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文档简介
《食源性肽粉通则》国家标准编制说明(征求意见稿)
(一)、工作简况,包括任务来源、制定背景、起草过程等
1、任务来源
本标准由全国特殊食品标准化技术委员会(TC466)上报,被列入2022年国家标准
制修订计划,项目编号20221342-T-424,项目名称“《食源性肽粉通则》”。由全国特殊
食品标准化技术委员会(TC466)归口。
2、制定背景
随着健康意识的提升和食品科技的发展,食源性肽类产品因其独特的营养价值和健
康益处,受到了消费者的广泛关注。近年来,市场上涌现出多种来源的肽类产品,包括
但不限于海洋鱼源、植物源、动物源等。这些产品在提高人体免疫力、促进消化吸收、
调节生理功能等方面展现出显著效果。然而,由于缺乏统一的国家标准,市场上产品质
量参差不齐,消费者难以辨别和选择,行业内部也存在一定程度的混乱。因此,制定《食
源性肽粉通则》国家标准,旨在规范市场秩序,引导行业健康发展,确保消费者权益,
同时促进相关产业的技术进步和产品创新。
3、简要起草过程
GB/T22729-2008《海洋鱼低聚肽粉》已实施16年,随着行业发展,标准中部分技
术指标已不适用于目前的行业情况,秘书处于2021年向国标委提交了标准修订计划。
为了规范行业生产、引导行业健康发展,根据行业需要,针对多种来源的肽类产品制定
指标评价体系,名称改为《食源性肽粉通则》。
2022年12月标准任务下达后,中国食品发酵工业研究院有限公司开展了食源性肽
粉关键技术标准化基础研究攻关,组织开展《食源性肽粉通则》国家标准的起草工作。
2023年1月公开发文征集起草单位、调研行业情况,筹建标准起草工作组。
2023年4月10日在北京召开第一次起草工作组会议,共同研究、讨论标准修订内
容,整理修改形成标准文本讨论一稿,初步确定后续工作安排。
2023年5月-6月,征集行业食源性肽粉样品以及相关标准建议和资料。
2023年7月-12月,对行业征集样品的蛋白质、水分、肽含量等指标进行普测,了
解行业产品情况,为指标设置提供依据。
2024年1月-6月,开展肽含量(氨基酸分析仪法)的验证工作,分别对方法的特
异性、检出限定量限、重复性、正确度等进行考察。建立了肽含量的测定方法。
2024年7月-11月,开展分子量分布的试验方法验证工作,建立了食源性肽粉的分
子量分布的试验方法。
2023年11月,根据起草组意见与建议,形成征求意见稿,开展行业内公开征求意
见工作。
4、主要起草单位及起草人
起草单位:中国食品发酵工业研究院有限公司等。
本标准主要起草人:暂略。
主要工作内容:中国食品发酵工业研究院有限公司负责起草,收集、整理国内外相
关标准和技术资料,制定研究方案,标准起草和编制说明等,以及组织、协调、审核等
工作。其他起草单位协助搜索技术资料并研究分析,方法验证比对,样品检测及数据整
理,参与研究方案确定,对本标准各版本涵盖的全部内容提出编写和修改意见。
(二)、标准编制原则、主要内容及其确定依据,修订国家标准时,还包括
修订前后技术内容的对比
——标准编制原则
1、以科学为依据
以科学技术和实验数据为依据,采用统计评估方法,结合行业情况和企业生产检测
数据,经过科学研究而修订。
2、以保证食品安全、保护人民健康为原则
标准的制定以保证食品安全、保护人民健康为基本原则。制定产品标准可规范产品
质量,引导行业健康发展,对项目设置和指标进行认真研究,最大限度地保证产品的安
全和质量水平。
2、与国际标准接轨
我国加入WTO后,与国际贸易接轨,向世界先进水平靠拢是国内生产企业发展的
必经之路。起草工作组通过对相关的国内外标准、技术资料的分析,结合国内产品的生
产工艺、质量水平及检验水平的实际情况,本着使标准趋向科学性、先进性及合理适用
的原则进行标准修订工作。
——主要内容及其确定依据
