TGXAS-肺炎支原体抗体检测 吖啶酯化学发光法编制说明

表1.1精密度验证数据（水平1、2）试验结果质控品水平Level1Level2测试批次第1天第2天第3天第4天第5天第1天第2天第3天第4天第5天第一次测量结果1313.513.613.813.677.777.979.179.278第二次测量结果13.413.713.613.613.676.876.478.278.878.2第三次测量结果13.213.813.813.413.574.675.778.478.777.8批均值：13.2013.6713.6713.6013.5776.3776.6778.5778.9078.00批标准差0.200.150.120.200.061.591.120.470.260.20方差0.040.020.010.040.002.541.260.220.070.04总均值13.54077.700批内方差Vr0.0240.828批内标准差Sr0.1550.910批间标准差Sb0.1951.132批间方差Vb0.0381.282Vr/Vb比值0.6320.646总方差0.0541.834实验室内标准差S10.2321.354实验室变异系数1.7161.743表1.2精密度验证数据（水平3、4）试验结果质控品水平Level3Level4测试批次第1天第2天第3天第4天第5天第1天第2天第3天第4天第5天第一次测量结果9.29.79.59.39.252.453.351.651.350.5第二次测量结果9.79.79.49.29.549.953.350.150.950.9第三次测量结果10.19.99.89.99.850.952.952.151.451批均值：9.679.779.579.479.5051.0753.1751.2751.2050.80批标准差0.450.120.210.380.301.260.231.040.260.26方差0.200.010.040.140.091.580.051.080.070.07总均值9.59351.500批内方差Vr0.0990.572批内标准差Sr0.3140.756批间标准差Sb0.1230.949批间方差Vb0.0150.900Vr/Vb比值6.4820.636总方差0.0811.281实验室内标准差S10.2851.132实验室变异系数2.9672.198结论：肺炎衣原体IgG测定试剂盒（化学发光法）的精密度CV为不大于15，实验水平1样本CV为1.716，水平2样本CV为1.743，水平3样本CV为2.967，水平4样本CV为2.198，符合要求。2.符合率收集不同单位样本：10阴性、10阳性，共20例样本，用亚辉龙发光检测，记录结果。通过符合性或者相关系数R2等统计方法评价结果，符合率≥80%。依据标准为WS/T492-2016《临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》。符合率验证数据见表2。表2符合率验证数据标本号单位1单位2单位3单位4阴阳性结果判断检测结果119.320.77.29.9阴性符合210.117.48.59阴性符合32018.41211.2阴性符合433.427.631.1阴性符合53.93.818.617.2阴性符合613.512.54.33.7阴性符合79.89.52.52.7阴性符合86.56.82.82.50阴性符合911.812.44.44.6阴性符合1010.110.619.319.8阴性符合11115.3129.5234.4216.8阳性符合12140.8139.4242.6228.6阳性符合13154.6149.514.814.7阳性符合14111.199123.6110阳性符合15157.4155.389.784.2阳性符合1690.192.2162.3160.5阳性符合1742.946.4135.1125.3阳性符合1847.448.793.194.5阳性符合19142142.861.965.2阳性符合2075.566.9179.6111.1阳性符合结论：样本符合率均达到100%，符合要求。3.线性范围线性范围上限±20%的高值样本（H），用接近线性范围下限低值样本（L）。将线性范围上限±20%的高值样本（H），用接近线性范围下限低值样本（L）安排不同稀释比例制备出至少5个梯度样本，每份样本重复测定2次，计算出测定均值，与理论浓度按照最小二乘法进行拟合，得出线性回归方程：Y=kX+b，并计算线性相关系数r。线性相关系数应不小于0.9900，k在0.97～1.03范围内。验证依据为CLSIEP6A《定量测量方法的线性评价》。线性范围验证数据见表3，回归曲线见图1。表3线性范围验证数据试验结果稀释系列样本量测定值1测定值2测定值3均值理论值差值H200uL（H）225.4225.7224.9225.33225.33-0.003H:L=4:150（L）+200（H）185.6186.5186.4186.17180.264-5.903H:L=3:2150（L）+100（H）142.5141.5142.8142.27135.198-7.069H:L=2:3100（L）+150（H）95.495.194.294.9090.132-4.768H:L=1:450（L）+200（H）45.644.645.345.1745.066-0.101L200uL（L）3.13.23.33.200.65-2.550图1回归曲线结论：亚辉龙肺炎衣原体IgG测定试剂盒（化学发光法）分析测量范围验证结果为：在3～200AU/mL范围内线性相关系数R2=0.9988，k=0.9944，符合要求。4.参考范围收集20例健康人血清标本及时检测。用亚辉龙发光检测，记录结果。要求样本年龄，性别等均匀分布，对参考范围进行验证，只允许5%的数据超过所验证的参考范围。验证依据为《CNAS-GL037：2019临床化学定量检验程序性能验证指南》。参考范围验证数据见表4。表4参考范围验证数据序号结果（AU/ML）符合状态143.4不符合263.8不符合3<3.0符合4135.2不符合531.8不符合678.3不符合7354不符合8154.5不符合961.9不符合1021.9符合11115.9不符合1221.6符合1372.7不符合1467.4不符合15128不符合16<3.0符合17172.5不符合1825.2不符合1915.2符合2039.6不符合参考区间0-25超限样本15符合率25%结论：大众人群间阳性率大致为70%，该结果符合。