药物的杂质检查2

药物的杂质检查第1页，共122页。优选药物的杂质检查第2页，共122页。一、物理法1、嗅味及挥发性的差异：根据杂质的特殊嗅味来判断该杂质的存在。挥发性药物中检查不挥发性杂质。第3页，共122页。2、颜色的差异无色药物中有色杂质的检查，检查供试品的颜色，来控制有色杂质的量。3、溶解行为的差异利用药物溶于某种溶剂而杂质不溶，或者反之。第4页，共122页。二、化学法1、酸碱性的差异利用药物中杂质的酸性或碱性，来进行检查。2、氧化还原性的差异3、杂质与一定试剂产生沉淀第5页，共122页。

4、杂质与一定试剂产生颜色A、不得产生颜色B、目视比色C、分光光度法5、杂质与一定试剂产生气体氰化物杂质的检查（1）改进普鲁士蓝法：5μg（2）气体扩散三硝基苯酚锂法:0.5μg第6页，共122页。三、旋光法检查光学异构体，通过测量旋光度或比旋度来控制杂质的限量。第7页，共122页。

四、分光光度法（一）紫外分光光度法控制杂质在一定波长下的吸收度来控制杂质的限量。1、在药物无吸收，而杂质有吸收某一波长处测定吸收度，通过控制吸收度的值来控制杂质的含量。第8页，共122页。2、当杂质与药物的紫外吸收光谱在某一波长处重叠时，可以改变药物在某两个波长处的吸收度比值，通过控制药物在某两个波长处的吸收度比值来控制杂质的含量

第9页，共122页。（二）比色法药物显色后与限量杂质对照品显色后，采用目视比色法或分光光度法（三）原子吸收分光光度法待测元素的检查第10页，共122页。（四）红外分光光度法检查药物中无效或低效晶型的检查第11页，共122页。五、色谱法（一）纸色谱法用于极性较大药物中杂质的检查方法：展开后，比较杂质斑点的个数颜色深浅及荧光强度来判断杂质是否超过限量。缺点：展开时间长、斑点扩散、显色剂受限第12页，共122页。（二）薄层色谱法特殊杂质限量检查中最常用的方法1、在一定供试品及检查条件下，不允许有杂质斑点存在2、选用实际存在的待检杂质作为对照品3、选用可能存在的某种物质作为杂质对照品4、将供试品稀释到适当浓度作为杂质对照液5、选用质量符合规定的与供试品相同的药品作为对照品。第13页，共122页。（三）高效液相色谱法1、面积归一化法2、主成分自身对照法3、内标法测定供试品中杂质的总量限度4、内标法加校正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量5、外标法测定供试品中某个杂质或主成分含量第14页，共122页。（四）气相色谱法

药物中挥发性杂质及有机溶剂残留量的检查第15页，共122页。（1）仪器的配对性如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过2mm，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致（2）对照品与供试品的同步操作第16页，共122页。2.正确的取样及供试品的称量范围

1g不超过±2%，＞1g不超过±1%3.正确的比色、比浊方法4.检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份第17页，共122页。二、氯化物检查法（一）原理对照法

第18页，共122页。（二）检查方法

药典附录除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，应滤过；置50ml第19页，共122页。纳氏比色管中，加水使成约40m1，摇匀，即得供试溶液。另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使成40m1，摇匀，即得对照浴液。第20页，共122页。于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0m1，用水稀释使成50m1，摇匀，在暗处放置5分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较，即得第21页，共122页。（三）测定条件1.标准NaCl溶液10

gCl

/ml，50ml溶液中含50～80

g的Cl

所显浑浊梯度明显，相当于标准NaCl溶液5～8ml。

2.反应需在硝酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜。

第22页，共122页。（1）加速AgCl浑浊的形成；

（2）产生较好的乳浊；

（3）避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成。第23页，共122页。3.试剂：硝酸银5.避光、暗处放置5分钟后比浊，因氯化银见光易分解。

4.供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀

第24页，共122页。6.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。

7.平行操作原则

第25页，共122页。（四）干扰及排除1.若供试品有色，需经处理后方可检查。

（1）内消色法：倍量法，如枸橼酸铁铵中氯化物的检查。

（2）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。第26页，共122页。2.当有其它干扰物质存在时，必需在检查前除去（1）碘中氯化物的检查

（2）碘化物中氯化物的检查（3）溴化物中氯化物的检查第27页，共122页。3.不溶于水的有机药物

（1）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。

（2）加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。

（3）溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后进行检查。第28页，共122页。4.有机药物中有机氯杂质的检查，具体情况，具体分析。第29页，共122页。95：82.药物中氯化物杂质检查，是使该杂质在酸性溶液中与硝酸银作用生成氯化物浑浊，所用的稀酸是（B）A.硫酸B.硝酸C.盐酸D.醋酸E.磷酸

