基因工程的应用教学

基因工程的应用专项１基因工程一、植物基因工程硕果累累哪些转基因作物已进入大规模商业化应用阶段?转基因大豆、玉米、棉花和油菜植物基因工程技术重要用于哪些方面?提高农作物的抗逆能力（如抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等）,以及改良农作物的品质和运用植物生产药品等方面.(一)抗虫转基因植物1.虫害给农作物带来了哪些影响?传统农业如何防治害虫?有哪些局限性?2.现在已有哪些抗虫植物问世?3.抗虫基因Bt毒蛋白基因、蛋白酶克制剂基因、淀粉酶克制剂基因、植物凝集素基因等请阅读P18生物资料技术卡,理解某些抗虫基因的抗虫机理。4.抗虫棉的目的基因是什么?目的基因从何而来?5.我国的转基因抗虫棉获得了哪些进展?（二）抗病转基因植物1.什么是病原微生物？有哪些种类？引发生物生病的微生物，重要有病毒、真菌和细菌等2.为什么说常规育种很难哺育出抗病毒的新品种？3.在抗病转基因植物中使用最多的是什么基因？病毒外壳蛋白（coatprotein，CP）基因；病毒的复制酶基因拓展：在抗病毒转基因植物中，为什么使用病毒外壳蛋白基因能够抗病毒侵染？有关病毒外壳蛋白基因(CP基因)导入植物后的抗病毒机理，现在有几个假说。一种假说认为：CP基因在植物细胞内体现积累后，当入侵的病毒裸露核酸进入植物细胞后，会立刻被这些外壳蛋白重新包裹，从而制止病毒核酸分子的复制和翻译。另一种假说认为：植物细胞内积累的病毒外壳蛋白会克制病毒脱除外壳，使病毒核酸分子不能释放出来。然而近来的研究表明，如果将病毒的外壳蛋白的AUG起始密码缺失，使之不能被翻译，或者将外壳蛋白基因变成反义RNA基因，整合到植物细胞染色体上，转基因植物则有较好的抗性。因此，有人认为抗性机理不是外壳蛋白在起作用，而是CP基因转录出RNA后，与入侵病毒RNA之间的互相作用起到了抗性作用。3.在抗真菌转基因植物中使用什么基因？几丁质酶基因和抗毒素合成基因（三）其它抗逆转基因植物1.哪些环境条件会造成农作物低产、减产？盐碱、干旱、低温和涝害等2.盐碱和干旱对农作物的危害与什么有关？细胞内的渗入压调节在抗盐碱和抗干旱作物中使用了什么基因？调节细胞渗入压的基因3.转基因耐寒的烟草和番茄中哪种目的基因提高了其抗寒能力？目的基因从何而来？鱼的抗冻蛋白基因4.抗除草剂基因有何用途？喷洒除草剂时，杀死田间的杂草而不损伤作物（四）运用转基因改良植物的品质人体（或其它脊椎动物）必不可少，而机体内又不能合成的，必须从食物中补充的氨基酸，称必需氨基酸。必需氨基酸共有８种：赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸（甲硫氨酸）、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸。如果饮食中经常缺少必需氨基酸，可影响健康。另外12种氨基酸是人体细胞能够合成的叫做非必需氨基酸。你懂得哪些食品中缺少必需氨基酸？如何用转基因的办法加以改良？将必需氨基酸含量多的蛋白质编码基因导入植物变化必需氨基酸合成途径中某种核心酶的活性转基因延熟番茄的目的基因是什么？控制番茄果实成熟的基因转基因矮牵牛的目的基因是什么？与植物花青素代谢有关的基因转基因蓝玫瑰异想天开能发荧光的热带斑马鱼普通热带斑马鱼是不发荧光的如何让普通热带斑马鱼也发荧光?总结：基因工程在农业上的应用（1）高产、稳产和具优良品质的品种用基因工程的办法能够改善粮食作物的蛋白质含量。如“向日葵豆”植株。（2）抗逆性品种将细菌的抗虫、抗病毒、抗除草剂、抗盐碱、抗干旱、抗高温等抗性基因转移到作物体内，将从根本上变化作物的特性。如转基因抗虫棉。二、动物基因工程前景广阔（一）用于提高动物生长速度——动物品种改良、建立生物反映器、器官移植等导入外源生长激素基因（二）用于改善畜产品的品质举例阐明将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组，转基因牛分泌的乳汁中乳糖的含量大大减低。（三）用转基因的动物生产药品设问:就基因药品而言，最抱负的体现场合是哪里？转基因动物的乳腺。（1）乳腺是一种外分泌器官，乳汁不进入体内循环，不会影响转基因动物本身的生理代谢反映。（2）从乳汁中获取目的基因产物，产量高，易提纯，体现的蛋白质已通过充足的修饰加工，含有稳定的生物活性。（3）从乳汁中源源不停获得目的基因的产物的同时，转基因动物又可无限繁殖。设问:为什么乳腺能成为基因药品最抱负的体现场合呢？将药品蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射等办法，导入哺乳动物的受精卵中，将受精卵送入母体，使其发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后，能够通过分泌乳汁生产所需要的药品，称为乳腺生物反映器或乳房生物反映器。乳腺生物反映器乳腺生物反映器的优点：①产量高；②质量好；③成本低；④易提取。①获取目的基因（例如血清白蛋白基因）②构建基因体现载体（在血清白蛋白基因前加特异体现的启动子）③显微注射导入哺乳动物受精卵中④形成胚胎⑤将胚胎送入母体动物⑥发育成转基因动物（只有在产下的雌性个体中，转入的基因才干体现）。