上中大中医实验学教案

上海中医药大学《实验中医学》教案（1）课程名称实验中医学（理论部分） 总学时数36专业中医基础和中医临床专业 授课教师方肇勤内容绪论时数2本次课目的要求1．掌握实验中医学的学科性质和主要内容。2．掌握学习实验中医学的注意事项。3．了解实验中医学的发展史。本次课的重点难点1．实验中医学的性质，内容，任务。2．从实验中医学的发展简史能得到什么启发。3．各注意事项的目的与意义。本次课的应用教具多媒体设备。第一章绪论（2学时）欢迎辞。开课的背景：实验中医学发展状况和人才结构的改变及需求。开课后反映：开课后政府及有关高校的支持和响应。本课程的沿革：中医基础实验、实验中医学讲义、实验中医学教材、课程的分化，包括获奖情况。两点想法：1．积极思考和讨论。中医才入门，或学习了多年，会有许多体会和想法，谈出来，互相切磋。2．希望多阅读。实验中医学不是一本书可以概括得了的。第一节实验中医学的性质、内容、任务一．性质定义：实验中医学是用科学实验的方法研究和发展中医学的一门科学。此定义涉及的4个层次：1．实验的定义实验是指科学上为阐明某一现象而创造特定的条件，以便观察它的变化和结果的过程。这是因为自然状态下，影响到所观察对象，如人、实验动物的因素太多，不创造特定的条件，所观察的变化可能由一些其他因素所引起。比如肥胖，有遗传、运动、睡眠、饮食、工作、情绪、社会环境等许多因素引起，不把条件限制，就不能确定肥胖的成因，也难以观察不同治疗或预防方法的区别。2．中医学的定义1）首先是传统医学。世界卫生组织曾对传统医学作过如下定义：“不论是否能解释，它是用于诊断、预防和消除身心和社会失衡的全部知识和实践的总结。它主要是依靠世代相传的实践经验和观察的结果，这些经验和结果不论是口头流传的或是文字记载的。”（1976年）“它是在现代医学传播和发展以前就已存在几百年的医疗实践的总结，而且至今还在应用。这些实践由于各国的社会传统和文化不同而存在很大差异。”（1996年）2）传统医学现代化的过渡期。这点十分重要，但一直被忽略。新中国成立以来，在党和政府的引导支持下，传统的中医学焕发出生机，迅速发展、壮大，其标志之一便是实验中医学的中兴，实现了与现代医学的接轨，并不断缩小两者间的差距，使古老的中医学注入了现代科学的新生命。结论：1）当代中医学已不仅仅是传统医学。2）当代中医学所处的环境与以往有很大的不同，包括日益强大西医的竞争、疾病谱的改变、科技文化的发展、社会的变迁、国力和中医药从业人才的改变，等等，与以往发生了巨大的变化，时代提出了新的要求，创造和提供了新的环境、条件，包括人才。这样的现状和趋势不能视而不见、置若罔闻。3．实验中医学与实验针灸学、中药药理学的区别。这两门学科是实验中医学分化得最早的学科。实验针灸学主要研究经络及其传感的本质，针灸、推拿以及建立在经络理论基础之上的不同诊疗方法的本质和规律。中药药理学研究单味中药和复方的药理，与实验中医学中普遍运用复方的区别在于两者的着眼点或目的不同：中药药理学的着眼点在药，研究药的作用机制和开发新药，而实验中医学则以药为干预因素，通过药的干预，来探究有关生理、病理、治则、治法、预防、养生等等。4．什么叫研究和发展中医学。通过几十年的探索，形成了比较一致的认识，即实验中医学以中医学为研究对象，以现代科学技术方法为主要研究手段，用以挖掘、解释并丰富中医学伟大宝库，加速中医学的现代化。其基础包括传统中医、现代中医、现代西医；要求顺应社会和中医药学自身发展的规律；要提高中医药的竞争力。比如治疗上是最安全的、最有效的、最方便的、最廉价的，以及有特色的。二．内容注意，这里所讲的内容是讲义上的，实际内容要丰富得多。目前发展出许多新技术、新方法，新理论，这我们这本教材中显然容纳不了，因此要求大家多参考其他参考书。实验中医学的内容主要包括四个部分，要求大家看书：1．实验中医学的基本方法。2．不同实验对象的研究方法。3．当前实验中医学研究所应用的主要学科及其主要实验研究方法的现状和典型范例。4．实验指导。那么为什么这样安排？有以下一些想法：1．基本方法包括两个方面：中医学所特有的，以及一般医学共有的。读书上的内容。其中，中医的内容十分重要，关系到学科生存的前提。学科的特征和社会的分工。目前突出的问题是，一旦采用现代方法研究，往往把中医给忘了，或者加一点中医的话来点缀。这样的研究，于中医药何益？一些研究连中医的内容都没有搞清楚，研究什么？所以这是前提。而历来成为我们教学的薄弱环节，学生中医学学习得不扎实。2．不同实验对象实验对象不同，往往方法也会有相应的改变。1）人。有了几千年的记录。大家接受，没有问题。2）实验动物。基本为中医界所接受。夜有不同意见。大家的观点如何？课堂提问，讨论。包括证的动物模型，了解多少，利与弊？中医药能不能用动物研究，动物研究是不是唯一手段。以肿瘤为例：大复方有效，拆方有效，单味药有效，到：单味药的有效部位、有效成分有效，再到：不同组合以及不同组合成分之间的配伍。要求不断研究下去。问题是：人观察不便，许多实验不能做，费用大，不能用作模型，研究观察周期长。动物要方便得多。可以一一展开，也可以考虑安排在实验动物一章中介绍。3）细胞。许多人还不接受。我们以后讨论。3．主要手段基本研究思路和概念有了，实验研究对象了解了，接下来是考虑采用什么方法、技术观察研究。本节介绍了一些目前常用的方法。要求大家复习这些技术，如果以前没有接触过这些技术，则建议参考有关技术专著。重点放在如何在中医药研究中的应用。4．实验指导本章节内容有所转变。其理由主要有（1）学校这两年技能培训型实验大量开设出来，许多实验技术与本教学内容重复，这样造成了教学资源的浪费。（2）涉及的实验技术面广、难度大、教学成本高。因此，综合考虑下来，我们把该部分调整，不再讲授和实验操作，部分内容拍摄成教学录象，供学生观摩。实验操作部分改上“中医学综合实验”。三．任务实验中医学的任务是验证和发展中医学。1．验证中医学。中医学对生命的认识、对生理病理的认识、对不同的诊疗手段、养生方法的论述等是不是符合实际，是不是有效，需要给予验证，阐释其机制。例如，历代对某一疾病的防治积累了丰富的资料，有不同的治则、治法，不同的单方、验方，不同的剂型、剂量等，哪些是有效的，哪些效果要优越些，不同方法的适应证有何不同，有没有地域、季节差异等等，只有通过反复的实验才能给予验证，并解释其原理。迄今为止，实验中医学的工作主要集中在这一领域。2．发展中医学。在中医学丰富的文献资料中记载着大量的观察到的现象、假说，有同有异，有详有略，这类现象、假说有待实验给予验证、发展、完善，推陈致新。这就是通常意义上说的整理和发掘祖国医学宝库。青蒿素的发明便是一个典型的范例。通过实验发展中医学还表现在通过实验去发现新的现象，提出新的问题、新的假说，进行新的发展。在实验中医学蓬勃发展的今天，许许多多的研究已经有了丰富的积累，逐步向着生命科学的纵深发展，不少项目已经接触到生命科学的前沿，继续下去，势必将揭示和阐释新的生命现象，从丰富中医学。据统计，现代技术革命的成果约有90%来自基础研究，现代医学近50年的医学成就亦来自基础医学的发展，中医学的发展亦不能例外，而且这一发展势头已十分明朗。中医学的发展也愈来愈依靠实验中医学的发展，而发展中医学已成为实验中医学首要的使命。第二节实验中医学发展简史本节要求自学。讲教训：1）在西方科学革命以来，我国国力弱，整体科技水平落后。2）学术封闭、厚古薄今。3）夜郎自大。井底之蛙。4）轻视实验研究。5）学术浮夸，急功近利。坐而论道。第三节学习实验中医学的注意事项抓住4条：1．首先要学好实验中医学，要有扎实的中医基础理论功底这是实验中医学的出发点、基础，中医基础理论学得不扎实，掌握不好，连研究的对象、特点和出发点都把握不住，实验便无从谈起，也不难想象这样的实验会得出什么样的结论，会有什么样的意义。课堂提问：李东垣的“阴火”是什么？（作为课后作业。建议查阅《内外伤辩惑论》，下一次课堂讨论）胃气是什么？胃气与舌苔、胃气与脉象、胃气与面色，这些胃气是什么？