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文档简介
核酸序列分析内容:1、污染序列的去除2、阅读框架(Openreadingframe,ORF)3、对分子量、碱基组成、碱基分布、序列转换4、酶切位点的识别和分析重点1.DNAM和PRIMER软件的使用1.一、污染序列的去除序列污染:指一个被检索序列(如测序的序列)含有一个外源序列因而无法反映其来源物种的真实遗传信息序列污染的来源1.载体(vecscreen)2.接头和PCR引物3.转座子和插入序列4.样品纯度不高2.基因序列载体序列引物引物如何识别和去除载体序列和判断引物序列等,vecscreen3.如何识别和去除载体序列和判断引物序列等,1、通过align比对2、通过vecscreen操作4.1、通过align比对可找出扩增gfp的引物
gfp720bp但突变的gfp762bp5.2、通过vecscreen操作找出下列序的载体序列
GCTCCACCGCGGTGGCGGCCGCTCTAGAACTAGTGGATCCCCCGGGGAGAGCGAAATGCTTGATGCTTTTTCTAGAGCTGTAGTTTCAGCAGATGCTAGCACTTCTACCGTATCTGATATTGCTGCTCTGAGAGCCTTTGTTGCTAGTGGTAACAGACGTTTGGATGCTGTAAATGCGATCGCAAGCAACGCTAGCTGCATGGTTTCTGATGCTGTAGCTGGAATGATCTGCGAAAACCAAGGTTTAATCCAAGCTGGTGGTAACTGCTATCCTAACCGTCGTATGGCTGCTTGCTTACGCGATGCAGAAATCGTCTTACGCTATGTAACCTACGCTCTATTAGCTGGTGACGCTTCAGTTCTAGATGATCGTTGCTTAAACGGTTTGAAAGAAACCTACGCTGCTCTAGGCGTACCCACCACCTCTACAGTACGTGCCGTTCAAATCATGAAGGCTCAAGCTGCTGCTCACATTCAAGACACTCCCAGCGAAGCTCGTGCTGGTGCCAAATTGCGTAAGATGGGAACCCCCGTTGTTGAAGATCGTTGCGCTAGCTTAGTTGCTGAAGCTTCTAGCTACTTCGAATCCGCCGTAATCTCCTGCTTTTGAGCTAATTGGATTGGCCACTTTCCAAACTCAACTCACTCCGAGGGGGGGGGCCCCGGTAACCAATTCCGCCCCTATAANTGAGTCGTATTACCCCCCGCTCCNCTGGGCCCGTCTTTT6.NCBI首页的sequenceanalysis7.8.9.10.11.二、阅读框架(Openreadingframe,ORF)ORF(从起始密码子到终止密码子)ATGTAATAGTGA双链,共有潜在的6个阅读框架原因:+,-,链都可以是编码链三联体密码子从1开始,从2开始,从3开始,从4开始,相当于从1开始最长的阅读框架可能是的通过NCBI的ORFfinder操作12.GCTCCACCGCGGTGGCGGCCGCTCTAGAACTAGTGGATCCCCCGGGGAGAGCGAAATGCTTGATGCTTTTTCTAGAGCTGTAGTTTCAGCAGATGCTAGCACTTCTACCGTATCTGATATTGCTGCTCTGAGAGCCTTTGTTGCTAGTGGTAACAGACGTTTGGATGCTGTAAATGCGATCGCAAGCAACGCTAGCTGCATGGTTTCTGATGCTGTAGCTGGAATGATCTGCGAAAACCAAGGTTTAATCCAAGCTGGTGGTAACTGCTATCCTAACCGTCGTATGGCTGCTTGCTTACGCGATGCAGAAATCGTCTTACGCTATGTAACCTACGCTCTATTAGCTGGTGACGCTTCAGTTCTAGATGATCGTTGCTTAAACGGTTTGAAAGAAACCTACGCTGCTCTAGGCGTACCCACCACCTCTACAGT13.ATGCGAAATGCGTAA………ATGCGAAATGCGTAA……….从1开始读ATGCGAAATGCGTAA………从2开始读ATGCGAAATGCGTAA………从3开始读ATGCGAAATGCGTAA………从4开始读14.NCBI首页的sequenceanalysis15.16.17.18
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