本标准编写符合GB/T1.1-2020的规定,在GB/T22729-2008《海洋鱼低聚肽粉》(以
下简称原标准)基础上修订,与原标准相比主要技术变化如下:
1名称
全国特殊食品标准化技术委员会(TC466)归口的GB/T22729-2008《海洋鱼低聚肽粉》
已实施14年,随着行业发展,标准中部分技术指标已不适用于目前的行业情况,秘书
处于2021年向国标委提交了标准修订计划。计划针对多种来源的肽类产品制定指标评
价体系,名称改为《食源性肽粉通则》。
2范围:
通过行业调研和样品征集,并与行业充分交流与讨论后,将原标准中的范围调整为
“本文件规定了食源性肽粉的术语和定义,规定了食源性肽粉的原辅材料、感官、理化
指标等要求,描述了相应的试验方法,规定了检验规则和标志、包装、运输和贮存的内
容,同时给出了产品分类。本文件适用于食源性肽粉产品的生产、检验和销售。”
3规范性引用文件
根据标准中技术要求和试验方法等引用文件更新了规范性引用文件。
4术语和定义
本标准参考国内外相关标准并结合行业情况,规定了“肽(蛋白肽)”、“低聚肽(寡
肽)”、“多肽”的定义。
序
标准编号标准名称产品定义
号
以海洋鱼皮鱼骨或鱼肉为原料,用酶解法生产的、相对分子质
1GB/T22729-2008海洋鱼低聚肽
量低于1000的低聚肽(短肽)为主要成分的粉末状产品。
以玉米蛋白为原料,用酶(蛋白酶)解法生产的,以相对分子
2QB/T4707-2014玉米低聚肽粉
质量小于1000的低聚肽为主要成分的粉末状产品
以谷朊粉(小麦蛋白粉)为原料,用酶(蛋白酶)解法生产的,
3QB/T5298-2018小麦低聚肽粉
以相对分子质量小于1000u的低聚肽为主要成分的粉末状产品
以富含蛋白的可食用植物(豆类、谷类、坚果及籽类等)、食
食品安全国家标准
品加工用粕类或食品加工用植物蛋白等单一物质为蛋白原料,
4GB31611-2023食品加工用植物蛋
经过提取、酶解和(或)微生物发酵、过滤、杀菌、干燥等工
白肽
序生产的,相对分子质量在189~10000的肽为主要成分的产品。
淡水鱼胶原蛋白肽以淡水鱼鱼皮和鱼鳞为原料,用酶解法工艺生产,相对分子质
5SB/T10634-2011
粉量低于5000Da肽段为主要成分的粉末状产品。
以淡水鱼肉、鱼皮或鱼鳞为主要原料,用酶解法生产的、相对
6QB/T4588-2013淡水鱼蛋白肤
分子质量在5000以下的肽为主要成分的产品。
以富含胶原蛋白的新鲜动物组织(包括皮、骨、筋、腱、鳞等)
7GB31645-2018胶原蛋白肽为原料,经过提取、水解、精制生产的,相对分子质量低于10000
的产品
以大豆粕或大豆蛋白为主要原料,用酶法或生物发酵法生产的,
8GB/T22492-2008大豆肽粉
相对分子质量在5000以下,主要成分为肽的粉末状物质
以甲鱼(学名鳖、又名团鱼)为原料,经清洗、去内脏、酶法降解、
9QB/T5802-2023甲鱼肽粉浓缩、干燥等工艺生产的、以相对分子质量低于1000道尔顿(Da)
的肽为主要成分的粉末状产品。
以人参为原料,经预处理、蛋白酶水解、灭酶、分离、浓缩、
10QB/T5946-2023人参肽
干燥等工艺加工制成的粉末状蛋白肽。
5产品分类
5.1按照蛋白肽产品的原料来源可分为动物蛋白肽、植物蛋白肽、微生物蛋白肽、
复合来源的蛋白肽和其他来源蛋白肽。
5.2按照蛋白肽产品的生产工艺可分为酶水解蛋白肽、微生物发酵蛋白肽、复合制
备法蛋白肽,及其他。
6命名
本标准规定了食源性肽粉产品名称中至少包含有一个主要蛋白质原料来源的描述,
如“鱼蛋白肽粉”、“海洋鱼皮胶原低聚肽粉”、“小麦肽粉”、“小麦蛋白肽粉”、
“小麦低聚肽粉”、“玉米大豆肽粉”、“玉米大豆复合蛋白肽粉”等。也可以以肽链
中特征肽段、氨基酸残基的数量等命名,如“鹅肌肽”、“胶原三肽”等。
另外本标准还规定了,在遵守命名总要求的情况下,可采用产品分类的分类命名,
或两种以及两种以上类别交叉命名,如“水解乳清蛋白低聚肽粉”等。