没有搞懂，贸然研究，费时费力费钱，不可取。因此要求多读历代原著。光看教材不行。对具体有兴趣的领域，可以集中进行古典文献研究。2．要认识到实验的局限性和相对性1）每一个或一组具体的实验都有其特殊的目的，是为这个目的而设计的，因而就不免有其局限性；2）方法本身的缺陷；3）各实验环节的可靠性、稳定性，以及掌握方法不好；4）研究者自身的学识，对实验的结果数据处理、分析的不尽完善，往往会扩大其实验的局限性。3．在学习本教材时要注意运用“再发现”的学习方法用心体验，用心读书，批判性阅读：不同实验中医学实验过程的机会，去切身体验整个过程，以培养读者独立开展研究的能力。在阅读本教材或课堂听讲时，希望考虑以下几个问题，即问题是如何提出的；如何在设计前开展调研；某一实验方法的来龙去脉；会遇到哪些问题、困难；哪些知识可以借鉴；哪些方法、技术可供借用；如何对实验数据去分析、论证；要注意哪些问题；存在哪些问题；进一步研究的方向、思路是什么；如果是你，将如何去做，等等。总之，要求读者进入角色，去参与每一个实验的整个过程，不断的思索、探究，以有效地培养独立开展实验中医学研究的能力。4．增加阅读面，充分利用现代信息技术如何尽快地、尽可能周全地获得某一领域的最新知识，如何高效地获得相关学科的方法技术，获取有关信息，已成为实验能否预期成功和能否获得成果的重要因素。

上海中医药大学《实验中医学》教案（2）课程名称实验中医学（理论部分） 总学时数36专业中医基础和中医临床专业 授课教师方肇勤内容中医实验研究的思路和规律（一）时数4本次课目的要求1．掌握中医古典文献收集的原则和方法。2．掌握中医实验研究的思路（包括实验研究的选题，设计与分析总结；临床实验研究；动物实验研究和离体实验研究）。3．掌握中医实验研究的目的与意义。4．了解中医古典的特点，常用的中医古籍书目，中医古典文献的整理方法。本次课的重点难点中医古典文献的收集，整理及其在实验研究中的应用1．中医古典文献在实验研究中的重要性。2．中医古典文献的特点。3．中医古典文献的收集。4．中医古典文献的整理与研究。中医实验研究的思路1．中医实验研究的目的与意义。2．中医实验研究的发展。3．中医实验研究的思路。本次课的应用教具多媒体设备。第一节中医古典文献的收集、整理及其在实验研究中的应用（2学时）课堂讨论：“阴火”是什么。要求大家发言。为什么要学习本章节？对中医古典文献及其有关理论把握不准是目前中医研究中普遍存在的问题。2.1.1中医古典文献在实验研究中的重要性1．为实验研究提供丰富的素材中医古典文献是古人直接医疗实践经验的记录，是古代众多的医药工作者长期努力、不懈探索积累起来的丰富的知识宝库。中医古典文献中蕴藏着大量可供实验研究的素材。这是中医学的优势之一。这样的成功例子如青蒿素、砒霜防治白血病。这涉及到如何继承宝库的问题。继承宝库不能停留在口头上。2．为实验研究提供理论指导中医药有数千年悠久的历史，形成了独特的理论体系。中医在临床上能取得良好的疗效，离不开中医理论的指导。这里涉及到一个问题，即什么叫“自身理论指导下的研究”。本质是如何吸取中医理论的精华，如何吸取其方法论，并且应用到研究中去。例如整体观、恒动观在GnRH基因表达研究中的意义。例如基于肾精亏虚的二仙汤治疗更年期高血压病（单纯狗动脉结扎性高血压无效）。例如冠心滴丸在美国辨证用药前后的疗效差异。2.1.2中医古典文献的特点1．历史悠久，源远流长中医古典文献跨越了2500年的历史，蕴藏着深刻的哲理和丰富的知识。不同的历史时期又派生出各个学术流派，百家争鸣使得中医理论和医术不断地丰富和发展。2．言简意赅，蕴义精深古代文献受记录载体及记录手段的限制，受到当时语言、文化的影响，具有文字古奥、言简意赅、蕴义精深的特点。学习时需要积累厚实的古汉语基础、古代科技、文化的知识。古籍中提到的人名、地名、病名、药名，经历史演变与现代名称互有出入，需借助有关参考工具书来确定。3．数量庞大，文献分散中医古籍数量庞大。古代的目录体系不像现代目录体系那样精细明确，中医古籍书目除收录在子部医家类之外，还散见于经部、史部、子部、集部的其他各类中。有些笔记杂录、稗官野史、地方志中也有医著记载，非常分散。历史上中医古籍流传很广，朝鲜、日本、东南亚及世界许多国家都有收藏，一些古籍在国内失传了，尚可在国外找到原本或传本。因此，作为研究其文献检索的面是十分广泛的。要放开眼界。4．瑕瑜互见，良莠相杂受时代局限性的影响，往往掺杂有封建迷信和违反科学的糟粕，但是，不要轻率地给予否定。2.1.3中医古典文献的收集1．中医古典文献收集的原则（1）学术性。搜集具有科学价值、在科研生产中能起作用的文献。有一个收集者学术水平，对文献学术水平的判断问题。（2）针对性。收集文献要有的放矢。对于研究中医药文献的具体专题要进行深入了解。要针对中医药学的特点和专题研究的具体需要，确定收集的范围和重点。问题是如何实现针对性。（3）系统性。要求按学科、专业书刊、资料内在的历史连贯性去搜集，以反映它们发展演变的脉络；在收集时应保持连贯和完整，不能时断时续，支离破碎。系统性的相对性。（4）科学性。运用先进技术，达到快、全、正。（5）全面性。收集时要多渠道、多形式、全方位开展，尽可能搜集与本研究专题有关的多方面资料，包括正面与反面资料，以及相关学科的资料。收集资料忌带主观性和片面性。收集者的“观点”应该从对文献资料的研究或实践体会中得出，不是先定下某一观点，然后按此观点去取舍资料，这样必然会拼屏与自己观点不符合的文献资料而带有片面性。2．中医古典文献的收集方法首先是计算机检索。可以利用中医古籍专业数据库、不同单位的医学数据库，甚至是那些点击率高的不同数据库。其次是传统的方法，包括计算机检索后进一步地阅读。（1）常用的中医古籍书目《四库全书总目·子部医家类》、《中国医籍考》、《宋以前医籍考》、《中国分省医籍考》、《四部总录医药编》、《中国医籍提要》、《中国针灸荟萃》、《历代中药文献精华》。以上书籍中，《宋以前医籍考》和《中国分省医籍考》主要用于查找古籍的源流，《四部总录医药编》、《中国医籍提要》和《四库全书总目·子部医家类》等主要用于查阅现存古医籍。常用的还有：《医藏书目》、《医学读书志》、《中国医学大成总目提要》、《中国医学书目》、《续中国医学书目》、《现存本草书录》、《三百种医籍录》、《中医学重要著作选价》、《中医外科医籍存佚考》、《中国传统老年医学文献精华》、《针灸文献提要》、《经典医籍版本考》、《中国医籍通考》等。怎么用，到图书馆询问有关管理人员最有效。（2）中医图书馆藏情况检索主要有《中医图书联合目录》、《上海中医学院中医图书馆藏目录》、《中国中医研究院图书馆馆藏中医线装书目》。这类工具书最实用。因为这些书籍中所收载的书籍，该图书馆必有藏书，可以直接查阅。（3）中医古文献其它检索途径1）辞典。如《中国医学大辞典》、《中国药学大辞典》、《中药大辞典》、《方剂大辞典》、《中华药海》等。2）类书。类书是辑录或摘抄多种医学文献，并加以分类汇编的著作。如《黄帝内经》、《千金要方》、《外台秘要》、《太平圣惠方》、《圣济总录》、《证类本草》、《幼幼新书》、《普济方》、《古今医统大全》、《本草纲目》、《古今图书集成·医部全录》等。3）丛书。丛书，一般是指将若干种书籍汇集而编成一套书。如《儒门事新》、《卫生宝鉴》、《济生拔萃》、《东垣十书》、《河间全书》、《薛氏医案二十四种》、《古今医统大全》、《喻氏医书三种》、《张氏医通》、《医宗金鉴》、《东医宝鉴》等。4）专题资料汇编。按专题辑录资料，按现代的观点方法编排资料，称为资料汇编。如《中国历代医论选》、《中国医药汇海》、《常见病证中医文献专辑》（《哮喘专辑》、《肿胀专辑》、《黄疸专辑》、《中风专辑》、《疟疾专辑》、《惊悸怔忡专辑》、《虚损专辑》、《痹痿专辑》、《胃脘痛专辑》、《癫狂痫专辑》、《失眠嗜卧专辑》）、《历代中药炮制资料辑要》等。5）医书附见书目。一些卷帙较大的医书，如方书、全书、类书等，往往附有参考引用书目，这种书目称为医书附见书目，也起到中医专科书目的作用。如《本草纲目》。