CN117964706B 一种十五元环缩肽类化合物及其制备方法与应用 （广西中医药大学）

ofNeoantimycinDerivSelectiveCytotoxicity.Journa一种十五元环缩肽类化合物及其制备方法在链霉菌S.conglobatusATCC31005发酵过程中投喂化学前体产生一系列具有新抗霉素母核结构的十五元环缩肽类化合物及其制备方法与其元环的缩肽化合物，其C_2位连接着一个羰基或化合物对结直肠癌细胞和肺癌细胞具有显著的为研究和开发新抗肿瘤药物提供了新的先导化2。求1所述的化合物由链霉菌S.conglobatus发酵得到或取二级种子液接种至发酵培养基，27～32℃摇瓶培养2天后按1.0mmol/L的浓度投喂从发酵液中提取分离如权利要求1所述的十五元环缩肽类。～6mg/LCoCl22O。6.如权利要求3所述的方法，其特征在于，从发酵液3经正向硅胶柱分离，洗脱溶剂为石油醚/乙酸乙酯，洗脱溶剂配比梯UAT_F1,UAT_F2分离条件为：78%乙腈_0.1%甲酸水溶液，YMCC18色谱柱,10x250mm,5μm,2mL/min。;所述含有两个烷基和一个苄基侧链的十五元环四重内酯的结构。4别主要集中在于分子母环C1位的羟基化或酮基化修饰、酯(肽)基C4/C9位上烷基侧链的长MolecularNetworkingforTargetedIsolationofDepsipeptides.RSCAdv.2021,11(5),2774_2782；Lin,X.；etal.CompoundDiscoveryandStructure_ActivityRelationshipStudyofNeoantimycinsAgainstDrug_ResistantCancer163A和SW_163B具有免疫抑制和ImimmosuppressantsProducedbyStreptomycesSp.J.Antibiot.2001,54(11),867_蛋白)的表达(Izumikawa,M.；etal.NovelGRP78MolecularChaperoneExpressionViolaceoniger.J.Antibiot.2007,60(10),640_644；Umeda,Y.；etal.AbsoluteStructureofPrunustatinA,aNovelGRP78MolecularChaperonedown_Regulator.Org.Lett.2007,9(21)SalicylamidesInhibitOncoge[0004]第一目的在于公开八种由链霉菌S.conglobatusATCC31005发酵产生的新结构新抗霉素衍生物UnantimycinF1～J(UAT_F1～J)。新抗霉素分子结构中C_6位普遍含有3_N_5[0006]本发明的第二目的在于还提供如上所述新型十五元环缩肽类化合物的制备方本发明所述的新型十五元环缩肽类化合物可由链霉菌S.conglobatus发酵得到或者通过化[0011]上述制备路线中各中间体的具体制备和分离过程可参考现有文献(Kusebauch,6[0015]所述色谱分离包括两次减压硅胶柱色谱分离、一次反相中压ODS柱色谱分离和高85％乙腈_0.1％甲酸水溶液，70％乙腈_0.1％甲酸水溶液，7元环四重内酯与苄基保护的2_羟基苯甲酸进行缩合，进一步硼氢化还原得到目标化合物[0030]本发明的第三目的在于公开上述新抗霉素衍生物UAT_F1UAT_J在制备抗肿瘤药活性还具有一定的选择性。即对人肺癌细胞、大肠癌细胞的半数抑制强度与对照药有抑制活性(IC50分别为6.61和4.75μM)外，UAT_F1～H2普遍对非癌细胞株抑制活性微弱[0033]本发明还提供一种药物组合物，包括如上所述的十五元环缩肽类化合物(UAT_F1离获得一系列结构类似的新型十五元环缩肽类化合物(UAT_F1～UAT_J)抗肿瘤活性测试发8明显优于oxaliplatin。且除UAT_I，UAT_J对人小肠细胞NCM460具有较[0048]图11b为本发明化合物1_7与S_MTPA，标准品L_isoleucicacid与R_MTPA_Cl、S_MTPA_Cl反应的LC_MS对比分析结[0050]5_benzyl_4_hydroxy_3,3dimethyldihydrofuran_2_one与R_MTPA_Cl、S_MTP_Cl灭菌后加入1LSGC培养基中)，采用液体摇床发酵的方式，对放线菌S.conglobatusATCC9灭菌后加入1LSGC培养基中)，采用液体摇床发酵的方式，对放线菌S.conglobatusATCC色谱法对馏分进行分离(洗脱体系：80％甲醇_0.1％甲酸水溶液，YMCC18色谱柱，10×灭菌后加入1LSGC培养基中)，采用液体摇床发酵的方式，对放线菌S.conglobatusATCC色谱法对馏分进行分离(洗脱体系：82％甲醇_0.1％甲酸水溶液，YMCC18色谱柱，10×菌后加入1LSGC培养基中)，采用液体摇床发酵的方式，对放线菌S.conglobatusATCC[0079]采用实施例1或实施例2得的本发明的化合物UAT_F1～J的平面结构可通过1D_和[0080]采用实施例1或实施例2得的本发明的化合物UAT_F1～J的立体构型可通过Marfey_1H[0112]釆用CCK8检测法检测细胞增殖情况。样品用DMSO溶解成10mM的母液，低温保存，[0113]实验细胞株：采用的肿瘤细胞包括：K_RAS靶点突变的人结直肠癌细胞(SW620、DLD1)，非K_RAS靶点突变的结直肠癌细胞(HT_29)，K_RAS突变的人非小细胞肺癌细胞(AA549、NCIH460,)、非K_RAS突变的人非小细胞肺癌(H1299)、正常细胞人小肠细胞CompoundDLD1SW620HCT116HCT116/5_fuHT_29NCIH460A549H1299NCM460UAT_F12.590.563.67>20.09.40>20.0>20.0>20.0>20.0UAT_F20.600.140.82>20.0>20.04.303.31>20.0UAT_G13.519.09>20.0>20.0>20.0>20.0>20.0>20.0UAT_G22.660.332.53>20.0>20.08.80>20.0>20.0UAT_H10.364.24>20.0>20.0>20.0>20.0>20.0>20.0UAT_H20.070.040.118.63>20.00.334.50>20.0UAT_I2.850.33>20.0>20.04.409.70>20.06.61UAT_J2.862.57>20.0>20.0>20.0>20.03.494.75oxaliplatin4.802.504.66>20.06.700.65