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2025年病理主管技师考试练习题及答案一、单项选择题(每题1分)1.下列哪种固定液对细胞核的固定效果最佳,同时可较好保存糖原与核酸?A.10%中性福尔马林B.4%多聚甲醛C.Bouin液D.Carnoy液E.Zenker液答案:D解析:Carnoy液配方为无水乙醇60ml+氯仿30ml+冰醋酸10ml,穿透力强,可快速固定细胞,对细胞核结构保存效果远优于常规固定液,同时能有效保留糖原、核酸,常用于染色体检测、核酸原位杂交的标本固定。10%中性福尔马林为临床常规固定液,对糖原保存差,糖原易溶解丢失;4%多聚甲醛多用于免疫组化标本固定,对核酸和糖原的固定效果弱于Carnoy液;Bouin液对结缔组织染色效果好,对糖原保存一般;Zenker液对细胞质与肌肉组织固定效果佳,糖原保存不佳。2.病理常规石蜡切片脱水透明过程中,临床最常用的透明剂是?A.无水乙醇B.二甲苯C.氯仿D.丙酮E.正丁醇答案:B解析:二甲苯可与乙醇、石蜡完全互溶,能快速脱去切片中的乙醇,使组织透明度提升,透明效果好,成本低廉,是病理技术常规制片最常用的透明剂。无水乙醇为脱水剂,不属于透明剂;氯仿透明速度慢,毒性较强,临床很少常规使用;丙酮为快速脱水剂、固定剂,不用于透明;正丁醇透明速度慢,价格较高,仅用于特殊染色。3.病理诊断淀粉样变性的首选染色方法是?A.Masson三色染色B.PAS染色C.刚果红染色D.阿尔辛蓝染色E.天狼星红染色答案:C解析:淀粉样物质可特异性结合刚果红,染色后呈橘红色,在偏光显微镜下呈现特征性苹果绿双折光,是目前病理诊断淀粉样变的金标准方法。Masson三色用于区分胶原纤维与肌纤维;PAS可显示糖原和中性黏液,淀粉样变可呈阳性但特异性不足,不是首选;阿尔辛蓝用于染色酸性黏液物质;天狼星红用于显示胶原纤维分型。4.免疫组化染色中,用于封闭内源性过氧化物酶的常用试剂是?A.3%过氧化氢-甲醇溶液B.1%牛血清白蛋白C.0.1%胰蛋白酶D.10%正常山羊血清E.柠檬酸钠缓冲液答案:A解析:内源性过氧化物酶主要存在于红细胞、粒细胞、巨噬细胞中,可催化DAB等底物产生非特异性显色,3%过氧化氢可有效灭活内源性过氧化物酶活性,是临床最常用的封闭剂。1%牛血清白蛋白和正常山羊血清用于封闭非特异性抗体结合位点;胰蛋白酶用于酶诱导抗原修复,解开福尔马林固定导致的抗原交联;柠檬酸钠缓冲液是热诱导抗原修复最常用的缓冲液。5.关于细胞凋亡的形态学特征,下列说法错误的是?A.细胞皱缩,胞质致密B.核染色质边集C.形成凋亡小体D.溶酶体破裂,局部炎症反应明显E.细胞膜完整答案:D解析:凋亡是程序性细胞死亡,整个过程中细胞膜保持完整,溶酶体不破裂,凋亡小体最终被邻近巨噬细胞或实质细胞吞噬,不会引发局部炎症反应;坏死才会出现溶酶体破裂、内容物释放、明显炎症反应,因此D选项错误。6.病理标本固定的核心目的是?A.防止标本腐败自溶B.使细胞内蛋白质凝固硬化,保持组织原有的形态结构C.杀死标本表面细菌D.增加组织对染料的亲和力E.便于标本长期保存答案:B解析:固定的核心作用是通过化学试剂使细胞内的蛋白质、糖类、脂质等物质凝固硬化,终止细胞内酶的分解作用,最大程度保留组织细胞与生活状态接近的形态结构,其余选项均为固定的衍生作用,并非核心目的。7.根据《中国数字病理临床应用专家共识》,满足常规HE切片病理诊断需求的全玻片扫描(WSI),采用40倍物镜扫描时的最低分辨率要求为(单位:μm/像素)?A.0.10B.0.25C.0.50D.1.0E.2.0答案:B解析:共识明确要求,用于临床诊断的全玻片扫描,40倍平场消色差物镜扫描的分辨率应不低于0.25μm/像素,该分辨率可清晰显示细胞核形态、核仁、核分裂象、细胞质颗粒等病理诊断必需的结构,满足日常诊断需求。8.HE染色中,伊红使细胞质呈红色的原理是伊红作为酸性染料,可结合细胞内的哪种成分?A.核酸B.酸性成分C.碱性成分D.糖原E.脂质答案:C解析:HE染色中苏木精为碱性染料,可与细胞核内酸性的核酸结合,使细胞核染蓝紫色;伊红为酸性染料,可与细胞质、胶原纤维中的碱性蛋白质成分结合,使其染成红色,因此选C。9.