7要求:
7.1原辅料要求
本标准分别对原料和其他原辅料进行了要求,其中对于原料明确了动物源的蛋白肽
原料应来自非疫区,经检验检疫合格。畜、禽类应符合GB2707的规定。水产动物应符
合GB2733的规定。植物蛋白肽的原料应符合GB14932、GB20371规定的要求。其他
原料应符合相应的食品标准和有关规定的要求。
7.2感官要求
按照GB/T1.1-2020规范标准文本描述。分别对色泽、滋味气味和状态进行了描述
(见表1)。
表1感官要求
项目要求
色泽白色或食物特有的颜色
滋味、气味具有产品应该有的滋味和气味,无异味
状态粉末状或颗粒状,无结块,无正常视力看见的外来异物
7.2理化指标
本标准分别对蛋白质含量、肽含量、水分和重均分子量进行了要求(见表2)。
表2本标准的理化指标要求
指标
项目
低聚肽(或寡肽)多肽
蛋白质(以干基计),g/100g≥70
肽含量(以干基计),g/100g≥50
水分,g/100g≤7
重均分子量≤10001000-10000(含)
7.2.1蛋白质
本标准对比分析了动物和植物来源的蛋白肽和低聚肽等国内相关标准中蛋白质含量
的要求,部分产品蛋白质要求在70g/100g以上,另外部分标准规定三级、二级蛋白质要
求在75g/100g以上,一级在90g/100g以上(见表3)。同时,对征集的有代表性的样
品的蛋白质进行检测,结果表明,样品的蛋白质在9.32~99.90g/100g之间(见表4),
其中47%的样品蛋白质≥90.0g/100g;63%的样品蛋白质≥80g/100g;75%的样品蛋白
质≥70g/100g。结合相关标准,最终确认本标准蛋白质要求为≥70g/100g。
表3食源性肽粉相关标准的蛋白质含量要求
标准号标准名称蛋白质/%
一级二级三级
GB/T22492-2008大豆肽粉
X≥90X≥85X≥80
一级二级/
QB/T5298-2018小麦低聚肽粉
X≥90X≥75/
QB/T4707-2014玉米低聚肽粉X≥80
鱼皮鱼骨鱼肉
GB/T22729-2008海洋鱼低聚肽粉
≥14.5(总氮)≥13.5(总氮)≥13.5(总氮)
GB31645-2018胶原蛋白肽15(总氮)
一级二级三级
SB/T10634-2011淡水鱼胶原蛋白肽粉
≥90≥85≥85
鱼皮或鱼鳞鱼肉
QB/T4588-2013淡水鱼蛋白肽
≥15(总氮)≥13(总氮)
QB/T5802-2023甲鱼肽粉≥85
QB/T5946-2023人参肽≥10(总氮)
食品安全国家标准食品加
GB31611-2023≥11.2(总氮)
工用植物蛋白肽
表4行业征集食源性肽粉相关样品的蛋白质情况
蛋白质蛋白质
(以干(以干
样品编号样品名称样品编号样品名称
基计),基计),
g/100gg/100g
SCFF-PP-01血蛋白多肽粉88.30SCFF-PP-19大豆肽粉86.70
SCFF-PP-02血蛋白多肽粉固体饮料90.90SCFF-PP-20玉米肽66.40
SCFF-PP-03胶原蛋白肽(牛)/SCFF-PP-21核桃肽84.40
SCFF-PP-04胶原蛋白肽(鱼)95.40SCFF-PP-22大豆肽粉91.50
SCFF-PP-05小米低聚肽粉10.90SCFF-PP-23小麦低聚肽94.40
SCFF-PP-06玉米低聚肽粉9.32SCFF-PP-24酪蛋白肽91.10
SCFF-PP-07人参低聚肽粉11.60SCFF-PP-25玉米低聚肽粉84.70
SCFF-PP-08鲜牛骨胶原蛋白肽粉93.70SCFF-PP-26海洋鱼皮胶原低聚肽粉94.60
SCFF-PP-09核桃低聚肽粉83.30SCFF-PP-27羊皮胶原蛋白肽92.60
SCFF-PP-10藜麦米低聚肽粉11.80SCFF-PP-30海参肽粉95.80
SCFF-PP-12海参肽粉89.20SCFF-PP-31牛骨胶原蛋白肽粉94.70
SCFF-PP-13燕麦肽粉64.70SCFF-PP-32牛骨肽99.90