6）医史著作。7）集注。集注，就是将历代医家对某一古典医籍的条文、段落的论述汇集成书，有些集注还纂述诸家、综合究竟、阐述已见、心殚厘定、辨疑正误。如张志聪的《素问集注》等。（4）专题性的电脑检索系统北京、中国中医研究院、天津、辽宁、陕西、上海、江苏、湖北等均建立了不同的计算机数据库，可以向所在专业图书馆了解具体使用方法。2.1.4中医古典文献的整理与研究收集文献不能停留在堆砌资料的初级阶段。必须对资料进行整理、研究、运用。比较常见的问题是资料的使用率、再利用率。常见的问题是，尤其是研究生、青年教师，为了某个专题收集了大量的资料。以后兴趣转移，或工作要求转移，这些资料便束之高阁，成为死的资料。那么，当初大量的复印、文摘的必要如何？相反的事例是北京已经故世的中医泰斗任应秋先生，他把古代文献摘录成文摘卡，分类存放，反复使用。作为专门从事中医古典文献研究，他这样做是非常成功的。以下介绍的方法，作为个人、学科，目前建议充分利用计算机、计算机数据库，这样可以提高资料的使用率。1．文献整理的方法（1）图书馆分类整理法。引用《中国图书资料分类法》分类法整理归类资料。（2）主题整理法。将文献按主题词或关键词的内容整理归类。2．文献研究的主要方法（1）综合归纳分析法。这是文献研究中最常用、最基本的方法，是对相关中医文献的观点、学说、经验等进行归纳、综合、分析，从而找出规律、要点与本质。在这样的研究过程中，形式逻辑十分重要。敏锐地对某一内容、学术观点进行提取、归类十分重要。常见的问题是视而不见，缺少量化观念和处理，遗漏大量具有价值的信息。（2）文献研究法。通过对一批相关文献的分析、综合与推理，得出有关结论。例如通过文献之间引用与被引用的关系，来评价文献的质量。中医古典文献研究还有其他的方法，如比较法、枚举法、否定法等。但是一次文献研究往往需要综合运用多种方法才能获得准确与合理的结论。通过对文献的分析、判断、综合、归纳等研究，最后我们就能提出有观点、有建议、有事实、有措施、有价值的研究报告，就能发现值得进一步深入研究或开发的素材，就能够指导我们的科研工作。中医古典文献蕴藏着大量的前人从各方面总结出来的经验和理论，不仅一直指导着广大中医的医疗实践，就从当前医学科学的发展来看，其中有相当一部分宝藏，有进一步发掘的必要。任何科学的成就是一点一滴地积累起来的，只有通过长期的积累，把中医最基本的理论、知识系统地继承下来，才能具备收集、整理、研究、发掘中医学理论和文献的能力。在科学研究过程中，积累文献资料是一个很重要的环节，资料积累得越全面、越丰富、越深入，研究计划就制定得愈具体，研究工作就可能进行得愈顺利，收获就愈多。2.1.5中医古典文献的收集、整理及其在实验研究中应用的范例请自修。2.1.6附录1．古代中医主要参考书这里有一些书目，我们推荐一些历代具有代表性的著作，建议大家课外阅读。我自己的经验是，中医许多教材，由于受到篇幅的限制、受到作者水准的限制，难以充分反映中医理论与方法的博大精深、难以反映其丰富的学术流派和不同的学术观点和方法、难以反映其主流学术的演变，甚至有些学术观点是错误的。因此，中医药教材必然有一个不断完善和发展的工程，而作为个人，广泛涉猎历代具有代表性的文献就很重要。教材上列出了许多，我们选择一些，请大家记录（我们按教材上的次序）：（1）内科。《伤寒论》、《金匮要略》（东汉）、《中藏经》（汉）、《脾胃论》、《内外伤辨惑论》（金）、《丹溪心法》（元）、《杂病证治准绳》、《医宗必读》、《温疫论》（明）、《杂病源流犀烛》、《温热论》、《温病条辨》（清）。《理虚无鉴》（明）。（2）妇产科。《妇人大全良方》（宋）、《傅青主女科》（清）。（3）儿科。《小儿药证直诀》（宋）、《幼幼集成》（清）。（4）外科。《刘涓子鬼遗方》（晋）、《外科正宗》（明）。（5）骨伤科。（6）五官口腔科。（7）综合性医著。《三因极一病证方论》（宋）、《医学启源》、《兰室秘藏》（金）、《卫生宝鉴》（元）、《医学正传》、《韩氏医通》、《明医杂著》、《景岳全书》、《赤水玄珠》（明）、《辨证录》、《张氏医通》、《医学心悟》、《兰台轨范》、《类证治裁》（清）。（8）医案、医话。《名医类案》（明）、《续名医类案》、《寓意草》、《临证指南医案》、《古今医案按》、《柳选四家医案》（清）。（9）本草。《神农本草经》（魏）、《本草纲目》（明）。（10）方剂。《肘后急备方》（晋）、《备急千金要方》（唐、《外台秘要》）、《太平圣惠方》、《太平惠民和剂局方》、《圣济总录》、《普济本事方》（宋）、《世医得效方》（元）、《普济方》、《奇效良方》（明）。（11）针炙。《黄帝内经》、《难经》（春秋战国）、《针炙甲乙经》（西晋）、《针炙大成》（明）。2．中医古典文献、理论的积累中医古典文献、理论积累的方法多种多样，但主要是通过阅读与笔记摘要。（1）阅读（2）笔记与摘要1）笔记：笔记一般分成阅读笔记和心得笔记两大类。2）摘要：概要性摘要、引语式摘要、节录式摘要、综合性摘要。

上海中医药大学《实验中医学》教案（2）课程名称实验中医学（理论部分） 总学时数36专业中医基础和中医临床专业 授课教师方肇勤内容中医实验研究的思路和规律（一）时数4本次课目的要求1．掌握中医古典文献收集的原则和方法。2．掌握中医实验研究的思路（包括实验研究的选题，设计与分析总结；临床实验研究；动物实验研究和离体实验研究）。3．掌握中医实验研究的目的与意义。4．了解中医古典的特点，常用的中医古籍书目，中医古典文献的整理方法。本次课的重点难点中医古典文献的收集，整理及其在实验研究中的应用1．中医古典文献在实验研究中的重要性。2．中医古典文献的特点。3．中医古典文献的收集。4．中医古典文献的整理与研究。中医实验研究的思路1．中医实验研究的目的与意义。2．中医实验研究的发展。3．中医实验研究的思路。本次课的应用教具多媒体设备。第二节中医实验研究的思路（2学时）本节撰写者：赵伟康教授，资深中西医结合研究专家，我校终生教授。长期从事中西医结合基础研究，作为我校和全国中医界的专家，经常参加国家到地方中医药科研项目的评审、评奖、检查，因而对全国中医实验研究发展的历程、进展、存在的问题、发展趋势等有比较全面地把握。本节特点：深入浅出，高屋建瓴，是一篇值得反复研读的文章。2.2.1中医实验研究的目的与意义该节讲了这样一些问题：首先，第一自然段，讲定义，讲目的。定义与绪论中的异同介绍，包括具体。目的包括：（1）阐明中医基本理论、证的本质、复方药理；（2）促进和提高辨证论治水平和中医临床疗效；（3）实现中医现代化，发展中医和人类保健事业。如何理解。其次，第二~六自然段，介绍实验，及其在中医研究中应用的必要性。（1）介绍了为什么中医要引入实验方法（弥补临床观察、直觉领悟之不足等等）。思考：是否因为“中医的生命在临床”，便可以不开展实验研究？（讨论）（2）与当代西医相比，中医学的特点，以及发展趋势。方法是：根据中医药的特点把生命科学研究方法与技术引入中医药领域。中西医必须沟通，中医要现代化。中医药的实验研究是实现这一目标的重要措施。目的是传统医学和现代科学融合、渗透、取长补短。发展自身，且充实和深化西医。（3）进一步解释了中西医的共性和个性，全面地看问题、分析问题。注意，有一种倾向，把古代的中医与当代的西医比，把古代的中医与当代的中医比。这样是否合理？（讨论）再次，最后自然段讲了中医目前的优势，以及实验研究的切入点和方向。关于“生物—心理—社会”医学模式与中医的优势问题（讨论）。关于综合—分析—综合的方法问题（讨论）。关于研究的切入点选择的依据、方法、目的（讨论）。2.2.2中医实验研究的发展该节简要介绍了中医实验研究若干事例：《灵枢》关于解剖的记载。《难经》对五脏的形状，重量，容积，长度的详细描述。唐代陈藏器《本草拾遗》赤铜屑治疗折疡，焊骨的六畜实验描述。宋《证类本草》白米饲养马和犬引起脚气病。还有那些古代实验记录？同时代的西医在干什么？课后请大家上网和借阅不同版本的中医和西医医学史。1923年陈克恢等在中药药理研究中采用动物实验研究麻黄和当归。