第30页，共122页。例1.中国药典（2005年版）规定，检查氯化物杂质时，一般取用标准氯化钠溶液（10µgCl－/ml）5～8ml的原因是（D）A.使检查反应完全B.药物中含氯化物的量均在此范围C.加速反应D.所产生的浊度梯度明显E.避免干扰

第31页，共122页。例2.采用硝酸银试液检查氯化物时，加入硝酸使溶液酸化的目的是（ABCDE）A．加速生成氯化银浑浊反应B．消除某些弱酸盐的干扰C．消除碳酸盐干扰D．消除磷酸盐干扰E．避免氧化银沉淀生成第32页，共122页。例5.下列哪些条件为药物中氯化物检查的必要条件（ABC）A.所用比色管需配套B.稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C.避光放置5分钟D.用硝酸银标准溶液做对照E.在白色背景下观察

第33页，共122页。三、硫酸盐检查法（一）原理对照法第34页，共122页。（二）测定条件1.标准K2SO4溶液0.1mg/ml，50ml溶液中含0.1～0.5mg的所显浑浊梯度明显，相当于标准K2SO4溶液1～5ml。

2.反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀盐酸2ml为宜。

第35页，共122页。3.试剂：氯化钡5.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。

4.供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀

第36页，共122页。

若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。（三）干扰及排除第37页，共122页。例：药物中硫酸盐检查时，所用的标准对照液是（D）A.标准氯化钡B.标准醋酸铅溶液C.标准硝酸银溶液D.标准硫酸钾溶液

E.以上都不对

第38页，共122页。四、铁盐检查法1.原理对照法（一）硫氰酸盐法

ChP（2005）、USP（24）第39页，共122页。2.检查方法

药典附录

除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml，移置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成

第40页，共122页。35m1后，加30%硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量稀释成50ml，摇匀；如显色，立即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液（取各药品项下规定量的标准铁溶液，置50ml纳氏比色管中，

第41页，共122页。加水使成25ml，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成35m1后，加30%硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量稀释成50ml，摇匀）比较，即得第42页，共122页。3.测定条件

（1）用FeNH4(SO4)2·12H2O（硫酸铁铵）配制标准铁贮备液（加入硫酸防止Fe3+的水解），标准铁溶液临用前稀释而成，标准铁溶液10

gFe3+/ml，50ml溶液中含10～50

g的Fe3+显色梯度明显，一般取标准铁溶液1.0～5.0ml

第43页，共122页。

（2）反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀盐酸4ml为宜。

（3）试剂：硫氰酸铵。加过量硫氰酸铵，使反应向正反应方向进行（4）检查Fe2+和Fe3+

第44页，共122页。

（5）铁盐检查时，加氧化剂氧化Fe2+为Fe3+。加过硫酸铵可氧化Fe2+为Fe3+，同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。加硝酸后加热也可氧化Fe2+为Fe3+第45页，共122页。

（6）比色方法：同置于白色背景上，自上向下观察。第46页，共122页。4.干扰及排除

（1）为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时，可用正丁醇提取后，分取正丁醇层比色。

（2）具环状结构的有机药物，需经700～800℃炽灼破坏处理后再依法检查。

（3）干扰离子的影响第47页，共122页。（二）巯基醋酸法BP（1998）对照法本法灵敏度较高，但试剂较贵第48页，共122页。例1.中国药典（2005年版）规定铁盐的检查方法为（A）A.硫氰酸盐法B.巯基醋酸法C.普鲁士蓝法D邻二氮菲法E.水杨酸显色法第49页，共122页。例2.中国药典（2005年版）规定，硫氰酸铵法检查铁盐时，加入过硫酸按的目的是（AB）

A.使药物中铁盐都转变为Fe3+B.防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色

C.使产生的红色产物颜色更深

D．防止干扰

E．便于观察、比较

第50页，共122页。五、重金属检查法以铅为代表中国药典（2005年版）共收载四法。

第51页，共122页。（一）第一法硫代乙酰胺法1.原理对照法

适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。

第52页，共122页。2.测定条件

（1）用硝酸铅配制标准铅贮备液（加硝酸防止Pb2+水解），标准铅溶液临用前稀释而成，标准硝酸铅溶液10

gPb2+/ml，适宜比色范围为27ml溶液中含10～20

g的Pb2+。

第53页，共122页。

（2）本法用2mlpH3.5的醋酸盐缓冲液控制溶液pH值为3～3.5。

（3）显色剂：从ChP（1990）开始改用硫代乙酰胺做显色剂

第54页，共122页。

（1）供试品如有色，需经处理后方可检查。A.外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。B.内消色法C.改用第四法，微孔滤膜过滤法3.干扰及排除第55页，共122页。