SCFF-PP-14牡蛎肽粉70.90SCFF-PP-33牦牛骨肽98.20
SCFF-PP-15火麻仁低聚肽粉79.20SCFF-PP-34海参肠肽77.30
SCFF-PP-16牦牛骨胶原蛋白肽粉91.70SCFF-PP-35海参肽92.50
SCFF-PP-17牛胶原蛋白97.50SCFF-PP-36人参肽23.60
SCFF-PP-18鱼胶原蛋白97.20SCFF-PP-37鹿血肽78.30
7.2.2肽含量
本标准对比分析了动物和植物来源的蛋白肽和低聚肽等国内相关标准中肽含量的要
求,除个别产品外,三级肽含量要求在55g/100g以上,二级在70g/100g以上,一级在
75g/100g以上(见表5)。同时,对征集的有代表性的样品的肽含量进行检测,结果表
明,样品的肽含量在10.22~94.77g/100g之间(见表6),其中20%的样品肽含量>90.0
g/100g;66%的样品肽含量>70g/100g;88%的样品肽含量>50g/100g。结合相关标准,
最终确认本标准肽含量要求为>50g/100g。
表5食源性肽粉相关标准的肽含量要求
标准号标准名称肽(低聚肽)含量/%
一级二级三级
GB/T22492-2008大豆肽粉
X≥80X≥70X≥55
一级二级/
QB/T5298-2018小麦低聚肽粉
X≥75X≥50/
QB/T4707-2014玉米低聚肽粉70
鱼皮鱼骨鱼肉
GB/T22729-2008海洋鱼低聚肽粉
X≥85X≥75X≥80
GB31645-2018胶原蛋白肽/
一级二级三级
SB/T10634-2011淡水鱼胶原蛋白肽粉
857555
鱼皮或鱼鳞鱼肉
QB/T4588-2013淡水鱼蛋白肽
8070
QB/T5802-2023甲鱼肽粉75
QB/T5946-2023人参肽8.0
食品安全国家标准食品加
GB31611-202360
工用植物蛋白肽
表6行业征集食源性肽粉相关样品的肽含量情况
肽肽
样品编号样品名称样品编号样品名称
g/100gg/100g
SCFF-PP-01血蛋白多肽粉73.18SCFF-PP-19大豆肽粉84.14
SCFF-PP-02血蛋白多肽粉固体饮料86.78SCFF-PP-20玉米肽51.36
SCFF-PP-03胶原蛋白肽(牛)94.31SCFF-PP-21核桃肽67.28
SCFF-PP-04胶原蛋白肽(鱼)94.77SCFF-PP-22大豆肽粉84.03
SCFF-PP-05小米低聚肽粉12.41SCFF-PP-23小麦低聚肽90.49
SCFF-PP-06玉米低聚肽粉10.22SCFF-PP-24酪蛋白肽76.36
SCFF-PP-07人参低聚肽粉13.93SCFF-PP-25玉米低聚肽粉76.31
SCFF-PP-08鲜牛骨胶原蛋白肽粉82.84SCFF-PP-26海洋鱼皮胶原低聚肽粉92.67
SCFF-PP-09核桃低聚肽粉75.49SCFF-PP-27羊皮胶原蛋白肽81.46
SCFF-PP-10藜麦米低聚肽粉12.29SCFF-PP-30海参肽粉85.99
SCFF-PP-12海参肽粉82.26SCFF-PP-31牛骨胶原蛋白肽粉84.43
SCFF-PP-13燕麦肽粉58.75SCFF-PP-32牛骨肽91.21
SCFF-PP-14牡蛎肽粉63.15SCFF-PP-33牦牛骨肽85.90
SCFF-PP-15火麻仁低聚肽粉69.46SCFF-PP-34海参肠肽67.83
SCFF-PP-16牦牛骨胶原蛋白肽粉82.79SCFF-PP-35海参肽84.86
SCFF-PP-17牛胶原蛋白94.11SCFF-PP-36人参肽22.15
SCFF-PP-18鱼胶原蛋白92.68SCFF-PP-37鹿血肽61.60
7.2.3水分
本标准对比分析了植物蛋白粉、蛋白肽、低聚肽等国内相关标准中水分的要求,除
GB20371-2016《食品加工用植物蛋白粉》为≤10.0(12.0)以外,蛋白肽产品的标准水