五十年代开始的针灸经络研究。六十年代开始的中医证候动物模型研究，上海邝安坤1963阳虚小鼠证候模型。七十年代后期证候动物模型迅速发展。还有那些代表性的实验研究？2.2.3中医实验研究的思路本节的论述重点放在思路，与后面比较具体的介绍要求不一样。所以，在学习上，要求也不一样。可能的话，以后可以反复看几遍。2.2.3.1实验研究的选题、设计与分析总结1．选题“选题应结合社会需要，瞄准国际前沿，充分发挥中医优势，突出创新”。这点很重要。社会需要什么，国际前沿在哪，中医优势是什么？如何了解？（讨论）如何创新？围绕衰老和延缓衰老讨论。目前国际上：限制饮食、激素（性激素、生长激素等）替代疗法、专业人员指导下的锻炼，等等。优点和缺点。中医药的情况。教材上举例：（1）临床选择西医办法较少，而中医办法、疗效较好的常见病；以及重视继承发掘老中医的临床经验。（2）基础找一些与现代医学提法不同的，而中医临床行之有效的，具有创新性和发展前景的课题进行研究，同时要根据国内外研究现状和本单位的中医优势和条件从中寻找突破口。（3）从病证结合以病带证或以证带病着手进行中医证和病机的研究是一个重要的突破口。（4）有的专家认为藏象容易取得成就。（5）复方研究。（6）中医体质学说。以上1~3讲方向；4~6讲具体内容。反映了目前中医学术界的一些共识、方向、热点。2．实验设计第1自然段提到了：工作假设；遵循“重复、对照、随机”等基本科研规律；密切结合中医理论和临床特点等3个方面。第2~3自然段讲临床实验设计：病证结合方式，中西医诊断和辨证标准，合理的对照（包括同病无证者、同病同证者、药物验证组等）。为什么？第4自然段讲实验设计与结果分析要合理、客观、中肯。第5自然段讲中医实验研究是传统医学和当代高新科技相结合的过程。要突“拿来主义”，吸收一切先进理论和科技手段。尤其是西医学。以下两个自然段举例说明。最后，提到了实验观察指标要具有代表性、先进性和可行性。各指标间要有内在联系。并举例。3．实验结果的分析与总结主要介绍：实验设计合理；实验条件、误差控制；实验数据统计处理；整理、判断和推理；参考国内外动态。因之严格而周密的科研设计，可靠的实验方法和正确的数据统计是获得正确分析结果的基本保证。并举例。2.2.3.2临床实验研究定义：临床实验研究以病人为研究对象，通过严格的科研设计，控制条件，对志愿者进行无损伤性实验室测试，并对其出现的现象进行观察、记录和分析，作出推断或结论。局限：难以开展深层次的机理研究。但是在临床疗效评估和理论验证方面，临床实验是不可缺少的阶段。重要性：细致的临床观察是中医传统特色，目前还不能为其他方法所取代。对基础实验研究的贡献和举例。（内容精彩）2.2.3.3动物实验研究定义：动物实验是用动物来进行生命科学的实验研究。意义：可以开展损伤性检查，是医学、生命科学研究不可缺少的手段。限制：动物没有主诉、动物辨证困难。重点介绍动物模型：1．以中医病因病机为依据复制动物模型（1）根据病因造成的病理模型。这种方法的指导思想是，虽然证的现代病理生理变化尚不清楚，但可以假定施以同种病因会引起同样或类似的病理改变。包括六淫的动物模型、七情的动物模型。（2）根据中医病机造成的模型。各种致病因素作用于人体所引起的疾病发生发展与变化的机理称病机。以中医病机为依据可造成气虚、血虚、脾虚、血瘀等动物模型。2．根据病证结合，有病必有证，选择某些西医病理模型作为中医证的模型3．根据证的现代病生机理复制病理模型。如微循环障碍是血瘀病理变化的重要标志，故采用高分子右旋糖酐致外周微循环和脑微环障碍的方法复制高分子右旋糖酐家兔血瘀模型。又如临床肾阳虚患者有尿17-OHCS排量降低，下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能紊乱的现象。用外源性氢化考的松复制“阳虚”大鼠模型。动物后期可出现一系列耗竭现象，外观有类似肾阳虚证候的临床表现和病理改变，用助阳药治疗后明显改善。近年来又用皮质酮造成大鼠“肾阳虚”模型，观察到补肾药右归饮可使下丘脑室旁核肾上腺皮质激素释放激素（CRH）神经元与正中隆起CRH神经纤维明显增加；右归饮主药附子的主要成分乌头碱可使CRHmRNA表达增加，CRH含量明显升高。提示肾阳虚证的主要调节点定位在下丘脑，而补肾药可直接作用于下丘脑。此外，根据体质学说，匡调元教授从正常大鼠经掌温测量筛选出自然状态下的大鼠“常体”、“寒体”、“热体”模型。发现热体大鼠肝细胞能荷值和Na+-K+-ATP酶活性、血清T3、T4、睾酮、孕酮含量最高，寒体大鼠最低，常体大鼠居中。这对进一步开展体质学说的实验研究具有重要意义。八十年代起日本一些学者从遗传学角度复制证的模型。木村正康曾将糖尿病模型的传代鼠中低乙酰胆碱（Ach）反应类型与高反应类型同类自行交配，不断传至第14代，两种模型分化明显，其中高Ach反应型鼠为“虚寒”型，低Ach反应型鼠为“虚热”型。分别用附子及生地后，可使Ach反应得到改善。可惜未能得到遗传学的认可，因动物需传代到二十几代才有意义。但为病证结合，同病异证模型的研制方法开阔了思路。获田善一根据中医“药证”的思路，应用遗传工程技术研制转基因证的模型，已培育了八味地黄丸，黄连解毒汤及灵芝等证的模型小鼠，并进行了遗传药理学研究，对小鼠颔下腺（雄激素和甲状腺激素的靶器官）激素调节系统进行了分子生物学测定。可见国外已开始探索用现代生物技术复制证的动物模型。值得我们借鉴和引起重视。综上所述，目前中医动物实验主要从中医病因病机临床证候表现和证的现代病生机理入手复制动物模型，然后用代表方进行治疗，以确认造模是否成功，并应用该模型进行中医理论及药物作用机理等研究。理想的动物模型应该具有同模拟对象相同的临床表现和病理变化；并为相应的代表方药所逆转。但由于目前大多数证的病生机理还不十分明确，因此一时还难以达到理想要求，不能苛求。在生命现象上，动物与人有共性的一面，因此可以彼此借鉴。但动物毕竟不是人，因此其结果有些不一定与临床一致。由于中医重宏观，重整体，因此进行动物实验研究最好能采用多学科、多途径、多层次、多环节、多指标同步测试，这样取得的结果比较容易回归到整体，以弥补微观与宏观之间“脱节”、“断层”现象。八十年代我校曾用组织学、组织化学、电镜、生化、同位素、免疫、遗传学等方法研究补肾益精法延缓衰老的机理。根据中医“肾主骨生髓”、“髓上通于脑”、“脑为髓海”的说法，观察大脑皮层单胺氧化酶（MAO）、肾上腺素能β受体、α受体、DA受体和γ-氨基丁酸（GABA）受体Rt值；海马胆碱能系统胆碱乙酰化转移酶（ChAT）活性和M受体，以及脑过氧化物歧化酶（SOD）活性，过氧化脂质（LPO）和脂褐质（LPF）含量；根据“肾主生殖”理论进行腺垂体和睾丸组织学，组织化学及超微结构观察和血浆T、E2、FSH、LH含量测定；根据中医关于衰老的“五脏虚损”学说，我们还观察了心、肝组织学及超微结构和SOD、LPO、LPF变化，以及肝核糖核酸酶及其抑制因子（RI）变化；肺组织环腺苷酸（cAMP）与环鸟苷酸（cGMP）；肾上腺和皮肤胶元等的变化。根据衰老的“肾精虚衰”理论和“冬不藏精，春必病温”的观点还进行了免疫功能、细胞因子和外周淋巴细胞DNA修复能力等的测定。研究对象为24月龄老年大鼠，设立青年组、老年组、还精煎组和固真方组。进行多学科、多途径、多层次、多环节、多指标同步测试。通过动物实验研究，观察到老年动物确实存在“五脏虚损”的功能的形态变化。证实了中医关于衰老的“五脏虚损”学说具有现代的病理生理基础。从补肾益精方药固真方和还精煎对垂体、睾丸的作用，可见肾所藏之精确有生殖之精。从上述方药对脑、心、肝、肺、皮肤等组织的作用，反映肾所藏之精也含五脏六腑之精。肾是提供五脏精气的重要源泉。补肾益精方药具有整体调节作用，能调节衰老过程中出现的失衡环节，以维持阴阳平衡，达到防病强身，延年益寿目的。这是中药延缓衰老作用的重要特点。如果我们没有采用多学科、多层次、多环节、多指标的方法就很难获得上述推论。可见在中医研究方面加强学科间协作是非常必要的。