甲流采样专题知识讲座培训课件

甲型H1N1流感病毒采样的流程⑴打开消毒通道后（消杀人员）作用一定时间⑵县区做好三级防护的检验人员进入现场⑶取样（鼻咽拭子/吸取物或者鼻腔冲洗液/吸取物）⑷将取好的样品进行A类包装⑸将采样人和包装物表面消毒⑹采样人脱去防护装备⑺移交市疾控中心取样人员⑻填写样品交接单⑼专车运送到市疾控中心检验科⑽结果反馈第一节、采样的技术要求中国CDC的建议⒈对属于感染甲型（H1N1）流感病毒疑似病例的临床标本进行采样工作要进行三级个人防护。诊断性实验工作，在BSL2实验室内进行。所有样本操作均应在生物安全柜（BSC）内进行，三级个人防护。⒉对采集自属于感染甲型（H1N1）流感病毒疑似病例的临床标本进行的病毒分离工作，应在BSL3实验室内进行，并遵循三级个人防护。病例标本采集具有与对属于感染甲型（H1N1）流感病毒疑似病例的临床标本进行采样工作的生物安全防护水平相适应的设备，包括个人防护用品、防护材料、器材和防护设施等具有掌握相关专业知识和操作技能的工作人员；具有有效的防止病原微生物扩散和感染的措施；具有保证病原微生物样本质量的技术方法和手段。采集过程中应对样本的来源、采集过程和方法等应作详细记录。病例标本采集推荐采集的呼吸道标本：疾病发病后应尽快采集如下标本：鼻咽拭子/吸取物或者鼻腔冲洗液/吸取物。如果不能收集这些标本，可合并鼻拭子与口咽拭子。气管插管的病人也应收集气管吸取物。标本应置于无菌病毒运输液（VTM），并立即用冰块或冰排保存或置于4℃（冰箱），并马上运送至实验室。病例标本采集理想的情况下，标本应使用头部为合成纤维的拭子（例如，聚酯纤维），用铝或塑料做杆。不推荐棉拭子和木杆。不能用海藻酸钙（Calciumalginate）做的拭子收集标本。标本采集管应包含3毫升病毒运输（例如，含有蛋白质稳定剂，阻止细菌和真菌生长的抗生素，缓冲液）。采样液的配制常用的采样液有：普通肉汤，PH7.4-7.6的Hank’s液，Eagel’s细胞液或水解乳蛋白溶液采样液的抗生素含量抗生素名称终浓度庆大霉素0.1mg/ml抗真菌素2Ug/ml临床标本储存所有呼吸道标本应保存在4℃，并尽快放置在‐70℃如果没有‐70℃度冰箱，标本应保存在4℃，但不应超过4天。

