CN119386276A 一种双交联脱细胞基质水凝胶及其制备方法和应用 （四川大学）

一种双交联脱细胞基质水凝胶及其制备方本发明提供一种双交联脱细胞基质水凝胶胶溶液形成的凝胶置于单宁酸溶液中交联得到水凝胶打碎后与葡萄糖氧化酶溶液、和浓度为0.1_10mg/ml的亚铁离子溶液混合得到的双交联水凝胶前体置于浓度为10_200mg/dl的葡萄糖条21_1)：将猪真皮层碎片置于0.25%胰蛋白酶溶液中浸泡8_24h，浸泡完毕后使用去离34[0002]在医学领域，软组织修复问题是一个兼具重要临床意义与极大挑战性的临床难的人工替代物一般采用合成高分子或者交联的动物组织制备，难以引导软组织修复和再[0004]脱细胞基质是一种经过特殊处理后从组织或器官中去除具有免疫原性的细胞成5本发明第一方面提供了一种双交联脱细胞基质水凝胶的制备方法，包括以下步[0008]进一步优选的，所述步骤1_3)中的脱细胞溶液包括：1%TritonX_100、0.26%6[0015]本发明第二方面提供了采用上述制备方法制备而成的一种双交联脱细胞基质水[0016]本发明第三方面提供了上述双交联脱细胞基质水凝胶作为制备软组织修复材料中的成分形成稳定的化学键合，构建出具有独特纤维状结构的单交联与脱细胞基质水凝亚铁离子体系进行的，利用葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化产生的过氧化氢与Fe2+离子反应件触发第二次交联反应，使水凝胶在注射部位原位自发交联形成双交联脱细胞基质水凝3、本发明采用了与人体组织的细胞外基质成分更为相似的猪真皮的细胞外基质图7为实施例1制备得到单交联脱细胞基质水凝胶B1、实施例3制备得到单交联脱7实施例6制备得到脱细胞基质水凝胶C2和双交联脱细胞基质图9为实施例2制备得到单交联脱细胞基质水凝胶B2和双交联脱细胞基质水凝胶A2，以及实施例3制备得到单交联脱细胞基质水凝胶B3和双交联脱细胞基质水凝胶A3的溶图10为实施例1制备得到单交联脱细胞基质水凝胶B1和双交联脱细胞基质水凝胶A1，以及实施例3制备得到单交联脱细胞基质水凝胶B3和双交联脱细胞基质水凝胶A3的细8[0023]在本发明一些进一步优选的实施例中，所述步骤1_3)中的脱细胞溶液包括：1%度为0.1mol/L，脱细胞猪真皮基质粉末与酸性胃蛋白酶溶液的固液质量比范围为0.04_[0025]在本发明一些优选的实施例中，所述步骤3）中单宁酸溶液浓度还可以选择2mg/[0026]在本发明一些优选的实施例中，所述步骤3）中预凝胶溶液静置形成凝胶时间为9液中浸泡15min，使用离子水清洗2次，每次15min，然后再置于含有1%TritonX_100、本实施例按照实施例1的方法制备单交联脱细胞基质水凝胶B2和可注射的双交本实施例按照实施例1的方法制备单交联脱细胞基质水凝胶B3和双交联脱细胞本实施例采用实施例1中的方法制备脱细胞基质水凝胶C2和双交联脱细胞基质将实施例1制备得到脱细胞基质水凝胶C1、单交联脱细胞基质水凝胶B1和双交联能模量（G',以ESM表示）以及损耗模量（G'',以LM表示测定B1、B3、A4和A5的剪切应力[0041]由图7可知，双交联脱细胞基质水凝胶A4和A5的剪切应力均是大于单交联脱细胞将实施例1制备得到脱细胞基质水凝胶C1和双交联脱细胞基质水凝胶A1，以及实施例6制备得到脱细胞基质水凝胶C2和双交联脱细胞基质水凝胶A6进行体外降将实施例2制备得到单交联脱细胞基质水凝胶B2和双交联脱细胞基质水凝胶A2，以及实施例3单交联脱细胞基质水凝胶B3和双交胶溶胀比处于1500_2000左右，进而说明进行一次交联和二次交联的水凝胶均具有优秀的将实施例1制备得到单交联脱细胞基质水凝胶B1和双交联脱细胞基质水凝胶A1，以及实施例3制备得到单交联脱细胞基质水凝胶B3和双交联脱细胞基质水凝胶A3进行体细然后向每孔加入1ml细胞悬液，接种完成后，将培养板置于37℃,5%CO2培养箱条件下共培胞基质水凝胶和双交联脱细胞基质水凝胶均具