分含量均要求在≤6.0~7.0之间(见表6)。同时,对征集的有代表性的样品的水分进行
检测,结果表明,样品的水分在2.3~9.7g/100g之间(见表7),其中41%的样品水分
≤6.0g/100g;83%的样品水分≤7.0g/100g;94%的样品水分≤8.0g/100g。结合相关标
准,最终确认本标准水分要求为≤7.0g/100g。
表7食源性肽粉相关标准的水分要求
标准号标准名称水分/%
GB20371-2016食品加工用植物蛋白粉≤10.0(12.0)
GB/T22492-2008大豆肽粉≤7.0
QB/T5298-2018小麦低聚肽粉≤6.5
GB/T22729-2008海洋鱼低聚肽粉≤7.0
GB31645-2018胶原蛋白肽≤7.0
QB/T4707-2014玉米低聚肽粉≤7.0
QB/T4588-2013淡水鱼蛋白肽≤7.0
SB/T10634-2011淡水鱼胶原蛋白肽粉≤7.0
QB/T5802-2023甲鱼肽粉≤6.0
QB/T5946-2023人参肽≤7.0
GB31611-2023食品安全国家标准食品加工用植物蛋白肽≤7.0
表8行业征集食源性肽粉相关样品的水分情况
水分,
样品编号样品名称水分,g/100g样品编号样品名称
g/100g
SCFF-PP-01血蛋白多肽粉6.77SCFF-PP-20玉米肽5.18
SCFF-PP-02血蛋白多肽粉固体饮料2.34SCFF-PP-21核桃肽3.90
SCFF-PP-04胶原蛋白肽(鱼)6.99SCFF-PP-22大豆肽粉3.23
SCFF-PP-05小米低聚肽粉6.61SCFF-PP-23小麦低聚肽3.66
SCFF-PP-06玉米低聚肽粉7.44SCFF-PP-24酪蛋白肽2.44
SCFF-PP-07人参低聚肽粉9.70SCFF-PP-25玉米低聚肽粉4.01
SCFF-PP-08鲜牛骨胶原蛋白肽粉6.82SCFF-PP-26海洋鱼皮胶原低聚肽粉4.84
SCFF-PP-09核桃低聚肽粉6.12SCFF-PP-27羊皮胶原蛋白肽9.42
SCFF-PP-10藜麦米低聚肽粉7.04SCFF-PP-28水解牛奶蛋白粉2.81
SCFF-PP-11向日葵花粉(固体饮料)8.55SCFF-PP-29水解牛奶蛋白粉5.45
SCFF-PP-12海参肽粉8.05SCFF-PP-30海参肽粉4.06
SCFF-PP-13燕麦肽粉6.51SCFF-PP-31牛骨胶原蛋白肽粉2.61
SCFF-PP-14牡蛎肽粉6.87SCFF-PP-32牛骨肽8.20
SCFF-PP-15火麻仁低聚肽粉6.59SCFF-PP-33牦牛骨肽6.94
SCFF-PP-16牦牛骨胶原蛋白肽粉7.99SCFF-PP-34海参肠肽6.26
SCFF-PP-17牛胶原蛋白5.22SCFF-PP-35海参肽6.28
SCFF-PP-18鱼胶原蛋白5.05SCFF-PP-36人参肽7.53
SCFF-PP-19大豆肽粉3.10SCFF-PP-37鹿血肽8.70
7.2.4重均分子量
蛋白质的重均分子量(Mw)是描述蛋白质分子量分布的一种方式,它是按质量的
统计平均分子量。重均分子量是通过将每个分子的分子量乘以其在混合物中所占的质量
分数,求和得到的。
本标准对行业征集到的食源性肽粉样品进行了重均分子量的测定。重均分子量均分
布在10000以下,样品标注为低聚肽的,重均分子量也均在1000以下,符合标准的定
义及要求。
表9行业征集食源性肽粉相关样品的重均分子量情况
重均分子重均分子
样品编号样品名称样品编号样品名称
量量
SCFF-PP-01血蛋白多肽粉873.45SCFF-PP-19大豆肽粉1,268.17
SCFF-PP-02血蛋白多肽粉固体饮料726.68SCFF-PP-20玉米肽405.73
SCFF-PP-03胶原蛋白肽(牛)2,208.95SCFF-PP-21核桃肽1,135.16