思考:用基因工程技术实现动物乳腺生物反映器的操作过程是如何的？（四）用转基因动物作器官移植的供体运用基因工程对猪的器官进行改造办法：将器官供体基因组导入某种调节因子，以克制抗原决定基因的体现或设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术，哺育出没有免疫排斥反映的转基因克隆猪器官将目的基因导入到动物的受精卵里，目的基因若与受精卵染色体DNA整合，细胞分裂时，该基因随染色体的倍增而倍增，使每个细胞中都带有目的基因，使性状得以体现，并稳定地遗传给后裔，从而获得基因产品。这样一种新的个体，称为转基因动物。总结：什么叫转基因动物？基因工程在畜牧养殖业上的应用重要是什么？繁殖含有抗病能力、高产仔率、高产奶率和高质量的皮毛等优良品质的转基因动物。该过程的重要环节是通过感染或显微注射技术将重组DNA转移到动物受精卵中。1.在传统的药品生产中，某些药品如胰岛素、干扰素等直接从生物体的哪些构造中提取？从生物的组织、细胞或血液中提取。2.传统生产办法的缺点:由于受原料来源的限制，价格十分昂贵。三、基因工程药品异军突起3.可运用什么办法来解决上述问题？运用基因工程办法制造转基因的工程菌，可高效率地生产出多个高质量、低成本的药品。工程菌:用基因工程办法，使外源基因得到高效率体现的菌类细胞株系。基因工程药品涉及：细胞因子（即淋巴因子如白细胞介素—2、干扰素）、抗体、疫苗、激素等胰岛素是治疗糖尿病的特效药。普通临床上使用的胰岛素重要从猪、牛等家畜的胰腺中提取，每100kg胰腺只能提取4－5g胰岛素。用该办法生产的胰岛素产量低，价格昂贵，远不能满足社会需要。1979年，科学家将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌DNA分子重组，并在大肠杆菌内实现了体现。1982年，美国一家基因公司用基因工程办法生产的胰岛素投入市场，售价减少了30%－50%。基因工程药品——胰岛素治疗侏儒症的唯一办法，是向人体注射生长激素。而生长激素的获得很困难。以前，要获得生长激素，需解剖尸体，从大脑的底部摘取垂体，并从中提取生长激素。现可运用基因工程办法，将人的生长激素基因导入大肠杆菌中，使其生产生长激素。人们从450L大肠杆菌培养液中提取的生长激素，相称于6万具尸体的全部产量。基因工程药品——生长激素干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白。干扰素几乎能抵抗全部病毒引发的感染，是一种抗病毒的特效药。另外干扰素对治疗癌症和某些白血病也有一定疗效。传统的干扰素生产办法是从人血液中的白细胞内提取，每300L血液只能提取出1mg干扰素。1980－1982年，科学家用基因工程办法在大肠杆菌及酵母菌细胞内获得了干扰素，是传统的生产量的12万倍。1987年上述干扰素大量投放市场。基因工程药品——干扰素运用微生物生产药品的优越性何在?运用微生物生产蛋白质类药品，是指将人们需要的某种蛋白质的编码基因，构建成体现载体后导入微生物，然后运用微生物发酵来生产蛋白质类药品。有下列优越性：（1）运用活细胞作为体现系统，体现效率高，无需大型装置和大面积厂房就能够生产出大量药品。（2）能够解决传统制药中原料来源的局限性。运用基因工程菌发酵生产就不需要从动物或人体上获取原料。（3）减少生产成本，减少生产人员和管理人员。1、基因治疗概念：四、基因治疗曙光初照把正常基因导入病人体内，使该基因的体现产物发挥功效，从而达成治疗疾病的目的，是治疗遗传病的最有效的手段。（把特定的外源基因导入有基因缺点的细胞中，从而达成治疗疾病的目的）2、实例：将腺苷酸脱氨酶基因转入取自患者的淋巴细胞中，再将这种淋巴细胞转入患者体内。(1)对严重复合型免疫缺点症的治疗1990年9月14日，安德森对一例患ADA缺少症的4岁女孩进行基因治疗。这个4岁女孩由于遗传基因有缺点，本身不能生产ADA，先天性免疫功效不全，只能生活在无菌的隔离帐里。他们将这个女孩的白血球进行基因改造，使有缺点的基因被健康的基因替代，然后把含正常白血球的溶液输入她左臂的一条静脉血管中。在后来的10个月内她又接受了7次这样的治疗，同时也接受酶治疗。后来，她的免疫功效日趋健全，能够走出隔离帐，过上了正常人的生活，并进入普通小学上学。3、基因治疗的类型体外基因治疗：先从病人体内获得某种细胞，进行培养，然后在体外完成基因转移，再筛选成功转移的细胞扩增培养，最后重新输入患者体内。体内基因治疗：直接向人体组织细胞中转移的治病方法。（如将治疗囊性纤维病的正常基因转入患者肺组织）4、基因治疗的发呈现状：处在早期的临床实验阶段5、用于基因治疗的基因种类：正常基因、反义基因和自杀基因DNA分子杂交是基因诊疗最基本的办法之一。当用一段已知基因的核苷酸序列作为探针，与被测基因进行接触，若两者的碱基完全配对成双链，则表明被测基因中含有已知的基因序列。知识回想：基因诊疗五、基因芯片从正常人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就能够得出原则图谱；从病人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就能够得出病变图谱。通过比较、分