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222023-09-28发布DB22/T3494—2023I请注意本文件中的某些内容可能涉及专利。本文件的DB22/T3494—20231茄子抗褐纹病鉴定技术规程本文件适用于茄子品种资源对茄子抗褐纹病的室内鉴定由半知菌类真菌茄褐纹拟茎点霉（有性态Diaporthevexans、无性4程序框21.接种体制备(见第5章)1.接种体制备(见第5章)2.育苗(见第6章)3.接种(见第7章)4.抗病性鉴定(见第8章)采用常规组织分离法。从典型病斑的病健交界处，用无菌刀片切取5mm×10mm的病组织，75%乙醇消毒30s,无菌水冲洗3次～4次，用无菌滤纸吸干组织块表面水分，置于马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基中，每皿接入3块～5块，用封口膜将培养皿封口后置入25℃恒温箱中暗培养。待长出分生对经过柯氏证病法则验证的有致病性的分离物进行形态学观察。与茄子褐纹病菌(见附录A)形态一致的分离物编号，用滤纸片法-20℃冰箱长期保存菌种。5.3.1将菌种转接于PDA培养基，置于25℃恒温箱中培养7天后，用内径为6mm的打孔器从菌落边缘打取菌饼，转接于PDA平板，培养至21天长出分生孢子器。在光学显微镜下使用血球计数板对菌悬液中的孢子进行计数，配成1×10⁷个/mL的孢子悬浮液待用。6.1将试验种子放入10%磷酸三钠溶液，或0.1%高锰酸钾溶液中浸种20分钟后，用清水冲洗4次，放在常温条件下浸种10小时～12小时，然后放在28℃~30℃条件下催芽，每10小时用温水DB22/T3494—2023330℃,夜间温度15℃~17℃,其他正常管理，育苗期间不使用任何杀菌剂。6.3幼苗应生长健壮、整齐一致，待长至5叶期用于苗期光照14小时，采用灌根浇水，保持土壤湿度近饱和，接种期间温度控制在24℃~28℃范围内。DB22/T3494—20234依据鉴定材料的病情指数（DI）平均值，确定抗性水平，划分标感病对照材料达到其相应感病程度（DI≥25）时，该批次鉴定视DB22/T3494—20235茄褐纹拟茎点霉（有性态Diaporthevexans、无性态Phomopsisvexans）A.2形态描述A.2.1茄褐纹拟茎点霉病斑上产生的黑色小点是病菌的分生孢子器。初埋生于寄主表皮下，成熟后突破表皮而外露。孢子器单独着生于子座上，呈凸透镜形，具有孔口，其大小为（55～400）μm×（45~a)椭圆形或纺锤形，单孢无色，大小为（5～8）μm×(2～8）μm，通常内含2个～3个油球；b)呈细长线状，并在一端弯曲成钩，单孢无色，大小为（12.2～28.0）μm×（1.2～2.0）μm。A.3病情级别划分A.4病原菌培养性状A.4.2挑取黑色分生孢子器，在载玻片上压片镜检，可观察到椭圆形分生孢子器和分生孢子，孢子尺6a)茄子褐纹病菌分生孢子器品种名称病情级别1级3级5级9级播种时间：接

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