关于体外诊断试剂校准品溯源和质控品赋值的溯源性说明-2

关于体外诊断试剂校准品溯源和质控品赋值的溯源性说明-2.引言在前述的说明中，我们探讨了体外诊断试剂（IVD）领域中溯源性的基本概念、重要性以及相关的国际标准框架。本文作为系列说明的续篇，将更深入地聚焦于校准品的溯源实现与质控品赋值的溯源性保障这两个核心实践环节。旨在为IVD生产企业、临床实验室以及相关监管和技术评估机构提供更为具体和具有操作性的技术指引，以助于提升IVD检测结果的准确性、可靠性和可比性，最终服务于临床诊断与治疗决策的质量提升。一、校准品的溯源：从理论到实践的关键步骤校准品是实现检测系统量值溯源的核心工具，其自身量值的准确性和溯源性直接决定了该检测系统对临床样本检测结果的可信度。1.1校准品的特性与选择考量理想的校准品应尽可能接近临床样本的基质特性，以最大限度减少基质效应带来的偏差。在溯源链条的构建中，首先需要明确校准品的层级。通常，最高层级的是国际公认的一级参考物质（如WHO国际标准品、NIST标准品等），它们具有最高的计量学特性。制造商则会根据这些一级参考物质，采用参考方法或经过严格验证的候选参考方法，制备和标定自己的二级参考物质或内部参考品。这些内部参考品将作为企业内部量值传递的关键节点，用于对工作校准品或最终产品校准品进行赋值。在选择或制备校准品时，除了基质匹配度，还需考虑其均匀性、稳定性以及瓶间差等关键指标。这些特性需要通过严格的实验进行评估和确认，以确保校准品在有效期内能够持续提供稳定可靠的量值。1.2校准品量值传递的实现路径校准品的量值传递是一个严谨的过程，通常遵循“自上而下”的原则。*源头与复现：制造商首先需获取或制备具有明确溯源性的高级别参考物质。对于某些没有国际一级参考物质的analytes，可能需要采用权威的国际公认参考方法，或基于明确科学原理的绝对定量方法（如同位素稀释质谱法）来复现其量值。*层级传递与验证：利用高级别参考物质或参考方法，对制造商内部的次级参考品（通常是更大量、更易获得的批次）进行赋值。这一步骤可能涉及多级传递，每一级传递都需要进行严格的验证，包括方法比对、回收率实验、重复性和中间精密度评估等，以确保量值传递的准确性和可靠性。*产品校准品的赋值：最终用于试剂盒中的产品校准品，其赋值通常是通过将其与制造商的内部参考品进行比对而获得。在这个过程中，需要使用拟上市的检测系统（包括试剂、仪器、操作程序等）进行系列稀释或梯度检测，绘制校准曲线，从而赋予产品校准品特定的量值。这里需要特别注意，赋值过程应能覆盖检测方法的线性范围，并考虑可能的Hook效应等非线性因素。1.3校准品赋值的确认与验证校准品赋值完成后，并非一劳永逸。制造商还需要对赋值结果进行多方面的确认和验证。这包括使用不同批次的内部参考品进行复核，考察不同操作人员、不同时间、不同仪器之间的赋值一致性。此外，通过与其他经过验证的检测系统或外部参考实验室的结果进行比对，也是评估校准品赋值准确性的重要手段。只有经过充分验证的校准品量值，才能确保其在临床应用中的有效性。1.4校准品的稳定性监控校准品的稳定性是其能够在有效期内保持量值准确的前提。制造商必须在产品研发阶段就对校准品的稳定性进行全面研究，包括实时稳定性、加速稳定性、运输稳定性等。在产品上市后，还应建立持续的稳定性监控计划，定期对留样进行检测，确保在整个货架期内，校准品的量值变化在可接受范围内。任何可能影响稳定性的因素，如储存条件、运输方式等，都应在产品说明书中明确告知用户。