T∕CSTC 33-2025 蔬菜和水果中100种农药残留的快速筛查 液相色谱-串联质谱法

ICS67.080.01CCSB31CSTCRapidscreeningof100pesticideresiduesintropicalfruitsandvegetablchromatography-tandemmassT/CSTC33—2025I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国热带作物学会提出并归口。本文件起草单位：中国热带农业科学院分析测试中心、海南省现代农业检验检测预警防控中心、三亚市农业技术服务中心。本文件主要起草人：张振山、黎舒怀、刘春华、吴学进、龚敏、何婷、李春丽、李萍萍、吴南村、黄燕霞、钟丽琪、尹桂豪、蒙雪茹、邢孔攀、李晓慧、黎小菊。T/CSTC33—20251蔬菜和水果中100种农药残留的快速筛查液相色谱-串联质谱法本文件规定了蔬菜和水果中100种农药残留的快速筛查方法。本文件适用于蔬菜和水果中克百威等100种农药残留的定性鉴别和定量筛查。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T8855新鲜果蔬取样方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4原理试样用乙腈提取，提取液经固相萃取净化，液相色谱-质谱联用仪检测，外标法定量。5试剂和材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。5.1试剂5.1.1乙腈（CH3CN，CAS号：75-05-8），色谱纯。5.1.2甲醇（CH3OH，CAS号：67-56-1色谱纯。5.1.3乙酸铵（CH3COONH4，CAS号：631-61-8）。5.2溶液配制乙酸铵水溶液（5mmol/L）：称取0.385g乙酸铵，用水溶解并稀释至1000mL，摇匀。5.3标准品100种农药标准品，见附录A，纯度≥95%。5.4标准溶液配制配制步骤如下：a)标准储备溶液（1000mg/L准确称取约10mg（精确至0.1mg）各农药标准品，用乙腈（5.1.1）或甲醇（5.1.2）溶解并分别定容至10mL。避光-18℃及以下条件保存，有效期1年。b)混合标准溶液（10.0mg/L准确吸取浓度为1000mg/L各标准储备溶液1.00mL于容量瓶中，用乙腈或甲醇溶解并定容至100mL。避光-18℃及以下条件保存，有效期6个月。c)混合标准溶液（1.0mg/L准确吸取浓度为10.0mg/L混合标准溶液1.00mL于容量瓶中，用乙腈溶解并定容至10mL。避光-18℃及以下条件保存，有效期1个月。5.5材料T/CSTC33—202525.5.1提取管：50mL，含萃取盐2g，或相当者。5.5.2挤压式一步固相萃取柱：3mL，含净化填料180mg，或相当者。5.5.3微孔滤膜（有机相13mm×0.22μm，或相当者。6仪器主要仪器如下：a)液相色谱-三重四极杆质谱联用仪：配有电喷雾离子源（ESI）；b)分析天平：感量0.1mg和0.01g；c)离心机：转速不低于4000r/min；d)组织捣碎机；e)涡旋混合器。7试样制备7.1试样制备方法如下：a)样品取样部位按照GB2763中的规定执行：——需去核的样品，取样时先去除果核，再进行后续处理；——对于个体较小的样品，取样后全部处理；——对于个体较大的基本均匀样品，可在对称轴或对称面上分割或切成小块后处理；——对于细长、扁平或组分含量在各部分有差异的样品，可在不同部位切取小片或截成小段后处b)取后的样品将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接放入组织捣碎机中捣碎成匀浆，放入聚乙烯瓶中，制备好的样品不少于100g。7.2试样储存将试样按照测试和备用分别置于-18℃及以下条件保存。8分析步骤8.1提取称取5g试样（精确至0.01g）于提取管（5.5.1）中，加入5mL乙腈，剧烈振荡2min后4000r/min离心5min，吸取1mL上清液于挤压式一步固相萃取柱（5.5.2）中，下接微孔滤膜（5.5.3以每秒1滴的流速缓慢过滤于进样瓶中，用于测定。8.2测定8.2.1液相色谱条件液相色谱参考条件如下：1)色谱柱：C18柱，2.1mm（内径）×50mm，粒径1.7μm，或相当者；2)流动相：A相为乙酸铵水溶液（5.2.1），B相为甲醇，流动相及其梯度条件见表1；3)流速：0.3mL/min；4)柱温：35℃;5)进样量：5µL。T/CSTC33—20253表1流动相及其梯度条件（VA+VB）时间min流动相VA流动相VB0.0090.090.02.0030.070.04.0030.070.05.005.0095.08.005.0095.09.0090.090.08.2.2质谱条件质谱参考条件如下：1)离子源类型：电喷雾离子源；2)扫描方式：正离子和负离子同时扫描；3)电喷雾电压：正源5500V，负源-4500V；4)离子源温度：550℃;5)雾化气：344.7kPa；6)辅助加热气：55.2kPa；7)气帘气：172.4kPa；8)多反应监测：每种农药分别选择至少2个子离子。所有需要检测的离子对按照出峰顺序，分时段分别检测。每种农药的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数，见附录B。8.2.3基质匹配标准工作曲线选择与被测样品性质相同或相似的空白样品，按照8.1步骤进行前处理，得到空白基质溶液。精确吸取一定量的混合标准溶液，逐级用空白基质溶液稀释成质量浓度为0.005mg/L、0.01mg/L、0.02mg/L、0.05mg/L、0.08mg/L、0.10mg/L和0.20mg/L的标准工作溶液，供液相色谱-质谱联用仪测定。