SCFF-PP-04胶原蛋白肽(鱼)2,920.12SCFF-PP-22大豆肽粉1,101.03
SCFF-PP-05小米低聚肽粉653.98SCFF-PP-23小麦低聚肽453.15
SCFF-PP-06玉米低聚肽粉592.92SCFF-PP-24酪蛋白肽542.83
SCFF-PP-07人参低聚肽粉552.49SCFF-PP-25玉米低聚肽粉388.54
SCFF-PP-08鲜牛骨胶原蛋白肽粉3,854.22SCFF-PP-26海洋鱼皮胶原低聚肽粉561.00
SCFF-PP-09核桃低聚肽粉988.35SCFF-PP-27羊皮胶原蛋白肽3,695.96
SCFF-PP-10藜麦米低聚肽粉847.88SCFF-PP-30海参肽粉839.50
SCFF-PP-12海参肽粉661.62SCFF-PP-31牛骨胶原蛋白肽粉734.72
SCFF-PP-13燕麦肽粉542.27SCFF-PP-32牛骨肽1,354.78
SCFF-PP-14牡蛎肽粉777.25SCFF-PP-33牦牛骨肽1,127.65
SCFF-PP-15火麻仁低聚肽粉931.43SCFF-PP-34海参肠肽647.59
SCFF-PP-16牦牛骨胶原蛋白肽粉4,168.97SCFF-PP-35海参肽1,012.09
SCFF-PP-17牛胶原蛋白1,514.57SCFF-PP-36人参肽772.74
SCFF-PP-18鱼胶原蛋白847.06SCFF-PP-37鹿血肽848.28
8试验方法
本标准规范了感官、蛋白质、肽含量、水分和重均分子量的检测方法,其中蛋白质
按照GB5009.5规定的方法检测,水分参照GB5009.3中规定的方法进行检测;肽含量
和重均分子量分别采用附录A和附录B规定的方法进行测定,具体验证数据见第三部
分。
9检验规则
根据有关法规要求更新了判定规则。
10标志、包装、运输及贮存
根据有关法规要求更改了标志要求。
(三)试验验证的分析、综述报告,技术经济论证,预期的经济效益、社
会效益和生态效益
本标准制定过程中分别对食源性肽粉中蛋白质、肽含量、水分、重均分子量、和相
对分子质量小于1000的肽段所占比例等项目指标进行了测定。对于本次制定的肽含量、
重均分子量的检测方法进行了方法学考察。具体方法验证情况如下:
1肽含量(氨基酸分析仪法)
高分子蛋白质在酸性条件下易被沉淀,相对分子质量小的蛋白质水解物(酸溶蛋白
质)可溶于酸性溶液(其中包括肽和游离氨基酸)。样品经酸化后,去除沉淀蛋白质,
收集清液,清液的酸溶蛋白质水解物含量减去游离氨基酸含量即为肽含量。
1.1分析步骤和检测条件:见标准文本;
1.2方法学考察
1.2.1特异性
1.2.1.1酸溶蛋白
称取0.05g左右充分混匀的样品(精确到0.001g)至离心管,加15%的三氯乙酸溶
液5mL。用涡旋震荡仪振荡半分钟后,放入离心机内,离心力7500g,离心10分钟。
离心结束后,取出离心管,将上清液倒入消化管中,消化管中加入约2.0g助熔剂和10mL
浓硫酸。按GB5009.5规定的第一法凯氏定氮法测定清液的蛋白质含量,计算出样品中
酸溶蛋白质含量。
1.2.1.2游离氨基酸
称取样品1g(精确至0.001g),用3.5%磺基水杨酸溶液20mL溶解均匀。将样品溶
液转移至50mL容量瓶中,并定容。取1mL样品溶液于离心力为7500g的离心机上离心
10min,取离心清液,稀释适当倍数,再用0.45um水相滤膜过滤,备用。
按仪器操作规程,使仪器达到检测状态。分别将标准品和样品注入氨基酸分析仪,
制作标准曲线,并以外标法通过峰面积计算样品中氨基酸的浓度。
肽含量=酸溶蛋白-游离氨基酸,具体结果如表1-1所示。
表1-1肽粉中的肽含量
序号样品中酸溶蛋白含量样品中游离氨基酸含量肽含量
141.84g/100g5.00g/100g36.84g/100g
1.2.2检出限及定量限
1.2.2.1酸溶蛋白的检出限
方法:利用浓度为10mg/L的水中氨氮标准溶液对仪器重复测量7次,根据仪器的