容易在短期内取得成效。2.2.3.4离体实验离体实验指在体外进行实验观察的方法。包括对各种动物离体器官、离体组织、体外培养的细胞、细菌、病毒等病原体或癌细胞的实验等。随着细胞和分子生物学技术的广泛应用，离体实验已成为实验室常用的方法。在动物保护呼声高涨的今天，更具有现实意义。体外实验有很多优越性，例如可以严格控制实验条件，对比性、重复性、稳定性较好，实验过程短，大大简化了分析过程，用药量少，节省了试剂和动物饲养开支等等。且所得结果较易分析。但用于中药研究时，应充分估计到中药粗制剂中的杂质和理化特性（如药液pH、电解质和鞣质等）对实验结果的影响。近年来不少单位已开始采用“含药血清”的方法，即给家兔或大鼠灌服准备试验的方药，一定时间后取其血清，加至细胞培养基中进行实验。这种方法可以排除中药pH、电解质等干扰因素的影响，比较接近药物体内环境中产生药理效应的真实过程；还可避免有效成分没有从胃肠道吸收或经体内吸收代谢后失活等出现的假象。当然采用含药血清作体外实验也存不少问题，如血清成分本身的复杂性及其影响，血清标本采集时间的确定，含药血清药物浓度测定等。但可以预见它将在中医药研究中发挥积极的作用。离体实验对应用细胞及分子生物学技术研究中医药，建立细胞模型进行复方研究和药物筛选等均具有十分重要的现实意义。但其局限性也不容忽视。因为离体的实验结果并不代表它在整体中的存在状态。从生物个体取其一小部分时，即可改变它的存在状态，打乱了原有秩序，割断了它与机体其他部分千丝万缕的联系，许多体内动态的连系看不到了。因此微观研究积累了相当知识后，一定要把它们整合到个体中去探讨。从微观到宏观任何层次的现象，如果不与整个个体的生命活动结合，就难于透彻地了解其在整体中的含意，不易发现各种反应过程间的复杂微妙的相互关系。2.2.3问题、对策与展望四十年来通过中医实验研究部分阐明了证的病生机理；扶正固本、通里攻下、清热解毒、活血化瘀等治则治法的作用机理；针灸原理；推动了脉诊、舌诊、腹诊客观化；提高了中医临床疗效，取得了重大成就。当前存在的主要问题是创新不足，思路不够活跃。选题大多仍以一方一药的研究为主。对深入研究出现一定难度，例如许多实验已经说明中药有多层次、多系统、多环节的双相调节作用；大多数研究结果认为复方比单味有效，为什么？是中药多成分多靶点作用，还是其他作用？在这些方面提出的思路不够活跃。在动物模型方面，对模型的证与病之间，同一证候各种不同模型之间，以及不同证候的模型之间缺乏横向比较，同时对现有模型的生物学特性还比较模糊。有人提出建立病证结合模型比较符合临床实际，但在这方面除了温病卫气营血模型以外，成功的经验还不多见。如何将分析所得的实验结果回归到整体层次上来，也是当前实验研究中应该引起注意的问题。为了充分发挥实验研究在中医现代化中的作用，研究人员必须在中医基础和临床方面苦下功夫，继承是前提，发扬是目的，没有继承，发扬将是无源之水。同时也要了解现代生命科学和医学发展的前沿，与中医特点关系密切的现代医学理论，如与阴阳平衡相关的机体内稳态论，与整体调节相关的神经内分泌免疫网络等理论，在中西医“结合点”和“突破口”上狠下功夫。在动物模型制作及指标选择方面要充分注意中医特点，既要引进细胞和分子生物学技术，也要采用先进的无创伤检测和可以反映整体代谢变化的检测，以及心理生理方面的最新成果。采用先进技术并不排除经典、有效的实验方法的应用。要提倡结合中医研究需要，自己创造一些实验方法和装置。在研究过程中，宜采取从整体出发，指导分析；在分析研究的基础上，再进行综合，又回到整体。正确地评价所得的分析结果。即综合-分析-综合方法。通过多学科、多层次、多环节、多指标同步测试而实施。中医药学发展史就是一部不断创新的历史，面临新世纪，国际上生物医学模式的改变，疾病谱的变化，人口老龄化，以及回归大自然重视“天然药“的热潮，给中医带来了新的更高层次的变革机遇，党中央提出科教兴国和现代科技日新月异的进步为中医药发展创造了有利的时机，让我们以史为鉴，在现代条件下，善于继承，敢于创新，为中医药再创辉煌而作出更大贡献。课后作业：查阅和了解中国古代有关医学实验记录？同时代的西医在干什么？方法：上网和借阅不同版本的中医和西医医学史。同学可以分工，利用上次课程介绍的古籍检索工具书，分头查阅不同古典文献。建议，做一些摘录，如果内容丰富、新颖，建议撰写专题学术论文。

上海中医药大学《实验中医学》教案（3）课程名称实验中医学（理论部分） 总学时数36专业中医基础和中医临床专业 授课教师方肇勤内容中医实验研究的思路和规律（二）时数4本次课目的要求掌握中医实验研究的规律和要求：1．选题（包括选题的范围，原则与过程）。2．实验研究设计（包括立题的依据和目的，研究的假说，研究设计的要求，样本大小的确定，研究设计的对照，资料收集，统计和分析，质量控制和预试验）。3．常见的偏倚及控制方法（包括偏倚的概念与控制方法）。4．中医研究报告的撰写。5．中医研究论文撰写的一般格式。本次课的重点难点1．选题形式、要求。2．实验研究设计形式、要求。3．常见的偏倚及控制方法。4．中医研究报告的撰写形式、要求。5．中医研究论文撰写的一般格式和常见问题。本次课的应用教具多媒体设备。第三节中医实验研究的规律和要求（4学时）规律：1）实验研究共同规律；2）中医实验自身规律。实验研究的实质是：提出问题，解决问题。“提出问题”就是选定研究主题，“解决问题”就是执行课题研究，获得结果或结论。中医实验研究是为解释某一个中医临床现象或中医基本理论问题，例如验证某一理论，评价中医的诊断方法、治疗方法，或技术，观察新的治疗及预防措施的效果，或探讨影响某一个疾病的预后和死亡率的因素等。实验研究的一般过程为：选题、设计、观察或试验、数据收集、统计分析、理性概括、鉴定与推广应用、资料归档等。2．3．1选题选题是根据选题的原则，遵循选题的程序，确定研究的具体科学技术问题的过程。选题就是选择研究某一内容/问题，明确研究的目的与目标。中医选题的举例：比如03年春夏之交的“非典”。研究中医药防治方法和原理。如何具体选题？提问，讨论。选题要符合科学认识规律，意味着能够找到从已知信息通向末知信息的桥梁。因此，选择课题，确定主攻方向是科学研究中具有战略意义的首要问题。2．3．1．1选题的范围中医药学的医学研究选题范围应根据我国医药卫生科技方针决定的，即医药卫生科学技术必须为防病治病，保护人民健康服务。落实到具体不同学科、领域，所选题的形式和内容可以千差万别。2．3．1．2选题的原则为了最大限度地减少风险，事半功倍，在选题时必须遵循以下基本原则：1．需求原则：这是选题最基本的原则。必须根据国家经济建设和社会实践的需要，根据中医药科学发展的需要，选择卫生保健事业中具有重大意义或迫切需要解决的关键问题。2．重点原则：所选择的实验研究课题，要研究什么，采取什么手段，要达到什么目的，必须明确。通常可以从二个方面去选择：1）从国家或本地区的临床实践相结合，如围绕国家的重点项目指南，地区中的急需解决的医学问题等；2）从中医药自身的优势出发。3．创新原则：不能走老路。防止重复、走弯路，以免人、财、物浪费。如何创新：1）不断追踪本学科、本专业的研究进展和最新动态。2）不断实践，积累经验。有人归纳为：与聪明人交谈；独立研究，并仔细分析；观察别人研究，并仔细分析。大体这么5条。4．科学性原则：1）要求选题必须有依据，其中包括前人的经验总结和个人研究工作的积累；2）选题要符合客观规律；3）设计必须科学，符合逻辑性，对整个研究工作的手段、方法、实验、进度、人才等都能做科学的安排，做到人、财、物合理落实、运用。5．可行性原则：可行性是指研究课题的主要技术指标实现的可能性。主要要参考以下三个方面。1）研究对象是否满足研究的需要。2）主要的仪器设备条件、经费是否可以支撑研究。3）与协作单位之间的配合程度，及协作参加人员所需专业结构等等。6．效益性原则：是指科研投资与预期研究成果的综合效益是否恰当。这就需要把研究过程中的人力、物力、财力、同预期成果的科学定义、学术水平、社会效益、经济效益、使用价值等进行综合衡量。