参芪扶正注射液对胃癌细胞凋亡与自噬的影响及机制研究

参芪扶正注射液对胃癌细胞凋亡与自噬的影响及机制研究摘要：参芪扶正注射液是一种中药复方制剂，主要成分为人参、黄芪等，具有扶正固本、益气养血的功效。近年来，随着胃癌发病率的逐年上升，其治疗研究也日益受到关注。本文旨在探讨参芪扶正注射液对胃癌细胞凋亡与自噬的影响及其作用机制。关键词：参芪扶正注射液；胃癌细胞；凋亡；自噬；作用机制1引言胃癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率均较高。目前，胃癌的治疗仍以手术切除、化疗和放疗为主，但治疗效果有限。因此，寻找新的治疗策略对于提高胃癌患者的生活质量和生存率具有重要意义。参芪扶正注射液作为一种传统中药复方制剂，近年来在胃癌治疗中显示出一定的潜力。本研究旨在探讨参芪扶正注射液对胃癌细胞凋亡与自噬的影响及其作用机制，为胃癌治疗提供新的思路。2材料与方法2.1实验材料2.1.1细胞株选用人胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823和MGC-803作为实验对象。2.1.2药物与试剂参芪扶正注射液（由北京同仁堂制药有限公司提供）；MTT（噻唑蓝）细胞增殖检测试剂盒（Sigma公司）；AnnexinV/PI双染流式细胞术检测试剂盒（BDBiosciences公司）；JC-1线粒体膜电位检测试剂盒（BeyotimeBiotechnology公司）。2.1.3主要仪器倒置显微镜（Olympus公司）；流式细胞仪（BDFACSCantoII）；荧光显微镜（OlympusBX61）；恒温培养箱（ThermoFisherScientific公司）；低温离心机（Eppendorf公司）。2.2实验方法2.2.1细胞培养将胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823和MGC-803接种于含有10%胎牛血清的RPMI-1640培养基中，置于37℃、5%CO2饱和湿度的培养箱中培养。待细胞贴壁后，用0.25%的胰蛋白酶进行消化传代。2.2.2参芪扶正注射液处理将胃癌细胞分为对照组和不同浓度的参芪扶正注射液处理组。对照组仅给予等体积的生理盐水。参芪扶正注射液处理组分别给予0.1、0.5、1、5、10、20mmol/L的参芪扶正注射液处理。处理时间分别为24、48、72小时。2.2.3MTT法检测细胞活力将胃癌细胞接种于96孔板中，每孔加入1×10⁴个细胞。按照上述方法处理后，每孔加入20μlMTT溶液(5mg/ml)，继续培养4小时后终止培养。弃去上清液，每孔加入150μlDMSO溶解结晶，使用酶标仪测定吸光度值(A)，计算细胞存活率。2.2.4AnnexinV/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡将胃癌细胞接种于6孔板中，每孔加入1×10⁶个细胞。按照上述方法处理后，收集细胞，采用AnnexinV/PI双染法检测凋亡细胞比例。具体操作步骤按照AnnexinV/PI双染流式细胞术检测试剂盒说明书进行。2.2.5JC-1线粒体膜电位检测将胃癌细胞接种于96孔板中，每孔加入1×10⁴个细胞。按照上述方法处理后，收集细胞，采用JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测线粒体膜电位变化。具体操作步骤按照JC-1线粒体膜电位检测试剂盒说明书进行。3结果3.1参芪扶正注射液对胃癌细胞活力的影响结果显示，与对照组相比，不同浓度的参芪扶正注射液处理后，胃癌细胞的活力均有所降低。其中，0.5mmol/L参芪扶正注射液处理组的细胞活力下降最为显著，而10mmol/L参芪扶正注射液处理组的细胞活力下降相对较小。这表明参芪扶正注射液对胃癌细胞具有一定的抑制作用。3.2参芪扶正注射液对胃癌细胞凋亡的影响通过AnnexinV/PI双染流式细胞术检测发现，与对照组相比，不同浓度的参芪扶正注射液处理后，胃癌细胞的凋亡率均有所增加。其中，0.5mmol/L参芪扶正注射液处理组的凋亡率增加最为显著，而10mmol/L参芪扶正注射液处理组的凋亡率增加相对较小。这表明参芪扶正注射液能够促进胃癌细胞的凋亡。3.3参芪扶正注射液对胃癌细胞自噬的影响通过JC-1线粒体膜电位检测发现，与对照组相比，不同浓度的参芪扶正注射液处理后，胃癌细胞的自噬水平均有所增加。其中，0.5mmol/L参芪扶正注射液处理组的自噬水平增加最为显著，而10mmol/L参芪扶正注射液处理组的自噬水平增加相对较小。这表明参芪扶正注射液能够促进胃癌细胞的自噬。4讨论本研究发现，参芪扶正注射液能够有效抑制胃癌细胞的生长和增殖，并促进其凋亡和自噬。这一发现为参芪扶正注射液在胃癌治疗中的应用提供了理论依据。然而，关于参芪扶正注射液的作用机制仍需进一步深入研究。此外，本研究仅针对三种胃癌细胞株进行