生物学生物技术公司生物研发实习生实习报告

生物学生物技术公司生物研发实习生实习报告一、摘要

2023年7月1日至2023年8月31日，我在一家生物技术公司担任生物研发实习生。期间，我参与重组蛋白表达优化项目，通过改造质粒载体和优化发酵条件，使重组蛋白表达量提升至12.5mg/L，较初始水平提高220%；建立并验证了基于QTOF的蛋白质鉴定方法，成功鉴定出样品中29个目标蛋白，准确率达98.2%；运用分子克隆技术构建了3种新型表达载体，并通过测序验证了插入片段的完整性和正确性。实习中熟练应用了蛋白质纯化、酶活性测定、WesternBlot等实验技术，掌握了实验数据标准化记录与统计分析方法，形成了可复用的质粒构建与蛋白表达优化流程。

二、实习内容及过程

实习目的主要是了解生物技术研发的实际流程，把学校学的分子生物学知识用上，看看自己到底喜欢哪方面。

实习单位是家专注于重组蛋白药物研发的公司，规模不大但氛围挺实在，主要做细胞因子和生长激素那种东西。

实习内容开始是跟着导师熟悉实验室规范，学了无菌操作和实验室安全制度，然后开始参与重组蛋白表达优化项目。项目是优化一个干扰素α的重组蛋白产量，刚开始表达量只有5mg/L，效果不理想。

第2周开始动手改造表达载体，把启动子换成了更强的Pichia表达系统中的AOX1强启动子，还增加了His标签和Tag去除位点。7月15号转染酵母后，发酵液SDSPAGE检测，看到条带明显变亮了。

遇到最大困难是在纯化阶段，第一次做Ni柱纯化，上样后洗脱曲线很奇怪，蛋白收率只有60%，纯度也只有85%。导师让我重新分析上样和洗脱的pH值梯度，我发现自己没把咪唑浓度梯度算对。重新调整后第3次纯化，蛋白纯度提到97%，收率也到78%。学到了蛋白纯化液相色谱基本原理，还有怎么根据蛋白pI选择洗脱条件。

8月初参与了一个蛋白质鉴定项目，用QTOF质谱分析细胞裂解物，刚开始数据处理总对不准，请教了师兄后知道是数据库筛选参数没调好，调整后能准确定位到29个目标蛋白，覆盖率达到98.2%。

实习成果有3个：一是干扰素α蛋白表达量提升到12.5mg/L，比原先220%；二是建立了完整的蛋白质鉴定SOP流程；三是成功构建了3种新型表达载体并验证了功能。技能上熟练掌握了分子克隆、蛋白质纯化和质谱分析这些。

遇到的问题是公司培训机制比较松散，很多实验细节没人系统教，得自己看文献摸索。还有岗位匹配度问题，我被分到发酵组，但更想做蛋白质工程。

建议是公司可以搞些每周例会分享实验技巧，或者建立新员工实验笔记共享平台。对个人来说，这次经历让我明白蛋白纯化真是个技术活，需要大量试错，也让我确定了自己更想做结构生物学相关的，以后得多补点蛋白质结晶和晶体学知识。这段经历挺值的，虽然累但真学到了不少东西。

三、总结与体会

这8周实习，像是在学校理论和现实之间搭了座桥。7月1号开始时，我对实验室实际操作还是懵的，连移液枪都控不好体积，做质粒提取第一次就失败了，导师还得耐心教我。到8月31号离开时，独立完成重组蛋白纯化流程，从细胞培养到蛋白鉴定，整个周期自己跑下来了，心里挺踏实。

最值的是干扰素α表达量那个坎，最初才5mg/L，试了3种不同启动子，还调整了诱导温度和IPTG浓度，最后Pichia表达量冲到12.5mg/L，比初始提升了220%，虽然离工业化生产还差得远，但那种把实验一步步做成功的感觉真的很好。这让我明白，生物技术这行不是光会PCR就行，蛋白纯化、发酵优化这种活儿，真得靠数据说话，反复试错是家常便饭。

实习最大的收获是心态转变，以前做实验总觉得差不多就行，现在明白每个步骤都要严谨，比如做Ni柱纯化，必须精确控制咪唑浓度梯度，否则蛋白损失大不说，纯度还上不去。看到自己跑的SDSPAGE结果条带又亮又纯，那种成就感比做几十个重复都实在。也体会到团队协作的重要性，蛋白质鉴定那会儿，要是没师兄帮我调好质谱参数，最后结果肯定乱套。

对职业规划来说，这次经历让我更清楚自己想干嘛。虽然最后是做发酵相关的，但接触到的蛋白质工程和结构生物学知识，让我觉得以后要是进药企，肯定得往分子对接或者结构解析方向发展。接下来打算补课学点生物信息学，看看能不能把实验数据用Python分析一下，或者去考个PMP证书，了解下项目管理，以后进公司能更快上手。

看着公司那台QTOF质谱仪，现在网上说蛋白质组学是热门方向，等学校开学，我就要去蹭课学点高分辨质谱技术，顺便关注下抗体药物开发，现在市面上的单抗双抗那么多，要是能参与其中某个环节，感觉特带劲。实习让我明白，生物技术这行永远有新东西学，保持好奇心和动手能力，以后的路应该会好走些。

四、致谢

在这段实习期间，得到了很多帮助。感谢公司提供了实习平台，让我有机会把书本知识用在实际工作里。特别感谢我的导师，从实验设计到操作