以农药定量离子的质量色谱图峰面积为纵坐标，相对应的基质匹配标准工作溶液质量浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线。8.2.4定性及定量定性方法（1）保留时间被测试样中目标农药色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在±2.5%之内。（2）离子丰度比在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物选择的子离子均出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品中目标化合物的离子丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差符合表2规定，则可判断样品中存在目标农药。表2定性时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度>50%>20%至50%允许相对偏差±20%±25%±30%±50%定量方法外标法定量。T/CSTC33—202548.3试样溶液测定将基质混合标准工作溶液和试样溶液依次注入液相色谱-质谱联用仪中，保留时间和离子丰度比定性，测得定量离子的质量色谱图峰面积，待测样液中农药的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内，超过线性范围时应根据测定浓度进行稀释后再进行分析。8.4平行试验按照8.1～8.3步骤对同一试样进行平行试验测定。8.5空白试验除不加试样外，按照8.1～8.4的测定步骤进行平行操作。9结果计算试样中各农药残留量以质量分数ω计，数值以毫克每千克（mg/kg）表示，按公式（1）或公式（2）计算。式（1）中：ω试样中被测物残留量的数值，单位为毫克每千克（mg/kg）；ρ1基质匹配标准工作溶液中被测物的质量浓度的数值，单位为毫克每升（mg/LA——试样溶液中被测物的质量色谱峰面积；As——基质匹配标准工作溶液中被测物的质量色谱图峰面积；V——提取液体积的数值，单位为毫升（mL）；m——试样质量的数值，单位为克（g）。式（2）中：ω试样中被测物残留量的数值，单位为毫克每千克（mg/kg）；ρ2从基质匹配标准工作曲线中得到的试样溶液中被测物的质量浓度的数值，单位为毫克每升（mg/L）；V——提取液体积的数值，单位为毫升（mL）；m——试样质量的数值，单位为克（g）；计算结果以重复性条件下获得的2次独立测定结果的算术平均值表示，保留2位有效数字，含量超1mg/kg时保留3位有效数字。10精密度在重复性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过重复性限（r），见附录D.1。在再现性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过再现性限（R），见附录D.2。本方法对各种化合物的定量限为0.005mg/kg～0.01mg/kg（见附录E）。T/CSTC33—20255（资料性）100种农药中英文名称对照索引(按英文字母顺序）100种农药中英文名称对照索引见表A.1。表A.1100种农药中英文名称对照索引表1C12H15NO42C48H72O143C4H10NO3PS4C10H11ClN45C7H14N2O2S6C7H14N2O4S7C7H14N2O3S8C9H17N5S9C22H17N3O5C18H12Cl2N2OC16H23N3OSC12H11NO2C9H9N3O2C12H15NO3C20H32N2O3SC18H14BrCl2N5O2C14H10Cl2N2O2C10H13ClN2C15H11BrClF3N2OC20H9Cl3F5N3O3C9H11Cl3NO3PSC6H8ClN5O2SC14H16ClO5PSC6H10N6C16H38O6P2S4C12H21N2O3PSC4H7Cl2O4PC19H17Cl2N3O3C14H9ClF2N2O2C5H12NO3PS2C21H22ClNO4C49H77NO13C8H19O2PS2C25H28O3C17H12Cl2N2OC19H17ClN4T/CSTC33—20256C9H12NO5PSC10H15O3PS2C10H15O5PS2C10H15O4PS2C12H4Cl2F6N4OSC12H4Cl2F6N4C12H4Cl2F6N4SC12H4Cl2F6N4O2SC12H10ClN3OC19H22O6C17H21ClN2O2SC14H14Cl2N2OC9H10ClN5O2C22H17ClF3N3O7C13H13Cl2N3O3C9H17ClN3O3PSC11H16NO4PSC14H22NO4PSC11H15NO2C18H19NO4C10H19O6PS2C15H21NO4C2H8NO2PSC5H10N2O2SC7H13O6PC7H14NO5PmyclobutanilC15H17ClN4C5H12NO4PSpaclobutrazolC15H20ClN3OparathionC10H14NO5PSC13H19N3O4phorateC7H17O2PS3C7H17O4PS3C7H17O4PS2phosaloneC12H15ClNO4PS2phosfolanC7H14NO3PS2phosmetC11H12NO4PS2phoximC12H15N2O3PSC11H18N4O2C15H16Cl3N3O2C11H15BrClO3PSpropamocarbC9H20N2O2propiconazoleC15H17Cl2N3O2T/CSTC33—20257pyraclostrobinC19H18ClN3O4C19H25ClN2OSpyrimethanilC12H13N3C42H69NO10C43H69NO10C41H65NO10C42H67NO10C21H24Cl2O4C16H22ClN3OtebufenozideC22H28N2O2C9H21O2PS3C9H21O4PS3C9H21O3PS3C8H10ClN5O3SthidiazuronC9H8N4OSC12H14N4O4S2C21H22ClN3O2C14H16ClN3O2C12H16N3O3PSC4H8Cl3O4PC20H19F3N2O4T/CSTC33—20258（资料性）100种农药的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数100种农药的保留时间、母离子、子离子等质谱分析参数见表B.1。