（八）肺炎支原体IgG验证总结综合上述精密度、符合率、线性范围、参考范围，得到验证汇总结果见表5。表5验证汇总结果验证指标标准验证结果结论精密度CV%≤15%水平1样品（CV%）为1.716%水平2样品（CV%）为1.743%水平3样品（CV%）为2.967%水平4样品（CV%）为2.198%符合标准要求符合率总符合性≧80%总符合性=100%符合标准要求线性范围r≥0.9900，k在0.97～1.03范围内在2～300AU/mL范围内线性相关系数，R2=0.9988，k=0.9944符合标准要求参考范围总符合性≧80%符合率25%符合标准要求（八）肺炎支原体IgM试验验证过程1.精密度使用低高2个浓度样本（阴阳性区分）。连续测定5天，每天一个分析批，每批2个浓度水平，每一个浓度水平同一样品重复测定3次，计算其CV值。（要求为CV≦15%，实验室标准差小于验证值）。依据标准WS/T492-2016《临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》开展验证。精密度验证数据见表6。表6.1精密度验证数据（水平1、2）试验结果质控品水平Level1Level2测试批次第1天第2天第3天第4天第5天第1天第2天第3天第4天第5天第一次测量结果0.720.720.70.70.716.516.566.56.526.6第二次测量结果0.70.70.680.710.716.56.556.566.486.5第三次测量结果0.720.730.70.720.726.486.516.566.556.5批均值：0.710.720.690.710.716.506.546.546.526.53批标准差0.010.020.010.010.010.020.030.030.040.06方差0.000.000.000.000.000.000.000.000.000.00总均值0.7096.525批内方差Vr0.0000.001批内标准差Sr0.0110.037批间标准差Sb0.0090.019批间方差Vb0.0000.000Vr/Vb比值1.4813.853总方差0.0000.001实验室内标准差S10.0130.035实验室变异系数1.8380.540表6.2精密度验证数据（水平3、4）试验结果质控品水平Level3Level4测试批次第1天第2天第3天第4天第5天第1天第2天第3天第4天第5天第一次测量结果0.50.510.520.540.532.983.033.073.053.1第二次测量结果0.50.530.490.540.533.0533.053.123.15第三次测量结果0.490.50.480.530.522.973.033.093.153.15批均值：0.500.510.500.540.533.003.023.073.113.13批标准差0.010.020.020.010.010.040.020.020.050.03方差0.000.000.000.000.000.000.000.000.000.00总均值0.5143.066批内方差Vr0.0000.001批内标准差Sr0.0120.035批间标准差Sb0.0180.056批间方差Vb0.0000.003Vr/Vb比值0.4810.383总方差0.0000.004实验室内标准差S10.0210.063实验室变异系数3.9922.057结论：肺炎衣原体IgG测定试剂盒（化学发光法）的精密度CV为不大于15，实验水平1样本CV为1.838，水平2样本CV为0.54，水平3样本CV为3.992，水平4样本CV为2.057，符合要求。2.符合率收集不同单位样本：10阴性、10阳性，共20例样本，用亚辉龙发光检测，记录结果。通过符合性或者相关系数R2等统计方法评价结果，符合率≥80%。依据标准为WS/T492-2016《临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》。符合率验证数据见表7。表7符合率验证数据标本号单位1单位2单位3单位4阴阳性结果判断检测结果10.070.060.120.1阴性符合20.060.030.240.22阴性符合30.250.190.550.6阴性符合40.050.030.540.54阴性符合50.240.180.410.43阴性符合60.060.040.740.78阴性符合70.250.220.20.19阴性符合80.240.230.080.07阴性符合90.050.040.530.57阴性符合100.040.030.320.36阴性符合111.161.231.081.34阳性符合121.081.072.923.78阳性符合133.143.21.571.84阳性符合141.381.441.992.33阳性符合152.011.994.325.35阳性符合161.271.372.983.58阳性符合172.062.171.351.57阳性符合182.182.311.391.56阳性符合191.771.883.33.16阳性符合202.382.591.631.34阳性符合结论：样本符合率均达到100%，符合要求。3.参考范围收集20例健康人血清标本及时检测。用亚辉龙发光检测，记录结果。要求样本年龄，性别等均匀分布，对参考范围进行验证，只允许5%的数据超过所验证的参考范围。验证依据为《CNAS-GL037：2019临床化学定量检验程序性能验证指南》。参考范围验证数据见表8。表8参考范围验证数据序号结果（AU/ML）符合状态10.11符合20.33符合30.3符合41.18不符合50.2符合60.14符合70.23符合80.21符合90.33符合100.86符合110.09符合120.06符合130.47符合140.16符合150.18符合160.1符合170.06符合180.3符合190.85符合200.07符合参考区间0-1超限样本1符合率95%结论：亚辉龙肺炎衣原体IgM测定试剂盒（化学发光法）声明的参考区间符合要求。（九）肺炎支原体IgM验证总结综合上述精密度、符合率、参考范围，得到验证汇总结果见表9。表9验证汇总结果验证指标标准验证结果结论精密度CV%≤15%水平1样品（CV%）为1.838%水平2样品（CV%）为0.54%水平3样品（CV%）为3.992%水平4样品（CV%）为2.057%符合标准要求符合率总符合性≧80%总符合性=100%符合标准要求参考范围总符合性≧80%符合率95%符合标准要求。六、重大意