CN119424391A 一种电纺胶原复合体、制备方法及应用 （四川大学）

或/和治疗龋齿的药物中的应用。本发明的电纺矿化和促牙髓细胞成牙本质向分化于一体的龋2S2.制备静电纺丝I型胶原基质Col：将冻干I型胶冻干I型胶原海绵溶液中冻干I型胶原的浓度为80~步骤S2中采用戊二醛蒸汽挥发交联或ED8.一种电纺胶原复合体，其特征在于，采用权利要求1~7任意一项所述的制备方法制9.根据权利要求8所述的一种电纺胶原复合体的应用，3牙本质仿生矿化或/和促牙髓细胞成牙本质向分化的4主要分为釉质仿生修复和牙本质仿生修复两个方向。釉质仿生修复侧重于利用成核模板，究各自涉及不同的作用机制和靶点，尚未有单一效应因子能够同时实现这三个方面的效从而在釉质发育中发挥重要作用。应用。早期的研究常将ACP制备成无水颗粒形式，添加到树脂和玻璃离子等牙科充填材料5S2.制备静电纺丝I型胶原基质Col：将冻干I型胶原海绵加有机溶剂溶解配制成6冻干I型胶原海绵溶液中冻干I型胶原的浓度为80~步骤S2中采用戊二醛蒸汽挥发交联或EDC/NHS溶液交联；优选为戊二醛蒸汽挥发[0021]本发明的部分实施方案中，所述应用为在制备促进龋损牙体釉质仿生矿化或/和牙本质仿生矿化或/和促牙髓细胞成牙本质向分化的为QP5和ACP向龋损部位的长效作用提供本发明基于具有多方位矿化潜能的仿生功能多肽QP5，匹配提供持续受控矿化原促牙髓细胞成牙本质向分化于一体的龋损仿生修附图2为本发明的复合体MQA的透射电镜及元素扫描图；图2中第一行从左至右依7附图7为本发明试验例4的促进脱矿牙本质再矿化作用的考察试验结果图；其中附图8为本发明试验例5的不同浓度复合体促进人牙髓细胞迁移作用的考察试验附图9为本发明试验例6的不同浓度复合体促进人牙髓细胞分化生成矿化结节作S1.2、向PAH_CaCl2溶液中滴加500mL浓度为8mM含K2HPO4的Hepes缓冲液（pH搅拌至冻干I型胶原海绵完全溶解，再超声震荡8min后得到浓度为80mg/mL的冻干I型胶8再取出静电纺丝I型胶原基质Col，用去离子水清洗后冻干，即制得电纺胶原复合体MQA_S1.2、向PAH_CaCl2溶液中滴加500mL浓度为9mM含K2HPO4的Hepes缓冲液（pH拌至冻干I型胶原海绵完全溶解，再超声震荡12min后得到浓度为100mg/mL的冻干I型胶9MQA_chit混悬液，再用超声细胞破碎仪超声1.1min，采用氢氧化钠溶液调节体系pH值为7.5，再取出静电纺丝I型胶原基质Col，用去离子水清洗后冻干，即制得电纺度为0.2M的甘氨酸溶液浸泡12h，PBS缓冲液清洗，冻干，即得到静电纺丝I型胶S3.3、将S2制得的静电纺丝I型胶原基质Col置于多孔板底部，每孔滴加1mL的再取出静电纺丝I型胶原基质Col，用去离子水清洗后冻干，即制得电纺胶原复合体MQA_本试验例对实施例3各步骤制得的产物进行了[0041]1.取实施例3步骤S1[0043]2.取实施例3步骤S2制得的[0044]电纺胶原基质Col的扫描电镜图如附图3所示：电纺胶原基质Col呈现典型的电纺[0045]3.取实施例3步骤S3制得的电纺胶原复[0046]电纺胶原复合体MQA_Col的扫描电镜图如附图4所示：电纺胶原复合体MQA_Col的试验例6所用的电纺胶原复合体MQA_Col为按实施例3本试验例公开了本发明的电纺胶原复合体MQA_Col促进脱矿釉质再矿化作用的考[0052]另取氟化钠，加pH7.4的Hepes缓冲[0054]再矿化处理结束后，对各组釉质样本表面进行扫描电镜观察。所得结果如图5所本试验例公开了本发明的电纺胶原复合体MQA_Col促进I型胶原纤维内矿化作用本试验例公开了本发明的电纺胶原复合体MQA_Col促进脱矿牙本质再矿化作用的体组可见大块平整矿物沉积（实线箭头示伴有矿物晶体混合团聚的MQA纳米微球进入牙本试验例公开了本发明的电纺胶原复合体MQA_Col复合体促进人牙髓细胞迁移作[0071]使用划痕实验验证复合体促进人牙髓细胞迁移效果。将10mg电纺胶原复合体mL的MQA_Col浸提液。将人牙髓细胞以50%密度接种于6孔板中，培养至细胞融合度达80%_释放出的活性物质是否对牙髓细胞有促进生长迁移的募集作用。本试验例公开了本发明的电纺胶原复合体MQA_Col复合体促进人牙髓细胞分化生油磷酸钠溶液均在配制前使用0.22mm过[0076]进一步配置不同浓度MQA_Col浸提液：将10mg电纺胶原复合体MQA_Col浸泡于10mL上述分化诱导培养基中24h，提取复合体的浸泡上清液体，记为1mg/mLMQA_Col浸提液。以该浸提液为母液，使用同种分化诱导培养基稀释配置浓度为10、50和100μg/mL的[0077]使用上述不同浓度的MQA_Col分化诱导培养基浸提液对人牙髓细胞进行分化诱导MQA_Col成功促进了人牙髓细胞分化生成生物本质仿生矿化和促牙髓细胞成牙本质向分化于一体的龋损仿生修复和精神上做出的毫无实质意义的改动或润色，其所解决的技术问题仍然与本发明一致的，