DB53T 1129-2022 半闭弯尾姬蜂室内饲养技术规程

ICS65.020CCSB47532022-08-12发布云南省市场监督管理局发布DB53/T1129—2022I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由云南省农业科学院提出。本文件由云南省农业标准化技术委员会(YNTC07)归口。本文件起草单位：云南省农业科学院农业环境资源研究所。本文件主要起草人：张红梅、陈福寿、王燕、谌爱东，李向永、尹艳琼、赵雪晴、刘莹，徐兴才。DB53/T1129—20221半闭弯尾姬蜂室内饲养技术规程本文件规定了采用小菜蛾幼虫室内饲养半闭弯尾姬蜂的术语和定义、试剂和材料、设备与设施、饲养前准备、饲养、质量评价等内容。本文件适用于以小菜蛾幼虫为寄主繁殖半闭弯尾姬蜂的室内饲养。2规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1半闭弯尾姬蜂DiadegmasemiclausumHellen属膜翅目(Hymenoptera)，姬蜂总科(Ichneumonoidea)姬蜂科(Ichneumonidae)内寄生昆虫，是小菜蛾幼虫期一种重要的内寄生蜂。3.2接蜂Theprocessofwaspstohostlarvaeenvironment将半闭弯尾姬蜂引入到小菜蛾幼虫的过程。3.3接蜂比ProportionoffemalewaspsofDBMlarvae半闭弯尾姬蜂雌蜂与寄主昆虫小菜蛾幼虫的数量比例。4试剂、材料与设备与设施4.1试剂、材料福尔马林消毒液、寄主植物种子（甘蓝）、吸虫管、蜂蜜水、产卵锡箔。4.2设备冷藏箱（可控温2℃~6℃)、加湿器、加热器、光照培养箱、温湿度记录仪、计数器、温度计、高压灭菌锅、紫外灯、养虫笼、羽化透气盒等。4.3设施4.3.1小菜蛾饲养室小菜蛾饲养室应满足以下条件：DB53/T1129—20222——温度25℃±2℃,湿度60%～75%，光周期L：D=14：10；——内置养虫笼、养虫架；——养虫笼，以长25cm、宽30cm、高25cm为宜，纱网80目以上；——养虫架，以长125cm，宽60cm、高160cm为宜的角钢架，用阳光板分成3层，每层高50cm，每层放置10片～12片甘蓝或十字花科植株。4.3.2半闭弯尾姬蜂饲养室半闭弯尾姬蜂饲养室应符合以下要求：——温度22℃±2℃,湿度60%～75%,光周期L:D=——饲养室内置养虫笼、养虫架；——养虫笼，以长125cm、宽60cm、高50cm为宜，纱网80目以上，四角固定在养虫架的四角；——养虫架同4.3.1。5饲养前准备5.1寄主植物准备5.1.1寄主植物甘蓝类或十字花科蔬菜。5.1.2选苗选择5叶龄～6叶龄苗，叶片肥厚，根系发达，无病虫害。5.1.3水肥管理5.1.3.1每盆栽1株苗，浇足水分，保持土壤湿润。5.1.3.2追肥应遵循少量多次的原则，宜浇肥水2次～3次。5.1.4病虫害管理及时清除带病虫残叶或选择高效低毒的杀虫剂进行防治，使用的方法参照药剂说明书。在植株使用前15d不使用任何杀虫剂。5.1.5供饲植株准备宜盆栽，待甘蓝等长至10片～12片叶时作为供饲植株。5.2小菜蛾和半闭弯尾姬蜂准备5.2.1采集田间采集小菜蛾幼虫、蛹及被半闭弯尾姬蜂寄生的小菜蛾幼虫和蛹。5.2.2提纯复壮DB53/T1129—202235.2.2.1将采集回来的小菜蛾幼虫接到甘蓝植株上，置于养虫笼中，待发育至蛹中后期可识别小菜蛾蛹还是半闭弯尾姬蜂蛹时，分拣出小菜蛾蛹和半闭弯尾姬蜂蛹。5.2.2.2小菜蛾蛹羽化，成虫产卵，经过2代～3代，续代繁殖提纯复壮，筛选出健康的小菜蛾。5.2.2.3半闭弯尾姬蜂蛹羽化后让成虫寄生小菜蛾幼虫，经过2代～3代，续代繁殖提纯复壮，筛选出健康的半闭弯尾姬蜂。5.2.3产卵锡箔准备5.2.3.1将新鲜甘蓝菜叶洗净，兑水制成甘蓝汁液匀浆，甘蓝汁液浓度10%～20%。