2．3．1．3选题过程可以分为思考和形成两个阶段。1．思考阶段：1）在某种启发而获得的研究课题，如某种疾病流行或某种诊断困难而产生研究的设想。2）在阅读和教学活动中受到的启发。3）其它学术活动中得到启示。2．形成阶段：课题的思考阶段只是选题的开始，是一个课题的雏型，有待于完善和加深、有待于系统化、可行化。要达到这一目的，主要是依靠查阅、研究、分析国内外文献来实现。查阅文献的目的，主要是了解前人的研究状况，寻找自己的起点和突破口。关于查阅方法有专门的论述，以下只简单介绍目前查找文献的三种方法：1）常用法：常用法包括顺查法、倒查法和抽查法。2）分段法。3）追溯法。查找文献可手工进行，目前较多使用的中文医学文献检索工具有：《中文科技资料目录》（医学）、《国外科技资料目录》（医学）、《中国医学医学文摘》、《国外医学》、《医学年鉴》等。常用的外文医学文献检索工具有：美国《医学索引》（IndexMedicus）、荷兰《医学文摘》（ExeeprptaMedica）、美国《生物学文摘》（BiologicalAbstracts）、日本《医学中央杂志》、日本《科技科技文献速报》、美国《科学引文索引》（ScienceCitationIndex）等等。常用的计算机检索有“中国生物医学文献光盘数据库”和MEDLINE光盘数据库。2．3．2实验研究设计实验研究要有周密的设计，研究经费往往通过撰写项目申请书向有关部门申请。项目设计的好坏、申请书撰写的优劣，往往成为能否获得资助的重要因素。这里重点介绍项目书的撰写。2．3．2．1立题的依据和目的这是在项目申请书中最重要的部分，也是占据篇幅最大的部分。首先要以简洁的文字，鲜明地提出研究的问题，要研究什么，主要的目的是什么，次要的目的是什么，在中医药方面的临床及基础上有何理论方面和实践方面的意义和价值，理论意义和实践意义是什么，国内、外对该问题研究的深度和广度怎样，那些方面已获得结论，那些方面尚有争议、有缺陷、有待于进一步研究，本课题主要是解决哪方面的问题，如果已有一定的科研假设，应当详细描写，这种假设的科学依据是什么，等等。为了将立题的依据和科研的目的写清楚，须要参阅、研究、分析大量的国内外文献，才能获得该研究领域的国内外研究动态，才能写好立题的目的和意义。2．3．2．2研究的假设假设即假说。是研究的先导。1．假说的特点假说的构成要素和基本特点。读教材上的事例。总结以下6个特点：（1）新的疾病事实。（2）医学背景知识。（3）对疾病现象本质的推测。（4）推演出来的预言或预见。（5）科学性。（6）假定性。2．假说的作用（1）在医学研究中的导向作用。（2）在医学认识中的桥梁作用。3．提出假说应遵循的原则一般来说，提出假说并使之能成立，必须遵循以下的原则。1）解释性原则。它指的是假说与事实的无矛盾性。2）对应原则。它指的是假说与医学理论的无矛盾性。3）可检验性原则。它指的是提出假说原则上要能够用观察试验进行检验。2．3．2．3研究设计的要求医学研究的目的是观察和阐明某个或某些研究因素对研究对象的效应或影响，故研究因素、研究对象和效应构成医学研究的三要素：1．研究因素。研究因素就是外界（人为的或自然的）施加于研究对象的影响因素，如生物因素、化学因素、物理因素、社会心理因素、年龄性别因素等等。在中医实验研究中，不同的诊断、治疗手段，方法技术，中药处方等均属此列类。1）研究因素的性质。在设计时首先必须明确研究因素的性质，即是自然存在的（也称暴露因素或简称暴露），如临床描述性研究和观察性研究中的因素，还是实验中由研究人员所给予患者的各种干预因素（也称人为因素或处理因素），如中药、推拿、针灸等。2）研究因素的强度。3）研究因素实施方法的标准化、具体化。标准的制定要求参考国家、专业学术团体颁布的有关诊断、治疗、药剂等标准。2．研究对象。人、动物或细胞。3．观察指标和效应。观察指标按其性质的不同可分为两类：连续变量与离散变量。（1）连续变量又称计量指标、线性变量、量变量或区间变量。这些变量的大小用整数、分数或小数来表示。变量的大小，在同类同单位之间存在着相等的距离，如身长、体重、血压、血钠等的计量。（2）离散变量又称计数指标。是将变量指标按其属性或类别分组，然后数清其个数，它又可分为有序等级变量和无序等级变量。研究人员在选择指标时应考虑以下问题：（1）指标的关联性。指所选用的指标与本研究目的要有本质上的联系，并能确切地反映出研究因素的效应。（2）指标的客观性。指所选指标能客观地记录，不易受主观因素指标的影响。（3）指标的真实性，又称准确性。系指研究结果与相应测定事物真实情况符合或接近的程度。它由指标的灵敏性（即指标能够如实地反映研究对象体内微量效应变化）和指标的特异性（即指标易于揭示研究问题的本质，不易为其他因素干扰）两个指标来衡量。（4）指标的可靠性，又称重复性。指反复测量一种相对稳定现象时，所获结果彼此接近或符合的程度。国外有人提出理想指标分为3类12个要求。第一类：1）合理性、2）正确性、3）特异性、4）重现性和5）客观性，这五个要求中不符合其中之一者，该指标就不能选用。第二类：6）灵敏性、7）无偏性、8）技术上可能性，这三个是对指标的进一步要求，选定时尽可能满足。第三类：9）可转换性或变换性（即从指标所测得变量直接看不出规律，要进行数学上的变换）、10）能分级（指质的指标，其变化程度可分级比较以便统计分析）、11）能与其他指标配合，以及12）对人体试验所用的指标的无害性。2．3．2．4样本大小的确定正确计算样本量是科研设计中的一个重要问题。若样本量过少，往往容易得假阴性的结果，检验效能低，影响结论正确性；若样本量过大，会增加研究的困难，造成不必要的人力、物力、时间和经济上的浪费。样本大小计算就是要保证科研结论具有一定可靠性条件下，确定最小观察例数。样本量计算方法可借助于公式或查表。样本大小的估计取决于下列因素：①第一类错误概率α，有单侧与双侧之分，α越小所需样本越大，一般取α≤0.05为宜；②第二类错误出现的概率β，1-β即为检验效能，把握度，β为单侧，1-β是证实备择假设H1正确的能力，一般β定为0.1或0.2，β值越大，检验效能越低，样本数量也越小；③允许误差δ或差值，一般根据文献依据预试验与研究实际要求由研究者自行规定，此规定应合理；④总体标准差或总体率π，一般是查阅文献或做预试验所得，亦可做合理的假设。也要将计算样本大小的公式列上。计算出的样本大小，还应考虑其它等因素，适当增加。2．3．2．5研究设计的对照实验要求对照、随机、重复，也称3原则。对照组与试验组的病人应保持相对的一致性，必要时应用某些分层因素进行分层处理，这样就能维持两组影响效应的诸因子之间相对均衡，保证其结果的可比性和可信性，以便具有说服力。如对某一新的治疗措施的研究，在对照组可以采用安慰剂，也可采用当前被公认的有效药物或措施，用以和试验组的治疗措施相比较，以便作出正确的评价。在探讨一种新的诊断性试验研究时，可以用当前公认的最准确的标准诊断（goldStandard）作比较，根据其敏感性、特异性和准确性，来评判这种被研究的诊断方法的优劣。2．3．2．6资料收集2．3．2．7统计和分析统计和常用统计方法。分析。2．3．2．8质量控制2．3．2．9预试验2．3．3常见的偏倚及控制方法2．3．3．1偏倚偏倚（Bias）是在研究组间变量差异时产生的一种误差。偏倚就是对真实情况的偏离。常见偏倚有1）选择性偏倚，2）测量性偏倚。看书。2．3．3．2偏倚的控制方法1．强调严格的科研设计对象、对照、抽样方法、标准不统一、样本大小、方法、缺乏质控、判断主观等。2．随机化方法和盲法随机化方法进行分组是消除选择性偏倚最好的方法。盲法是消除测量偏倚的有效方法。3．限制除研究因素外，其他因素尽可能相同。4．配对5．分层6．标准化7．多变量分析（读书）2．3．4中医研究报告撰写2．3．4．1中医研究报告撰写的基本要求讲重要性，书上1~2段。研究报告有两个基本要求：1）研究报告如：论著、病例报告、短篇报道或来信、综述等，不同题材的报告要遵循各自的形式与风格。