第二节、采样人的人个防护人感染甲型（H1N1）流感病毒采样人的个人防护要求生物安全等级三级个人防护（包括临床标本和病毒分离物）推荐的个人防护装备（要基于特定场所的风险评估）⒈呼吸防护装备—检测合格的N95呼吸器或更高级别的防护装⒉鞋套⒊前封式手术服⒋双层手套⒌眼部防护装备（护目镜或面罩）个人防护装备定义个人防护装备（PersonalProtectiveEquipment,PPE），是指用于防止工作人员受到物理、化学和生物等有害因子伤害的器材和用品。在生物安全实验室中，这些器材和用品主要是保护实验人员免于感染性材料的各种方式的暴露，避免实验室相关感染。一、各级生物安全实验室的个人防护要求BSL－1实验室（一级防护）工作人员进入实验室应穿工作服，实验操作时应戴手套，必要时佩戴防护眼镜。离开实验室时，工作服必须脱下并留在实验区内。工作服应先消毒，后洗涤。BSL－2实验室（二级防护）符合BSL－1的要求工作人员进入实验室时，应在工作服外加罩衫或穿防护服，戴帽子、口罩。当手可能接触感染材料、污染表面或设备时应戴手套，不应戴着手套离开实验室。一次性手套不得清洗和再次使用。当微生物操作不可能在生物安全柜内进行，而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置。BSL－3实验室（三级防护）符合BSL－2的要求。在进行感染性组织培养、可能产生感染性气溶胶操作时，应使用个体防护设备。当不能安全有效地将气溶胶限定在一定范围内时，应使用呼吸保护装置。工作人员在进入实验室前，应在专用更衣室穿着背开式或其他防护服。不得穿工作服离开实验室。再次使用的工作服必须先消毒后清洗。工作时必须戴手套（两付为宜），一次性手套应先消毒后丢弃。在实验室中应配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。可配备应急药品。所有BSL-3实验室的物品应按照相应的规定，正确消除污染，方可离开实验室。二、甲型（H1N1）流感病毒采样时个人防护装备一、眼睛防护装备1、安全眼镜和护目镜采样时必须采取眼睛防护措施。佩戴侧面护罩的安全眼镜可以达到防护目的。当进行可能发生化学和生物污染物质溅出的实验时，应佩戴护目镜。在进行潜在爆炸和使用或混合强腐蚀性和强酸溶液时，应佩戴面罩。二、头面部防护装备1、N95关于N95标准的澄清：N95是美国国家职业安全与健康研究所NIOSH呼吸器标准42CFR84中对过滤元件过滤效率9个等级中档次最低的一级；只有获得NIOSH认证的呼吸器才能标注NIOSHN95，单独标注N95说明没有获得NIOSH认证；如果发现有产品“自称”符合N95，或自行标注N95，都是企业行为；标注NIOSHN95不仅象征产品性能级别，同时也象征制造商对产品质量的保证。2、防护面罩对整个脸部进行防护：必须使用一种标准的防护面罩以罩住整个脸部，或使用口罩加护目镜（或口罩加安全镜）。保护部分面部：配戴安全眼镜或护目镜，但必须戴口罩以保护部分面部或配戴标准防护面罩。注意：在使用防护面罩时常常同时佩带安全镜或护目镜或口罩；实验完毕后必须先摘下手套，然后用手卸下防护面罩。3、防护帽在采样中佩戴简易防护帽可以保护工作人员。避免化学和生物危害物质飞溅至头部(头发)所造成的污染。要求：工作人员在采样操作时应佩带防护帽。三、呼吸防护装备当实验室操作不能安全有效的将气溶胶限定在一定的范围内，要求使用呼吸防护装备。呼吸防护的有效装备为防护面具，主要有正压面罩、个人呼吸器和正压防护服三种。使用和维护指导书包括在相应活动的安全操作程序手册中，并按指导书及培训的要求使用。四、手部防护装备手套手套应在实验室工作时使用；在接触感染性物质（血液、体液、分泌液、渗出液、以及接触粘膜和非完整皮肤时），必须使用合适的手套以保护工作人员避免受到污染物溅出或生物污染的事故所造成的损害；手套被污染，应该尽可能早的脱下，消毒后丢弃手套应按所从事操作的性质符合舒适、灵活、握牢、耐磨、耐扎和耐撕的要求，并应对所涉及的危险提供足够的防护；对实验室工作人员进行手套选择、使用前及使用后的配戴及摘除等培训；一次性手套不得重复使用；一次性手套必须先消毒后丢弃。一般情况下，佩戴一副手套即可（BSL-1实验室）；若在生物安全柜中操作感染性物质时（BSL-2和BSL-3实验室）应该佩戴两副手套；五、躯体防护装备1、防护服（实验服、隔离衣、连体衣、围裙以及正压防护服）：2、正压防护服一般在BSL-4中使用六、足部防护装置穿鞋套或靴套；BSL-3和BSL-4实验室要求使用专用鞋卸下个人防护装备的顺序：①外层手套；②面罩或护目镜；③隔离衣；④面罩或防毒面具和防护帽；⑤鞋套（可再戴新手套）；⑥内层手套。第三节、样品的包装与运输标本包装内层容器：样品采用防水、防漏的内层容器包装并贴上指示内容物的标签；中层包装：内层容器和中层容器间应放置足量的吸水性材料，以便内层容器打破或泄漏时，能吸收溢出的所有液体；外层包装：将中层容器固定在硬质外层容器中以免中层容器在运输过程中受到物理性损坏。甲型（H1N1）流感病毒包装运输的生物安全要求从疑似或确诊病例中直接采集的呼吸道标本（拭子）、血标本、甲型（H1N1）流感病毒培养产物（如病毒分离株）必须按“