5.2.3.2在高压灭菌锅灭菌30min，压力0.1MPa，冷却后用过滤的甘蓝汁液浸泡产卵锡箔2h以上。5.2.3.3取出锡箔晾干集中保存在0℃以下冰箱备用。5.3寄主昆虫饲养5.3.1产卵5.3.1.1根据小菜蛾幼虫扩繁计划，定量放入小菜蛾蛹，以100头小菜蛾蛹为例，可扩繁获得2000头～3000头小菜蛾幼虫。5.3.1.2当小菜蛾的蛹羽化为成虫后，提供15%的蜂蜜水作为成虫的营养补充液。5.3.1.3在养虫笼内悬挂4条～5条准备好的并带有皱褶的产卵锡箔诱集小菜蛾成虫产卵，养虫笼用黑布遮盖，每天更换养虫笼内产卵锡箔和蜂蜜水。5.3.2孵化5.3.2.1取带有小菜蛾卵的锡箔放入福尔马林消毒液中浸泡5min，然后用蒸馏水漂洗3次，晾干后在冷箱内保存备用。5.3.2.2在备用的甘蓝等植株叶片上接卵，每株接小菜蛾卵粒400粒～500粒进行发育孵化。5.3.3饲养将接卵甘蓝植株放在小菜蛾饲养室饲养，小菜蛾幼虫发育到2龄～3龄时，1/2幼虫进行小菜蛾续代繁殖，1/2用于半闭弯尾姬蜂雌蜂接蜂。5.3.4蛹的收集每天观察室内小菜蛾幼虫的发育情况，待90%以上幼虫化蛹后开时收集小菜蛾蛹，直至全部化蛹完毕。收集的蛹一部分用于新一轮的繁殖，另一部分放入冷藏箱内贮存。5.3.5寄主昆虫的贮存贮存温度4℃±1℃,贮存不超过10d。不与有毒、有害物品混合贮存。6半闭弯尾姬蜂的饲养6.1采集从田间采集小菜蛾幼虫、蛹，饲养发育到蛹中后期识别半闭弯尾姬蜂蛹，或采集半闭弯尾姬蜂蛹。6.2提纯复壮DB53/T1129—20224见5.2.2。6.3羽化识别为半闭弯尾姬蜂的蛹放入羽化盒中羽化成蜂，羽化盒内盖上涂抹适量蜂蜜。6.4寄生6.4.1在半闭弯尾姬蜂饲养室，将的带有2龄～3龄小菜蛾幼虫的盆栽甘蓝移至养虫笼内。6.4.2将羽化的半闭弯尾姬蜂放入养虫笼内，接蜂比宜为1:40～1:50，半闭弯尾姬蜂雌雄数量比为1:1。6.4.3接蜂3d后，取出带有被寄生过的小菜蛾幼虫的甘蓝植株放在养虫架发育生长。6.4.4重复6.4.2至6.4.3，接蜂2批～3批次。6.4.5在养虫笼放置浓度为15%蜂蜜水喂养半闭弯尾姬蜂。6.4.6根据取食情况适时替换甘蓝寄主植物。6.5蛹的收集从养虫笼内取出被寄生的小菜蛾幼虫，发育8d～10d可根据外观形态明显区分小菜蛾和半闭弯尾姬蜂蛹时，把小菜蛾蛹和半闭弯尾姬蜂蛹分拣收集到不同的培养皿中，小菜蛾和半闭弯尾姬蜂蛹的外观形态见附录A。6.6蛹贮存半闭弯尾姬蜂蛹贮存，温度4℃±1℃,贮存不超过10d，不与有毒、有害物品混合贮存，并适时检查蛹。7羽化率检验7.1抽样从每批次半闭弯尾姬蜂蛹中随机抽取5个点的样品，每个点抽取不低于100头半闭弯尾姬蜂蛹，记录接蜂日期、抽样日期。7.2羽化率计算抽样的半闭弯尾姬蜂蛹羽化结束后1d～2d，清点半闭弯尾姬蜂蛹的羽化头数，按式（1）计算羽化率。式中：ER—羽化率，单位为百分率（%）；N1—羽化的半闭弯尾姬蜂蛹数量，单位为头；N2—抽检半闭弯尾姬蜂蛹的总数量，单位为头。8寄生率检验8.1抽样DB53/T1129—20225各批次均应抽取样本，以株为单位，随机抽取5个点的样品，每个点抽取不得低于5株，并记录批次、接蜂日期、抽样日期。8.2寄生率计算幼虫被寄生发育为半闭弯尾姬蜂蛹，未被寄生发育为小菜蛾蛹，以株为单位，统计半闭弯尾姬蜂蛹头数和未被寄生小菜蛾蛹数量，按式（2）计算寄生率。式中：PR—寄生率，单位为百分率（%）；M1—半闭弯尾姬蜂蛹数量，单位为头；M2—小菜蛾蛹的数量，单位为头。9质量评价按表1评价半闭弯尾姬蜂的寄生率与羽化率质量。表1半闭弯尾姬蜂的寄生率与羽化率质量评价DB53/T1129—20226（资料性）小菜蛾蛹半闭弯尾姬蜂蛹观形态A.1小菜蛾蛹蛹长0.5cm～0.8cm，颜色变化较大，刚化蛹时为深绿色，后变为绿色至灰褐色，蛹被稀疏网状的茧包裹，呈灰白色，两端通透。蛹将羽化时复眼变黑，翅芽上三度曲波线明显可见，触角、足、胸部颜色变深，整蛹呈褐色或黑色。有些蛹背面两侧