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ICS65.020CCSB16DB43DB43/T1957—2020稻曲病菌分子检测技术规程TechnicalRegulationsforMolecularDetectionofUstilaginoideavirens2020-12-29发布2021-03-29实施湖南省市场监督管理局发布I Ⅲ 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 3 3 4 5请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件起草单位:湖南省植物保护研究所、株洲市农业科学1稻曲病菌分子检测技术规程GB/T6682分析实验室用水规格和阶段有性态为Clavicepsoryzaesativae,属子囊菌害水稻穗部并形成稻曲球,严重影响水稻的产量和稻PCR(PolymeraseChainReaction聚合酶链式反应,是指在DNA聚板,以特定引物为延伸起点,通过变性、退火、延伸等步骤,体外复制出与母链模板DNA互补的子链核糖体基因转录间隔区(InternaltranscribedspacPCR检测仪、凝胶成像仪、土壤取样器、台式离心机、纯水仪、电泳仪、2除特别说明以外,本文件所用试剂均为分析纯,实验用水应符合GB/T6682的规定。浴15min,期间反复摇匀;加入等体积苯酚/氯仿/异戊醇,混匀后摇床轻摇20min;12000rpm/min离3针对水稻稻曲病菌与其他属种病菌ITS序列差异设计了一对特异性引物。UV-F:5’在阳性对照、阴性对照和空白对照结果均正样品经登记和经手人签字后妥善保存。对稻曲病菌PCR检测结果为阳性4(资料性)稻曲病相关资料A.1分布地区稻曲病的发生分布较为广泛,在中国、日本、美国、缅甸、印度、菲律宾等近40个国家均有发生。国内江南、华南、西南及东北稻区已有该病的发生报道。湖南稻区中、晚稻稻曲病发生普遍,尤以中稻发生严重。A.2病状稻曲病主要危害水稻穗部并形成稻曲球(见图A.1)。病菌侵染初期,小穗基部逐渐隆起且呈现白色;随后病菌突破颖壳,膨大,外层被膜包裹;病粒逐渐膨大呈圆球状,淡黄色,外部开裂;稻曲球继续生长膨大,被膜完全破裂,露出病原菌的后垣孢子,形成黄色稻曲球。稻曲球最初为橘黄色,后逐渐加深,变为黄绿色、暗绿色、墨绿色至黑色,最后病粒外层覆盖一层戎状厚垣孢子粉。根据稻曲球总病菌发育程度的不同,从内到外可以分为3层:最里层浅黄色,由密集的菌丝体和大量的厚垣孢子组成;中间层是橘黄色,由菌丝和厚垣孢子构成;最外层墨绿色,由成熟的黑色厚垣孢子和老熟的菌丝组成。图A.1水稻稻曲病菌危害状A.3侵染与病害流行稻曲病的发生流行与多种因素有关,主要包括品种、田间菌源量、气候条件及栽培管理措施等,其中气候条件尤其是水稻孕穗至破口期的湿度条件是影响稻曲病菌侵染的重要因素之一,在水稻孕穗期至破口期,雨量多、日照少利于稻曲病的发生。不同品种对稻曲病菌的抗性也存在差异,一般晚熟品种比早
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