表B.1100种农药的保留时间、离子对及质谱分析参数序号1234567899序号l9myclobutanilpaclobutrazolparathionphoratephoratephosalonephosfolan序号phosmetphoximpropamocarbpropiconazolepyraclostrobinpyrimethanilLtebufenozidethidiazuronhylT/CSTC33—2025（资料性）100种农药多反应监测（MRM）质量色谱图100种农药多反应监测（MRM）质量色谱图见图C.1。1.1.3-羟基克百威(3-hydroxycarbofuran)3.乙酰甲胺磷(acephate)5.涕灭威(aldicarb)7.涕灭威亚砜(aldicarbsulfoxide)9.嘧菌酯(azoxystrobin)2.2.阿维菌素(abamectin)4.啶虫脒(acetamiprid)6.涕灭威砜(aldicarbsulfone)8.莠灭净(ametryn)10.啶酰菌胺(boscalid)图C.1100种农药多反应监测（MRM）质量色谱图T/CSTC33—202511.噻嗪酮(buprofezin)13.多菌灵(carbendazim)15.丁硫克百威(carbosulfan)17.灭幼脲(chlorbenzuron)19.虫螨腈(chlorfenapyr)(carbaryl)14.克百威(carbofuran)16.氯虫苯甲酰胺(chlorantraniliprole)18.杀虫脒(chlordimeform)20.氟啶脲(chlorfluazuron)图C.1（续）T/CSTC33—202521.毒死蜱22.噻虫胺(chlorpyrifos)(clothianidin)23.蝇毒磷24.灭蝇胺(coumaphos)(cyromazine)25.内吸磷(demeton)26.二嗪磷(diazinon)27.敌敌畏(dichlorvos)28.苯醚甲环唑(difenoconazole)29.除虫脲(diflubenzuron)30.乐果(dimethoate)图C.1（续）T/CSTC33—202531.烯酰吗啉32.甲氨基阿维菌素苯甲酸盐(dimethomorph)(emamectinbenzoate)33.灭线磷34.醚菊酯(ethoprophos)(etofenprox)35.氯苯嘧啶醇(fenarimol)36.腈苯唑(fenbuconazole)37.杀螟硫磷(fenitrothion)38.倍硫磷(fenthion)39.倍硫磷砜(fenthionsulfone)40.倍硫磷亚砜(fenthionsulfoxide)图C.1（续）T/CSTC33—202541.41.氟虫腈(fipronil)43.氟虫腈硫醚(fipronilsulfide)45.氯吡脲(forchlorfenuron)47.噻螨酮(hexythiazox)49.吡虫啉(imidacloprid)42.42.氟甲腈(fipronildesulfinyl)44.氟虫腈砜(fipronilsulfone)46.赤霉酸(gibberellicacid)48.抑霉唑(imazalil)50.茚虫威(indoxacarb)图C.1（续）T/CSTC33—202551.异菌脲52.氯唑磷(iprodione)(isazofos)53.水胺硫磷54.甲基异柳磷(isocarbophos)(isofenphos-methyl)55.异丙威(isoprocarb)56.醚菌酯(kresoxim-methyl)57.马拉硫磷(malathion)58.甲霜灵(metalaxyl)59.甲胺磷(methamidophos)60.灭多威(methomyl)图C.1（续）T/CSTC33—202561.速灭磷(mevinphos)63.腈菌唑(myclobutanil)65.多效唑(paclobutrazol)67.二甲戊灵(pendimethalin)69.甲拌磷砜(phoratesulfone)62.62.久效磷(monocrotophos)64.氧乐果(omethoate)66.对硫磷(parathion)68.甲拌磷(phorate)70.甲拌磷亚砜(phoratesulfoxide)图C.1（续）T/CSTC33—202571.71.伏杀硫磷(phosalone)73.亚胺硫磷(phosmet)75.抗蚜威(pirimicarb)77.丙溴磷(profenofos)79.丙环唑(propiconazole)图C.1（续）72.72.硫环磷(phosfolan)74.辛硫磷(phoxim)76.咪鲜胺(prochloraz)78.霜霉威(propamocarb)80.吡唑醚菌酯(pyraclostrobin)T/CSTC33—202581.哒螨灵82.嘧霉胺(pyridaben)(pyrimethanil)83.乙基多杀菌素J84.乙基多杀菌素L(spinetoramJ)(spinetoramL)85.多杀霉素A(spinosynA)86.多杀霉素D(spinosynD)87.螺螨酯(spirodiclofen)88.戊唑醇(tebuconazole)89.虫酰肼(tebufenozide)90.特丁硫磷(terb