2）准确、清晰、简洁三项基本原则。2．3．4．2中医研究报告的撰写介绍杂志发表文章。通常，研究报告字数不超过5000个，分为四个部分：序言或引言、材料及方法、结果和讨论。一般前面要求摘要和关键词。1．序言或引言序言部分主要讲清楚所研究工作的来源及本文的目的。研究什么问题，问题从何而来，准备解决哪个问题，以前工作的背景等。字数不宜过多，一般200字左右。2．材料与方法讲义上主要讲临床的，包括：1）课题的基本设计方案2）研究对象的来源3）入选研究对象的方法及分组4）样本大小的确定5）研究对象的一般特征6）诊断标准的确立（还有纳入标准、排除标准等，当然包括中医的。）7）实验检测指标以及方法和干预方法确定8）资料收集和分析统计方法9）疗效标准（剔除标准，指无效样本）实验则建议材料、方法分开写。一一撰写清楚，标准：外行可以看懂，可以操作。如果已经是常用方法，可以写明出处。3．结果这部分需要将具体的实验结果或观察结果写清楚。表达方法有文字部分和图表部分，文字部分的表达应当是要点式的叙述，图和表的制作应当按照统计学的要求严格执行，图表的表达是非常重要的，表达方法运用恰当与否是直接影响报告的质量，每张表格均应当包括标题、横标目、纵标目等格式，图的制作也应根据内容选择最恰当的图示法来表达，如一般条图、构成条图、圆面图、直方图、自然线图、回归线图、半对数线图和点状图等，图的制作也应按统计学的规定做。如果所获得的结果是多方面的，可以分项表达，把结果分项也可为讨论作准备，即打算讨论几个方面，就把结果分成几个方面，使结果和讨论联成一气，使人一目了然。图表的制作也要使读者看了一目了然，切忌那些杂乱无章的图表。结果部分的数据都要经过统计学处理，如均数、标准差、95%可信限及显著性水平等。4．讨论这是非常重要的部分，是全篇文章的精华所在。讨论是为了寻找事物之间的内在联系，可把本文取得的结果与文献或过去的工作进行对比，寻找其间的关系，讨论所需引用的文献材料应尽量抽象概括，而不是抄习别人的文献材料。讨论部分是从理论上对实验和观察结果进行分析和综合，为文章的结论提供理论依据。讨论部分可以结果部分为基础和线索进行分析推理，表达作者在结果部分所不能表达的推理性内容。讨论的内容应当从实验和观察结果出发，实事求是，切不可主观推测，超越数据所能达到的范围。写好这部分很大程度上取决于作者文献掌握的多少，他的分析能力如何，但将讨论部分写成他人文献的综述也是不妥当的。有时为避免重复，也可以把结果和讨论放在一起。研究报告与研究论文相类似，撰写时还望参考以下论文的一些要求。2．3．5中医研究论文撰写的一般格式一篇医学论文一般应向读者交代清如下四个问题，即我为什么要作该项研究？我是如何进行该研究的？我发现了什么？我对研究中的发现是如何思考的？为此，BradfordHill首先提出IMRAD结构（Introduction，Methods，Resultsanddiscussion，即引言、方法、结果和讨论）。IMRAD结构至今仍在应用，1976年国际医学杂志编辑委员会在加拿大温哥华开会，制定了温哥华条例，1991年美国的NewEnglandJournalofMedicine和英国的BritishMedicineJournal发表了温哥华条例第四版。目前为止已有400多种国际性的医学生物学杂志采纳了温哥华条例的规范化建议，我国国家技术监督局参照国际标准于1992年颁布了科学技术期刊编排格式的推荐标准，因此，国内外统一的规范化建议也已被我国不少医学生物学杂志所采纳，现以研究报告或论文的结构为例，分别就其论题、摘要、引言、方法、结果、讨论和参考文献的规范化撰写方法和格式简述如下：1．标题。标题的几点要求：1）标题的长度，中文一般不超过25个字，西文不超过15个单词或100个字母。题意未尽需补充说明或作引伸说明者可用副标题。2）标题的内容要包括处理因素、研究对象、范围、目的和技术等，要避免含糊不清。3）含蓄地体现假说，提出问题。4）名词性结尾，体现文章的性质或研究的方法。5）限定成份，说明回答问题的程度，且留有余地，如初步、探讨、分析等。例如：“某某中药治疗慢性肝炎的随机双盲对照研究”。2.摘要及关键词自1991年起，对研究论文采用大量信息的结构性摘要，摘要共8段，每段都有一个小标题，文句可采用电报格式，8段的小标题分别为：研究目的、研究设计、研究场所（说明研究在住院或门诊或专科中心内进行的）、受试对象、研究实施、主要结果的测定（表明测定方法和精确程度）、结果、结论。摘要中的结果要用叙述式，不要用图表式。结构摘要一般不超过250个单词，非结构性摘要一般不超过150个单词。关键词：在摘要下面应就文章内容选择3-8个关键词，所选用的专业名词应参照医学文献索引（如IndexMedicux），也可以用常用术语。3.引言4.方法1）材料选择方法材料选择方法要说清楚研究对象的选择或剔除的标准资料来源是前瞻性的还是回顾性的，样本数量及分组原则（例如是不是连续和随机的），诊断试剂和实验药品要写明批号，仪器要说明厂名和系列号，药品要用通用名（商品名可在括号内或本页的底部注明）。在介绍试验对象时应避免犯如下的错误：“我们选择了128例平均年龄为65±5岁、平均体重为54±8Kg的患有非胰岛素依赖型糖尿病3±1年的病人”。上述这段话实际是结果而不是方法，故应改写为“我们选择了1990年1至6月所有在本科住院的61～75岁的、根据某标准（参考文献），具有一年以上病史男性糖尿病人”。2）实施或实验操作方法实施或实验操作方法应着重介绍方法的原理及设计，其中包括诊断方法、给药方法、手术方法、生物材料、孵育方法、实验技术、观察方法和数据资料提取的方法、统计分析方法、研究措施是否能被研究者主动控制等。3）评估判别方法评估判别方法主要说明评估判别的标准，判定正常或不正常值的参数界限，参数可以是定性的也可以是定量的，计量单位按国际规范或杂志发表的国内统一标准要求表达，确定判别标准后还应介绍统计分析方法，若采用新而复杂的统计方法而应对统计法作一简要介绍并注明参考文献。5．结果6.讨论讨论的具体内容可以包括：1）对阳性或阴性结果作必要的补充说明或解释；2）对研究结果进行分析讨论，提出见解，指出新在何处，并阐明观点；3）必要时与前人的结果或结论进行比较，指明本研究的优、缺点，及其新的理论或实用价值；4）提出本研究的体会、经验或存在的问题、教训；5）若条件成熟的话，提出推广应用的建议或今后研究的展望，但对尚未完成的研究不要过早地下结论。7．结论（可以没有，融入讨论之中，不再重复）将研究结果和讨论分析后的认识，以简明的结论形式表达出来、并归纳成几条，指明理论和实际意义，它是整个文章内容的高度概括。8．参考文献顺序编码标注制是按引用文献出现的先后顺序，在文献作者或成果叙述文字的右上角用方括号标注阿拉伯数字编号排序，例如李某某[]指出……或早期的研究结果[]表明……1）期刊：作者、文题、刊名、年；卷（期）：起页。2）书籍：作者书名卷版次出版地点：出版者年：起-迄页或作者题目见：主编书名卷版次出版地：再版者年：起-迄页。此外，应该注明论文研究基金的来源及其项目编号。

