时保证微量元素及维生素足量供给。2药品：氯前列烯醇(PG,0.2mg/2ml/支);剂量；经产牛：(0.3~0.4)mg/次，育成牛(0.2~0.3)采用二次注射法(肌注):第一次注射，在任意一天；第二次注射，在第一次注射后11天。第二次注射后24小时~96小时观察发情。第二次注射观察发情24小时后，对发情受体牛注射促排3号12.5ug/头移植效果更佳。受体牛发情之日计为0天，6天~8天内进行胚胎移植。跨的时间(以小时为单位记录)。5.3.1受体牛在发情后6天~8天之间均可进行移植(发情之时定为0小时)。移植前对受体牛进行5.3.2受体牛实行1~2尾椎间硬膜外麻醉，擦拭外阴部。5.3.4.2胚胎解冻所需溶液。保存液：含0.4%牛血清白蛋白的PBS液；解冻液：1M蔗糖/保存液。胚胎→空气浴(18℃~25℃)10秒→32℃水浴10秒→揩干细管→剪去细管塞→推出胚胎→解冻液4分钟→保存液，冲洗5次~6次→镜检→装管→细管装入移植枪→移植(胚胎解冻后30分~45分钟内移入受体)。1.5M乙二醇/保存液(含0.1M蔗糖)冷冻胚胎的解冻(直接解冻移植法):枪→移植(胚胎解冻后5分~8分钟内移入受体)。受体移植时间(发情之时为0小时)囊胚(B)7.25天→7.5天7.5天→8.0天5.3.5重新将胚胎装入0.25ml塑料细管(直接解冻移植法不需要重新装管)。5.3.8将胚胎移植到受体有黄体一侧子宫角的上1/3~1/2处。5.3.9按附录A(规范性附录)做好受体移植记录。4(规范性附录)序号牛号胎次日期营养补充及注射日期氯前列烯醇注射日发情时间时间左右量及质量胚胎谱系技术员备注1《牛冷冻胚胎移植技术规程》编制说明根据市技术监督局2005年农业地方标准制修订计划，由秦皇岛市畜牧工作站承担了《牛冷冻胚胎移植技术规程》的起草工作。通过深入细致的总结近年来我市牛冷冻胚胎移植技术的推广经验，并在国内同行专家指导的基础上，目前已完成了该标准的制定工作。牛胚胎移植技术是当今世界应用于畜牧生产的高新生物技已被证明是一项引进优良品种、实现快速扩群的快捷、有效途径。近年来，我国为了满足奶业迅猛发展对优秀奶牛资源的需求，继牛生产实践证明，推广应用牛胚胎移植技术加快了我市奶牛业实现跨但由于胚胎移植是一项高新生物技术，在实际生产过程中，虽然进行了精心组织，但经常在受体牛选择利用率、同期发情率、药物处理后可移植利用率、移植准胎率、流产及难产率五个方面里的某个或多个环节出现问题，最后往往出现产犊率低的局面。为了促自2000年以来，我站先后派专人到内蒙古大学、河北大学等院校学习高产奶牛的胚胎移植技术，并在北京相中公司、中国农科院畜牧研究所等专家的指导下进行具体的生产实践。目前，体外冻胚的移植已达到了国内先进水平，并摸索出了一套适于在生产中大面2积推广的实际操作经验。在本规程在制定过程中，我们在总结生产经验的基础上，借鉴了内蒙古自治区家畜改良站制定的技术规程。该标准遵循可靠、先进、实用的原则设定项目与指标，对于不适于或在当前生产中难以推广的指标均舍弃不列。三、与国内外标准比较现阶段我国部分省份制定了一些牛冷冻胚胎移植技术规程，但在规程中试演成分居多，不适于在生产中大规模的推广应用。尤其是近年来，随着在生产的不断深入开展，已远远满足不了当前生产的需要。本规程的制定，是经过多年的生产实践证明了的，适于在生产中大规模推广，尤其是适于在我市推广的技术操作。通过该标准的执行，可有效地规范当前胚胎移植技术的推广，进一步提高牛冷冻胚胎移植的成功率，为促进全市奶牛业的更快发展起到积极的推动作用。《牛冷冻胚胎移植技术规程》审定会议纪要时间：2005年10月28日地点：秦皇岛市畜牧局会议室编写人员：郑庆丰一致同意该技术规程作为秦皇岛市地方标准发布实施，认为发布后能指导实践，提高畜牧生产水平。附：审定专家签字表《牛冷冻胚胎移植技术规程》地方标准审定委员会名单日期：2005年10月28日序号审定会职务姓名工作单位职称1主任委员秦皇岛市畜牧工作站畜牧畜牧研究员2副主任委员丛思荭秦皇岛市质量技术监督局标准化标准化高工号结3委员闫胜秦皇岛市质量技术监督局标准化标准化高工4委员郭永生秦皇岛市畜牧局畜牧畜牧5委员李贺飞秦皇岛市畜牧兽医站兽医兽医研究员