A类感染物质”，用UN2814包装运输。A类物质运输人员必须接受过特别培训。B类物质运输人员则无特别培训的要求。•如果运输物品中还包括其他危险品（如液氮或干冰），则运输人员在运输这些物品前应接受过相应的培训。•《危险品运输指南》可从在WHO网站上获得。该指南包括感染性物质的分类、证明、标记、标签、包装等相关内容。建议运货人按照《危险品运输指南》的相关要求执行。个别航空公司可能会遵循本公司较国际通用的运输条例更严格的规定。感染性物质是那些已知或有理由认为含有致病原的物质。致病原是指能使人或动物感染疾病的微生物（包括病毒、细菌、支原体、衣原体、立克次体、放线菌、真菌和寄生虫等）和其他因子，如朊病毒（prions）。国际民航组织《危险物品航空安全运输技术细则》中将感染性物质分为A、B两类。

A类传染性物质包装要求包装系统包括：防水的主容器，防水的辅助包装和强度满足其容积、质量及使用要求的刚性外包装。主容器和辅助包装，必须能承受在-40℃至+55℃温度范围内95kPa的内部压力而无渗漏A类传染性物质外包装要求外包装外部尺寸，最小边长不小于100mm。外包装必须标明UN2814（或UN2900）标记。标记背景颜色应差异明显，确保清晰可见，易于识别。标记是以45º角度设置的正方形（菱形），其每条边的边长至少为50mm，每条边线的宽度至少为2mm；字母和数字高度至少为6mm。同时还应标明联系人姓名、地址和电话号码。字体（字母、数字）高度不小于6mm。A类传染性物质内包装要求主容器必须装在辅助包装中，使之在运输过程中不被破损、刺穿或将内容物泄漏在辅助包装中。必须使用适当的衬垫材料将辅助包装安全固定在外包装中。内容物的任何泄漏都不得破坏衬垫材料或外包装的完好性。多个易碎的主容器装入一个单一的辅助包装时，必须将他们分别包裹或隔离，以防彼此接触。

A类传染性物质包装要求除固态感染性物质外，必须在主容器和辅助包装之间填充足量的吸附材料，确保意外泄漏时能吸收主容器中的所有内容物，并保持衬垫材料或外包装的完好性。完整的包装必须能通过《危险物品航空安全运输技术细则》6;6.2中规定的跌落试验，跌落高度不低于1.2m。

B类传染性物质包装要求包装系统包括：主容器、辅助包装和刚性外包装。包装材料必须能承受运输过程中的震动与负载。容器结构和密封状态能防止在运输过程中由于震动、温度、湿度或压力变化而造成的内容物漏失。主容器必须装在辅助包装中，使之在运输过程中不被破损、刺穿或将内容物泄漏在辅助包装中。必须使用适当的衬垫材料将辅助包装安全固定在外包装中。内容物的任何泄漏都不得破坏衬垫材料或外包装的完好性。B类传染性物质包装要求多个易碎的主容器装入一个单一的辅助包装时，必须将他们分别包裹或隔离，以便防止彼此接触。外包装至少有一个大于100mm×100mm的表面。完整的包装必须能通过《危险物品航空安全运输技术细则》

B类传染性物质包装要求外包装必须张贴UN3373标记。标记背景颜色应差异明显，确保清晰可见，易于识别。标记是以45º角度设置的正方形（菱形），其每条边的边长至少为50mm，每条边线的宽度至少为2mm；字母和数字高度至少为6mm。外包装上临近菱形标记的部位必须表明运输专用名称“Diagnosticspecimen”（诊断标本）“Clinicalspecimen”(临床标本)或“Biologicalsubstance,CategoryB”（生物物质B类）。同时还应标明联系人姓名、地址和电话号码。字体（字母、数字）高度不小于6mm。

第四节、采样后医疗废物的消毒与处理医疗废物是指医疗卫生机构在医疗、预防、保健以及其它相关活动中产生的具有直接或间接感染性、毒性以及其他危害性的废物。

医疗废物处理原则：按生物安全规定的方式包裹避免处理过程中伤害人员或破坏环境高压蒸汽灭菌是首选方法及时收集按类别分置于防漏、防锐器穿透的专用包装物或密闭的容器包装物或容器应有明显的警示标识和说明及时交由医疗废物集中处置单位处置。消毒剂的使用适当的消毒剂，包括：70%酒精5%来苏尔10%漂白液其他：流感病毒为一种带囊膜病毒，故对乙醚、氯仿、丙酮等有机溶剂敏感。第五节、实验室检测技术报告参考的技术指南因为我国目前尚未发现人感染甲（H1N1）流感病毒，而且目前我们尚未获得此次甲型（H1N1）流感的病毒和核酸，而美国，墨西哥等国已有确诊病例，目前实验室检测方面我们主要参照世界卫生组织和美国疾控