上海中医药大学《实验中医学》教案（4）课程名称实验中医学（理论部分） 总学时数36专业中医基础和中医临床专业 授课教师方肇勤内容中医临床实验研究时数4本次课目的要求1．掌握中医诊断学和中医治疗学实验研究的主要方法。2．中医证的实验研究（证实质的内涵，常见证的实验研究）。3．中医治疗学实验研究的主要方法。4．临床研究的主要方法（包括治疗方法的选择与处理，观察对象的选择，设立对照及排除干扰因素，治疗护理措施标准和疗效比较判断）。5．动物实验的主要方法（详见有关章节）。6．掌握中医治疗学实验研究的重点和应注意的问题。7．了解中医诊断学和中医治疗学实验研究的现状。本次课的重点难点中医诊断学实验研究1．中医诊断学实验研究的主要方法。2．中医诊断学实验研究的现状。3．中医诊断学实验研究的范例剖析。中医治疗学实验研究1．中医治疗学实验研究的主要方法。2．中医治疗学实验研究的现状。3．中医治疗学实验研究的范例剖析。本次课的应用教具多媒体设备。第一节中医诊断学实验研究（2学时）中医诊断学实验研究，是应用现代科学手段和实验方法，根据中医学理论，在传统中医诊断学理论和实践基础上，进一步深入研究中医诊察疾病、判断病证的理论和方法，是中医学现代化研究的重要组成部分。传统中医诊断，主要是通过医生宏观的感官手段，与经验的体察和分析来完成的。有待解决的问题：1）症状、体征的形成机理；2）认清中医证的实质；3）四诊的客观化、量化分析。后者是研究的热点，而且有突破。问题是，中医诊断是否只能局限在四诊八纲？3．1．1中医诊断学实验研究的主要方法3．1．1．1舌诊研究方法简介可以包括两类：一是检测（1~6，9）；二是机理研究（7、8、10~12）。1．舌色定量检测（关键在设定各实验条件，以及与病人其他部位比较。后者同学是否可以举例？）2．舌荧光检查3．活体显微镜放大检查（蕈状乳头微循环、血管构形、血流及血管周围渗血、出血等情况。）4．舌血流量测定5．舌印片脱落细胞检查6．刮舌涂片检查9．超声波扫描（测定舌粘膜的厚度，为舌苔厚薄的测定提供客观指标）7．舌组织切片检查（带有创伤性，且检测周期太长）8．生理生化测定（包括唾液分泌量、唾液酸碱度、唾液淀粉酶功能测定、血浆蛋白、血浆比量、蛋白电泳、血清电解质、红细胞计数、血小板聚性、血液流变学特性、尿17羟类固醇、尿17酮、维生素饱和试验、基础代谢、冷压试验等，研究舌象的形成机理）10．遗传因素测定（遗传舌象）11．动物实验（猪、大鼠等，介绍我们湿热证研究的经验）12．普查（意义十分重大，为什么？）3．1．1．2脉诊研究方法1．脉象的客观检测及脉象仪的研制一个完整的中医脉象检测系统（简称脉象仪），包括脉象换能器（又称传感器）、脉象预处理单元（脉象仪主机），及显示记录单元或计算机信号处理单元等几个部分（介绍书上内容）。2．脉图与脉图参数（介绍书上面的图）3．脉图的命名、分析与识别1）脉图的命名脉图仪所测绘脉图，有经验的中医切脉，双盲法分析，确定典型脉图的参数范围，赋以对应的脉名。目前比较公认的有平、弦、滑、迟、数、濡、涩、促、结、代、浮、沉等脉图。2）脉图分析方法（1）时域分析方法：对脉图波形中反映的时间幅度，角度，面积等参数作统计分析。（2）频域分析方法：利用实时频谱分析仪对脉搏波的频谱进行分析。（3）速率图分析法：即对脉图波形的微分波进行分析，以反映脉图波形的每个点上的变化速度。（4）综合分析法：在单个脉图分析的基础上，结合不同压力段的脉图变化等等，综合分析脉图多方面的信息。3）脉图的自动识别4．生物力学在脉象研究中的应用脉象是心脏射血活动引起的血液、血压和血管壁的周期性振荡的表现，是生物体中的力学现象。根据对人体中影响脉象各个因素的分析，从中得出主要因素，应用数学力学方法，归结出代表脉象某些特征的简化模型，进而建立模型的数学方程、求解、分析、验证。生物力学对脉象的研究主要就是为解释各种脉象波形的形成与变化提供相应的数学和力学依据。比较典型的例子是，复旦大学应用弹性腔理论和脉搏波线化理论建立的弹性腔模型和线化脉搏波模型，对分析脉图变化、探讨脉象形成机理起了重要作用。5．脉象的动物实验研究3．1．1．3中医证的实验研究1．证实质的内涵（即所谓的证本质）中医证的实质，是关系到中医现代化的核心问题。中医证是疾病发生演变过程中某阶段本质的反映，是致病因素作用于机体的整体反应。表现为机体与外界环境之间、机体内部各组织之间和各项生命活动之间的相互作用和相互联系呈偏离正常状态的整体动态反应。它包括实体空间结构有序性的改变，以及联系、作用过程有序性被破坏两个方面。证实质的研究，主要是探求证的病理变化或机体动态反应的物质基础及其变化规律。2．证实质研究的方法（详见本教材的其它章节）3．1．2中医诊断学实验研究的现状3．1．2．1舌象机理研究舌象与舌的组织结构。舌是由横纹肌组成的肌性器官，呈扁平长行。位于口腔内，附着于口腔底、下额骨和舌骨。舌的血管神经分布极为丰富，舌的外表附有一层特殊的粘膜。舌面（或称舌背）的粘膜是组成舌苔的主要部分。1．正常舌的组织结构。可分为以下几层：1）粘膜层：为复层扁平上皮，其新陈代谢十分旺盛，约三天左右更新一次。粘膜层从上到下可以分为四层：（1）角化层：位于粘膜层的最表层。由角化的或角化不全的突起，突出于舌面。如上皮角化过度，则角化突起可延长增高，呈角化柱或角化树样。（2）颗粒层：位于角化层下。细胞扁平呈梭形，胞浆中含有角化颗粒。（3）棘细胞层：由多角形细胞构成，并具有细胞间桥。棘细胞层中较浅层的细胞体积大、胞浆多，有时可见少量空泡。深层的棘细胞体积较小，细胞间桥较为明显，细胞核相对较大。（4）基本层：又称生发层，位于粘膜层的最下。细胞呈单层排列，整齐致密，使粘膜层上皮层与固有层之间形成一明显的分界线。正常情况下基底层细胞不断地增殖，逐渐向棘层、角化层推移，最后脱落。2）固有层：位于粘膜之下，为结缔组织，质地致密。内有丰富的神经、血管、淋巴结、舌腺管等穿行其中。在舌背部，固有膜向粘膜上皮伸入，形成许多大小不等的小突起，称为次级乳头。3）肌层：由横纹肌组成，还有血管、神经等组织。（这部分书上的内容翔实，可以读。）2．淡红舌的形成机理（正常舌色的形成机理）正常舌色呈淡红色，其形成是由于一方面舌粘膜固有层的血管十分丰富，使舌呈红色。另一方面,舌体表面有一层白色半透明的角化层遮盖，因此肉眼所见呈淡红色。经研究发现，淡红舌的形成与多种因素有关：①舌微循环正常，舌蕈状乳头内微血管开放数目正常、粗细均匀，张力良好；②蕈状、丝状乳头的比例正常；③血循环中的红血球数量与血红蛋白的含量以及血氧饱和度正常。3．薄白苔的形成机理（正常舌苔的形成机理）舌苔主要是由丝状乳头分化的角化树，与充填在其间隙中的脱落的角化上皮、唾液、食物碎屑、细菌、渗出的白细胞等共同组成。丝状乳头的增生与萎缩以及细菌、白细胞等成分的变化，直接影响舌苔的厚薄、质地、颜色等。正常情况下，丝状乳头角化树表面呈乳白色，其生长与分化速度正常，故肉眼所见为薄白苔。此外，桥粒结构对舌上皮细胞脱落的影响正常（桥粒结构对丝状乳头上皮部份的延长有一定关系），膜被颗粒内含物对上皮细胞的粘合作用正常，以及口腔内的pH值在中性范围等因素都与薄白苔的形成有关。4．舌象变化的机理（书上内容丰富，可以依据时间选择性详细介绍）1）舌色异常的形成机理（1）淡白舌。（2）红绛舌。（3）青紫舌。2）舌质异常的形成机理（1）胖嫩舌。（2）齿痕舌。（3）瘦瘪舌。（4）裂纹舌。（5）瘀点、瘀斑舌。（6）朱点舌。3）苔色异常的形成机理（1）白苔。（2）黄苔。（3）黑苔。4）苔质异常的形成机理（1）厚苔。（2）滑苔、燥苔。（3）腻苔。（4）剥苔。（5）镜面舌。3．1．2．2脉诊客观化及脉象机理研究1．脉图的形成及其生理意义（书上四段可以详细介绍）2．常见脉象的形成机理及其脉图特征平脉，脉图的形成如前所述。其脉图呈三峰波，主波、重搏前波、重搏波依次递减，各脉图参数适中，处于正常范围。提示其心脏功能、血管弹性、血液粘度、神经体液调节等均处于正常状态。弦脉，的形成是外周阻力，心射血功能和动脉弹性等因素综合作用的结果。其中外周阻力升高，血管顺应性降低以及动脉弹性模量增大起主导作用。此外，交感神经兴奋性增高，体内去甲肾上腺素增多，导致血管收缩，也参与上述作用。弦脉的脉图特征，总体上主要表现为主波变宽，重搏前波和降中峡抬高，重搏波变小。由于血管与心功能的不同状态，弦脉脉图可进一步分为四型：弦Ⅰ型~弦Ⅳ型。弦Ⅰ型属于功能性弦脉，随着心与血管机能状态的衰退，脉图可逐渐向Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型转化而变为器质性弦脉。滑脉，的形成与心输出量增加、血容量增大，血流加速及外周阻力降低，动脉顺应性较大有关。脉图表现为重搏前波接近于降中峡部位或缺如，呈双峰波，降中峡降低，重搏波较大。涩脉，与心肌收缩力减弱、心输出量减少、血管弹性降低、外周阻力增高、血粘度增加、血液流速流量减少、充