测量值,检出限检测结果见表1-2,利用式(1)计算测量仪器的检出限。
CL=s×t(n-1,1-α=0.99)×V=s×3.143×V(1)
式中:
CL——检出限,mg/L;
s——试验标准偏差;
3.143——取n=7且置信水平1-α=0.99时查t分布表得:t(n-1,1-α=0.99)=3.143;
V——试样体积,mL。
表1-2检出限检测结果。
吸取标准溶液体积定容体积消耗盐酸体积盐酸浓度
氮含量,mg/L均值,mg/L标准偏差
mLmLmLmol/L
空白0.1860.1118
0.5500.5190.111810.43
0.5500.5130.111810.22
0.5500.5190.111810.42
0.5500.5080.111810.0710.340.148
0.5500.5150.111810.30
0.5500.5190.111810.42
0.5500.5210.111810.49
准确移取氨氮标准溶液0.50mL,至50mL容量瓶,定容后全部转移至消化管,加
2g助溶剂,10mL浓硫酸,消化至无色透明。冷却后,经全自动凯氏定氮仪蒸馏、滴定,
依据结果,计算仪器检出限,滴定结果见表1-2。
重复测定7次,依据式(1),计算仪器检出限为23.28mg/L。
1.2.2.2游离氨基酸的检出限及定量限
依据式(2)、式(3)计算检出限和定量限,结果见表1-3。
3×S×C
LOD=(2)
N
10×S×C
LOQ=(3)
N
式中:
LOD——检出限,nmol;
LOQ——定量限,nmol
S——组分峰高;
N——基线噪音;
C——组分摩尔质量,nmol。
表1-3方法的检出限和定量限
摩尔质量检出限定量限定量限
Name分子量噪音峰高检出限nmol
nmolmg/Lnmolmg/L
Asp133.1105014680420.0430.290.1430.95
Thr119.1105014448220.0440.260.1450.87
Ser105.1105014325620.0440.230.1470.77
Glu147.1105011177120.0560.410.1881.38
Gly75.1105017184320.0370.140.1220.46
Ala89.1105012355620.0510.230.1700.76
Val117.110506970420.0900.530.3011.76
(Cys)2240.2105014914710.0210.250.0700.85
Met149.2105017529920.0360.270.1200.89
Ile131.2105011338820.0560.360.1851.21
Leu131.2105013529420.0470.310.1551.02
Tyr181.2105013402920.0470.430.1571.42
Phe165.2105010948520.0580.480.1921.58
His155.2130021029420.0370.290.1240.96
Lys106.2200012084820.0990.530.3311.76
Arg174.28507814520.0650.570.2181.89
Pro115.140009584620.2501.440.8354.80
1.2.3线性范围
1.2.3.1游离氨基酸线性范围
17种氨基酸标准品浓度为100nmoL/mL,分别进样10μL、15μL、20μL、25μL、30μL
和35μL,以峰面积和浓度绘制标准曲线,结果见表1-4。
表1-4氨基酸标准曲线及相关系数
组份名称标准曲线线性关系
AspY=5.375e+004+3.441e+006Xr=0.9997
ThrY=5.071e+004+3.517e+006Xr=0.9999
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