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DB22DB22/T2629—2017猪肠道微孢子虫检测聚合酶链式反应Detectionmethodofpolymerasechainreaction(PCR)ofEnterocytozoonbieneusiinpigs2017–06-12发布2017-08-12实施吉林省质量技术监督局发布I1GB/T6682分析实验室用水规4.1.210mg/mL溴化乙锭(EB)溶液4.1.41.5%琼脂糖凝胶(见附录A4.1.9标准分子量DL200025’-GATGGTCATAGGGATGAAGAGCTT-3’5’-AATACAGGATCACTTGGATCCGT-3’5’-AGGGATGAAGAGCTTCGGCTCTG-3’5’-AATATCCCTAATACAGGATCACT-3’4.2.1离心管(15mL、50mL、4.2.3称量纸弃上清;沉淀用25mLddH2O重悬,加入25mLCs吸取2mL表层液体转入15mL离心管中,加ddH2O至13mL,平衡后室温1500×g离心34制备1.5%琼脂糖凝胶板(见附录A.3)。取8μL第二轮PCR产物,与2μL上样缓冲液混合,加入检测过程中的废弃物及个人防护,应按GB15相关试剂配制氢氧化钠(1mol/LNaOH)三羟甲基氨基甲烷(Tris)242.0g6(规范性附录)B.2PCR产物测序结果AGGGATGAAGAGCTTCGGCTCTGAATATCTATGGCTAGATAAAGTACAAGTCGTAACAAGGTTTCAGTTGGTGAAGGATCATTTTCAGTTTTTGGGGTGTGGGTATCGGAATGTGTGGTAGGTGATGTGTGTGTGTATGGGGCACCAGCGGTGCGGTGGTGTGTGCAGGCGTGAGAGTGTATCTGCAAGTGTGAGGGATGTGGGTGCATGGTTCAATGTGGAATAGTGGGATTGGTACGTGATGGTTGGATGGGGGAATGA
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