根据《临床技术操作规范·病理学分册》要求,内镜活检小标本采用10%中性缓冲福尔马林固定,合适的固定时间范围是?A.<1小时B.1~6小时C.6~48小时D.48~72小时E.>72小时答案:C解析:固定时间不足会导致组织固定不充分,细胞核染色不良、抗原丢失;固定时间过长会导致核酸过度交联、片段化,影响后续免疫组化、分子检测结果。规范明确要求,小活检标本(内镜、穿刺标本)的合适固定时间为6~48小时,大手术标本为12~72小时。10.下列哪项不属于甲醛固定石蜡包埋(FFPE)组织DNA提取的常规步骤?A.二甲苯脱蜡B.蛋白酶K消化C.核酸沉淀/吸附柱纯化D.苏木素-伊红染色E.乙醇洗脱答案:D解析:FFPE样本DNA提取的常规流程为:组织切片→二甲苯脱蜡→梯度乙醇水化→蛋白酶K消化降解蛋白质释放核酸→核酸结合纯化→洗脱获得DNA。苏木素-伊红染色是病理组织形态学染色步骤,不属于DNA提取流程,因此选D。11.病理常规石蜡包埋,最常用的石蜡熔点为?A.48~52℃B.52~56℃C.56~60℃D.60~64℃E.64~68℃答案:B解析:病理常规制片最常用的石蜡熔点为52~56℃,适合常温环境下切片操作,气候炎热地区可选择熔点稍高(56~58℃)的石蜡,常规检测统一使用52~56℃熔点石蜡。12.免疫组化热诱导抗原修复中,适用于大多数抗原的常用缓冲液是?A.pH6.0柠檬酸钠缓冲液B.pH8.0EDTA缓冲液C.pH7.4磷酸盐缓冲液D.pH8.0Tris-HCl缓冲液E.pH3.0甘氨酸缓冲液答案:A解析:pH6.0柠檬酸钠缓冲液对绝大多数抗原的修复效果良好,兼容性强,是免疫组化常规抗原修复的首选缓冲液;pH8.0EDTA缓冲液多用于福尔马林固定时间过长、抗原交联程度高的标本修复,因此选A。13.病理印片细胞学的特点不包括下列哪项?A.制片简单快速,适合术中快速辅助诊断B.细胞结构完整,核形态细节清晰C.可保留病变组织原有的结构层次D.所需标本量少E.细胞新鲜,抗原活性保存好答案:C解析:印片细胞学是将新鲜病变组织直接按压在载玻片上获得脱落细胞,仅能观察单个细胞形态,无法保留病变原有的组织结构层次,这是印片的主要局限性,其余选项均为印片细胞学的优点。14.目前病理领域检测基因拷贝数变异的金标准方法是?A.荧光原位杂交(FISH)B.聚合酶链反应(PCR)C.Sanger测序D.免疫组化E.二代测序(NGS)答案:A解析:荧光原位杂交可在组织原位直接观察基因拷贝数,结果直观,准确性高,是检测HER2基因扩增、ALK基因重排等拷贝数/结构变异的金标准方法。15.显示含铁血黄素颗粒的经典特殊染色方法是?A.刚果红染色B.普鲁士蓝染色C.六胺银染色D.PAS染色E.阿尔辛蓝染色答案:B解析:普鲁士蓝染色可与含铁血黄素中的三价铁结合,形成蓝色的亚铁氰化铁沉淀,是显示含铁血黄素的经典特异性染色方法。二、共用题干单选题题干1:患者男性,62岁,体检发现肺部占位,行支气管镜活检,标本经10%中性福尔马林固定,脱水浸蜡包埋切片后,HE染色显示核染色浅淡,染色质结构不清,切片对比度差。1.出现上述染色异常最可能的原因是?A.切片厚度过大B.标本固定不充分C.透明过度D.苏木精染液pH过高E.伊红染色过深答案:B解析:小活检标本固定时间不足会导致细胞内核酸未完全凝固,在后续脱水染色过程中发生丢失,最终导致核染色浅淡、染色质结构不清,是小标本染色不佳最常见的原因。切片厚度过大仅会导致结构重叠,不会出现整体核染色浅淡;苏木精pH过高会导致染色整体偏蓝,pH过低才会染色偏浅;透明过度不会影响核染色深度。2.该患者后续需行EGFR基因突变检测,对FFPE标本的要求,下列说法错误的是?A.标本肿瘤细胞占比不低于10%B.切片厚度一般为5~10μm,需10张左右切片C.固定时间超过7天的标本绝对不能用于检测D.需要避开大片坏死区域E.脱蜡后的切片需尽快提取核酸答案:C解析:现有研究证实,固定数月甚至数年的FFPE标本,只要提取的DNA片段长度符合检测要求,仍可用于基因检测,并非固定超过7天就完全不能检测。其余选项均正确:肿瘤细胞占比不足会导致检测假阴性,常规要求肿瘤细胞占比≥10%;足够厚度的切片可获得足量的DNA;坏死区域核酸降解严重,会影响检测结果准确性;脱蜡后组织中的核酸酶激活,放置时间过长会导致核酸降解,需尽快提取。