二、质控品赋值的溯源性：确保质量监控的有效性质控品用于监控检测系统在日常运行中的精密度和准确度，其赋值的溯源性和合理性直接关系到质量控制活动的有效性。与校准品相比，质控品的溯源性要求和实现方式有所不同。2.1质控品的预期用途与赋值要求首先需要明确质控品的预期用途。是用于监控检测过程的精密度，还是同时监控准确度？对于仅用于精密度监控的质控品，其赋值的准确性要求相对较低，有时甚至可以是“未赋值”的，仅需通过实验室内部连续检测建立自身的均值和标准差即可。然而，对于用于评估检测准确度或进行实验室间比对的质控品，则需要具有较好的溯源性和明确的靶值。2.2质控品赋值的常见方法质控品的赋值方法多种多样，选择何种方法取决于其预期用途、可获得的参考资源以及成本效益等因素。*使用已建立溯源性的校准品进行赋值：这是最常用的方法之一。制造商可以使用其用于产品校准的同一套或更高层级的校准品，对质控品进行赋值。通过在待赋值的检测系统上，同时检测校准品和质控品，利用校准曲线计算出质控品的量值。这种方法可以较好地将质控品的量值与检测系统的校准状态联系起来。*溯源至参考物质或参考方法：对于一些关键项目或需要在多实验室间进行质量评价的质控品，可能会采用直接溯源至高级别参考物质（如一级或二级参考物质）或参考方法的方式进行赋值。这通常需要专业的参考实验室或具备相应条件的制造商实验室来完成。*多中心协同赋值（共识赋值）：对于某些复杂基质或难以准确定量的analytes，可能会组织多家经验丰富的参考实验室或高水平临床实验室，使用经过验证的检测方法对同一批次质控品进行检测，然后通过统计方法（如去除离群值后计算均值）获得共识靶值。这种方法可以综合多家实验室的结果，提高赋值的稳健性，但组织成本较高。*“靶值转移”或“衍生赋值”：在某些情况下，质控品的靶值可能是基于与另一个已被广泛认可或具有良好溯源性的质控品的比对而确定的。2.3质控品赋值的考量与局限性在进行质控品赋值时，同样需要关注基质效应。理想的质控品基质应尽可能与临床样本相似，并与校准品的基质相匹配，以减少因基质差异带来的检测偏差。然而，质控品通常为了提高稳定性，会经过特殊处理（如冻干、添加防腐剂等），这可能使其基质特性与新鲜临床样本存在差异。因此，在解释质控结果时，应考虑到这种潜在的局限性。此外，质控品的赋值范围应覆盖临床相关的浓度水平，包括医学决定水平。对于定值质控品，制造商通常会提供预期的靶值和可接受范围（如±2SD或±3SD），实验室在使用时可以参考这些范围，也可以结合自身检测系统的性能，建立内部的可接受标准。2.4定值质控品与非定值质控品的合理应用实验室应根据自身需求选择合适的质控品。定值质控品提供了一个外部的参考靶值，有助于实验室发现系统性偏差。而非定值质控品（或实验室自建靶值的质控品）则能更真实地反映本实验室的日常检测水平，尤其在监控长期精密度方面具有优势。在实际工作中，常常将两者结合使用，以达到更全面的质量控制目的。无论使用何种质控品，其赋值过程都应具有文件记录，并能被追溯和审核。三、总结与展望体外诊断试剂校准品的溯源和质控品的赋值是确保检验结果准确性和可靠性的核心环节，也是IVD产品研发、生产和临床应用中质量体系的重要组成部分。它要求我们不仅要理解溯源性的理论框架，更要掌握其在实践中的具体操作和关键控制点。对于制造商而言，建立并维护一套完善的校准品溯源体系和科学合理的质控品赋值流程，是产品质量的根本保障，也是赢得市场信任的基石。对于临床实验室而言，正确理解和使用具有良好溯源性的校准品和质控品，是保证检验结果质量、提升实验室管理水平的关键。随着检验医学的不断发展和精准医疗的需求日益增加，对IVD试剂