（正式版）DB36∕T 1000-2017 《芦笋亲本繁殖与杂交制种技术规程》

ICS65.020.20DB36/T1000—2017芦笋亲本繁殖与杂交制种技术规程2018-03-01实施2018-03-01实施IDB36/T1000—2017前言 1范围 12规范性引用文件 13术语和定义 14亲本组培快繁 15杂交制种 36果实收获 37种子脱取与处理 3附录A(规范性附录)培养基配方 4本标准按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。本标准由江西省农业厅提出并归口。本标准起草单位：江西省农业科学院蔬菜花卉研究所、江西省标准化研究院。本标准主要起草人：罗绍春、周劲松、汤泳萍、张岳平、尹玉玲、谢启鑫、陈光宇。1芦笋亲本繁殖与杂交制种技术规程本标准规定了芦笋亲本繁殖与杂交制种技术的术语和定义、亲本组培快繁、杂交制种、果实收获、种子脱取与处理等芦笋杂交品种亲本繁殖与杂交制种技术过程。本标准适用于芦笋杂交品种亲本繁殖与杂交种子生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T3543.1农作物种子检验规程总则NY/T760芦笋NY/T2496植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南芦笋NY/T5231无公害食品芦笋生产技术规程TG/130/4国际植物新品种保护联盟(UPOV)指南下列术语和定义适用于本文件。3.1幼株期芦笋定植后至可开始采笋的生长时期。3.2外植体用于植物组织培养的组织或器官。培养周期植物组织培养过程中外植体培养的继代间隔时间。4亲本组培快繁4.1外植体取材与表面消毒春季4月～5月份，分别选择父本与母本生长健壮的植株(亲本选择应符合NY/T760、NY/T2496和TG/130/4要求),采取新抽生出的长约25cm的健壮嫩茎为外植体。将它置于自来水下轻轻冲洗5min~210min,剪去顶端鳞片包被和底端纤维化程度高的部分。在超净工作台上先用75%的酒精浸泡30s,再用2%的次氯酸钠灭菌8min～10min,无菌水清洗3次～5次，无菌滤纸吸干待用。4.2无菌培养4.2.1培养条件以下培养条件均为温度27±1℃,相对湿度70%～80%,光照时间12h/d,光照强度2500Lux。4.2.2腋芽诱导培养在超净工作台上，将消毒完毕的嫩茎切成每个带有1个～2个腋芽的茎段，切去外植体变色部分，生长极性朝上，接种至腋芽诱导培养基，置于无菌培养室中培养1个周期(20d～30d,下同),每个茎段叶腋处长出2个～3个嫩茎。4.2.3根丛诱导培养将每个茎段腋芽处诱导长出的超过5cm的嫩茎剪下，切去茎尖，平铺接种于根丛诱导培养基上，置于无菌培养室中培养1个周期。每个叶腋处长出1个~3个嫩茎，切除嫩茎茎尖，重新平铺接种于根丛增殖培养基上，继代培养1个～2个周期，直至每个叶腋处长出3个～8个成簇的根丛。4.2.4根丛增殖培养以根丛为单位，将母体茎段切成株高2cm～3cm的根丛，然后接种到根丛增殖培养基上，置于无菌培养室中培养1个周期。取出根丛，分割成2个～4个小根丛，接种于更新的根丛增殖培养基上，继代培养1个～2个周期。4.2.5生根预分化培养将增殖获得的根丛，修剪至株高2cm～3cm,接种至生根预分化培养基中，置于无菌培养室中继代培养1个～2个周期，部分根丛基部分化诱导长出1条～2条肉质根。4.2.6生根培养将生根预分化培养的根丛取出，分割成每个带3个~5个茎的小根丛，株高2cm～3cm,接种入生根培养基中，置于无菌培养室中继代培养1个～2个周期，80%以上根丛基部长出3条～5条粗壮的肉质根，达到移栽标准。4.3组培苗移栽与管理4.3.1移栽基质用富含腐殖质的菜园土6份，泥炭、蛭石、珍珠岩、沙各1份配制移栽基质，或用蔬菜育苗专用基质。4.3.2移栽时间和方法选择温湿度适宜的春秋季，移栽前开瓶炼苗7d～14d,以提高组培苗的移栽成活率。移栽前小心洗净根系上附着的培养基，然后栽入装有基质的营养钵中，并浇透水。4.3.3日常管理3DB36/T1000—2017每天用微喷壶向叶面喷水保湿。芦笋试管苗生长温度在15℃~28℃为宜，高温时遮阳网遮荫，低温时覆盖小拱棚提温保护。成活后适时喷施MS营养液，促进壮苗。日常管理应符合NY/T5231技术规范要选择地势平坦，土壤肥沃、质地沙壤、排灌便利、通风透光的地块，切忌重茬种植。与相邻芦笋田距离不得小于1000m,并用40目防虫网隔离。杂交种生产采取塑料钢架连栋大棚设施栽培，父母本按2:8比例梅花桩式定植，株距50cm,行距1.8m,单行种植。在定植前、幼株期、成株期和开花期鉴定父母本，将杂、病和劣株全部拨除，及时补足亲本。5.5幼株期管理定植后幼株期不采笋，养苗促生，母本所结少量的果实及时摘除。成株期错时留母茎制种。4月上旬，母本每株先留取3枝～4枝健壮母茎；父本则分两期留母茎，第一期与母本同步留母茎，5d～7d后每株再留3枝～4枝健壮母茎，适时摘顶调节花期，以保证父母本花期相遇。4月下旬至5月中上旬进入花期，揭开两侧和棚头薄膜，保留隔离纱网，每4连栋大棚放入1箱中华蜂进行虫媒授粉。8月下旬至9月上旬，待果实熟至深红色，适时采摘，分级收获。摘下果实及时取种子，晒干、过筛分级，包装。种子分级、包装应符合GB/T3543.1技术规范。4(规范性附录)培养基配方A.1腋芽诱导培养基MS+0.2g.L'L-谷氨酰胺+0.1mg.L¹KT+0.1mg.L⁻¹NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂，pH5.8。A.2根丛诱导培养基MS+0.2g.L¹L-谷氨酰胺+0.1mg.L⁻¹KT+3%蔗糖+0.A.3根丛增殖培养基MS+0.2g.L¹L-谷氨酰胺+0.1mg.L⁻¹KT+0.1mg.L嘧啶醇+3%蔗糖+0.8%琼脂，pH5.8。A.4生根预分化培养基MS+