题干2:病理技术室接收1例新冠病毒感染死亡患者的尸体穿刺标本,需行病理检查、特殊染色及分子检测。1.若需清晰显示核内病毒包涵体,对固定要求最高,最合适的固定液是?A.10%中性福尔马林B.Carnoy液C.Bouin液D.Zenker液E.95%乙醇答案:B解析:病毒包涵体多位于细胞核内,Carnoy液对细胞核结构和核酸的保存效果远优于常规固定液,可清晰显示核内包涵体的形态细节,因此选B。2.若需评估肺组织纤维化程度,清晰区分胶原纤维与肌纤维,首选的染色方法是?A.HE染色B.Masson三色染色C.刚果红染色D.PAS染色E.网状纤维染色答案:B解析:Masson三色染色可将胶原纤维染成蓝色,肌纤维染成红色,可清晰区分两种组织,是评估器官纤维化程度的首选染色方法。三、多项选择题(每题2分,多选、少选、错选均不得分)1.病理技术室内质量控制必须涵盖的环节包括?A.标本接收与编号核对B.标本固定C.脱水透明浸蜡D.常规切片染色E.免疫组化染色与分子检测F.切片质量审核答案:ABCDEF解析:病理技术室内质控覆盖整个技术流程,从标本接收核对开始,到固定、处理、制片、特殊检测、切片质量审核,所有环节均需要纳入质控管理,因此所有选项均正确。2.下列哪些因素会导致免疫组化染色出现非特异性背景染色?A.内源性过氧化物酶未封闭完全B.一抗浓度过高C.抗体孵育温度过高D.洗涤不充分E.非特异性结合位点封闭不足F.抗原修复过度答案:ABCDEF解析:所有选项均可导致非特异性背景染色:内源性过氧化物酶残留会催化底物显色产生背景;一抗浓度过高会增加非特异性结合,导致背景加深;孵育温度过高会提升非特异性抗体结合率;洗涤不充分会导致未结合的一抗、二抗残留在切片上,产生背景;封闭液不足无法阻断非特异性结合位点;抗原修复过度会暴露非特异性结合位点,增加背景染色。3.关于冰冻切片的说法,正确的有?A.冰冻切片不需要脱水浸蜡流程,制片速度快,多用于术中快速病理诊断B.冰冻切片可较好保存组织内的脂肪、酶和抗原活性C.冰冻切片质量常规优于石蜡切片D.脂肪组织肿瘤适合行冰冻切片检查E.冰冻切片常规用95%乙醇固定答案:ABDE解析:冰冻切片不需要经过脱水浸蜡等长时间流程,30分钟内即可完成制片,因此用于术中快速诊断;由于不需要高温处理,可更好保留脂肪、酶和抗原活性,适合快速免疫组化检测;脂肪组织在石蜡制片过程中会被脱脂溶解,因此适合冰冻切片检查;冰冻切片常规用95%乙醇快速固定,可减少冰晶形成;但冰冻切片容易产生冰晶,细胞收缩变形,切片厚度不均,整体质量劣于石蜡常规切片,因此C错误。4.下列特殊染色与靶物质对应关系正确的有?A.PAS染色-糖原B.阿尔辛蓝染色-酸性黏液C.Masson三色染色-胶原纤维D.刚果红染色-淀粉样变E.六胺银染色-真菌F.普鲁士蓝染色-含铁血黄素答案:ABCDEF解析:所有选项对应关系均正确,为病理技术常规特殊染色的经典应用。5.影响FFPE标本核酸质量的因素包括?A.固定液类型与浓度B.固定时间C.标本存储时间D.标本存储温度E.脱蜡后切片的放置时间答案:ABCDE解析:所有选项均会影响核酸质量:福尔马林固定会导致核酸交联片段化,乙醇固定的核酸质量优于福尔马林,福尔马林浓度过高会加重交联;固定时间不足会导致核酸降解,固定时间过长会导致过度交联片段化;标本存储时间越长,核酸降解越严重;存储温度越高,核酸降解速度越快;脱蜡后切片暴露在室温中,核酸酶激活,放置时间越长降解越严重。6.术中快速冰冻病理诊断的禁忌症包括?A.涉及截肢和其他会严重致残的根治性手术标本B.体积较小的皮肤色素痣活检标本C.乳腺癌前哨淋巴结活检,需要明确转移情况决定手术范围D.骨组织等含钙硬组织,无法切片E.疑为淋巴瘤的标本,需要免疫组化、分子检测明确分型答案:ADE解析:严重致残手术的诊断误差会导致不可逆的严重后果,术前活检可明确诊断,不需要术中冰冻,属于禁忌症;含钙骨组织无法切片,冰冻不能获得合格切片,属于禁忌症;淋巴瘤需要结合免疫组化、分子检测、流式细胞学才能明确分型,冰冻无

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