（2）若供试品中有微量Fe3+存在，会氧化硫化氢生成单质硫，干扰比色，加入抗坏血酸或盐酸羟胺（0.5～1.0g）还原Fe3+为Fe2+，可消除干扰第56页，共122页。（3）若供试品为铁盐，Fe3+在盐酸中生成HFeCl，用乙醚提取除去，剩余微量铁在氨碱性溶液中，加KCN掩蔽，然后用第三法检查

第57页，共122页。（4）若药物本身能生成不溶性硫化物时，可加入掩蔽剂消除干扰。如ZnSO4中重金属的检查，要在碱性下加KCN掩蔽Zn2+后，依第三法检查第58页，共122页。

（二）第二法炽灼残渣法

适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的有机药物。500～600℃炽灼后的残渣，经处理后，依一法检查。1.原理对照法第59页，共122页。2.操作方法第60页，共122页。

含钠及氟的有机药物应用铂坩埚、石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿（因可腐蚀瓷坩埚，带入大量重金属）第61页，共122页。

（三）第三法硫化钠法

适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。1.原理对照法第62页，共122页。2.测定条件

（1）NaOH碱性条件下（2）显色剂：硫化钠第63页，共122页。（四）第四法微孔滤膜法

适用于含2～5

g重金属杂质及有色供试液的检查。依一法检查，结果微孔滤膜过滤后比较色斑。第64页，共122页。97：78．重金属检查中，加入硫代乙酰胺时溶液控制最佳的pH值是（B）A.1.5B.3.5C．7.5D.9.5E.11.5第65页，共122页。例1.中国药典(2005年版)重金属检查法中，所使用的显色剂是（BC）

A.硫化氢试液

B.硫代乙酰胺试液

C.硫化钠试液

D.氰化钾试液

E.硫氰酸铵试液第66页，共122页。六、砷盐检查法

（一）古蔡法

第67页，共122页。遇HgBr2试纸生成黄色～棕色的砷斑，与2ml标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较1.原理对照法

第68页，共122页。2.操作方法（1）标准砷斑用2ml标准砷溶液制备（2）供试品需经有机破坏，则标准砷溶液应平行操作第69页，共122页。第70页，共122页。3.测定条件

（1）标准砷溶液临用新配，1

gAs/ml。（2）酸为反应物，酸量应足够，所以加浓盐酸5ml。（3）酸性氯化亚锡及碘化钾的作用是：第71页，共122页。A.还原As5+为As3+，加快反应速度；

B.碘化钾被氧化生成的I2又可被氯化亚锡还原为I-，I-与反应中生成的Zn2+能形成稳定的配位离子，有利于生成砷化氢的反应不断进行；C.氯化亚锡与锌作用，在锌表面形成锌锡齐，使氢气均匀而连续地发生；第72页，共122页。D.可抑制微量Sb的干扰，在实验条件下，100

gSb存在不干扰。（4）醋酸铅棉花的作用是消除锌粒及供试品中少量硫化物的干扰，醋酸铅棉花60mg装管高度60～80mm。（5）锌粒应无砷第73页，共122页。（6）砷斑不稳定，应立即观察4.干扰及排除（1）供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐时，加HNO3，△，使氧化成硫酸盐，以除去干扰，如硫代硫酸钠中砷盐的检查。第74页，共122页。（2）供试品若为铁盐，需先加酸性氯化亚锡试液，将Fe3+还原为Fe2+。如枸橼酸铁铵中砷盐的检查。（3）具环状结构的有机药物，要先行有机破坏后再进行检查。常用的有机破坏方法：第75页，共122页。（4）本法适用于不含Sb或含Sb量小于100

g的供试品。

碱破坏法：石灰法、无水碳酸钠碱融法酸破坏法：如葡萄糖中砷盐的检查第76页，共122页。（二）Ag-DDC法检查、含量测定

对照法第77页，共122页。

砷化氢与Ag-DDC溶液作用，还原Ag—DDC为红色胶态银，直接比色或于510nm波长处测定吸收度，进行比较。

第78页，共122页。第79页，共122页。

用有机碱吸收反应产生的HDDC有利于反应的进行。USP（24）用吡啶，ChP（2000）用三乙胺。

本法适用于含Sb量小于500

g的供试品。第80页，共122页。（三）白田道夫法含Sb药物中砷盐的检查如葡萄糖酸锑钠原理对照法第81页，共122页。（四）次磷酸法BP（1998）第82页，共122页。97：79.在用古蔡法检查砷盐时，导气管中塞入醋酸铅棉花的目的是（C）A.除去I2

B.除去AsH3C.除去H2SD.除去HBrE.除去SbH3第83页，共122页。95：140.古蔡氏法中，SnC12的作用有（ACD）A.使As5+→As3+

B.除去H2SC.除去I2

D.组成锌锡齐E.除去其它杂质

第84页，共122页。例11.古蔡氏法检查所用的溶液是(B)A.强碱性溶液B.强酸性溶液C.含稀盐酸10ml/50ml溶液D.含稀硝酸10ml/50ml溶液E.含强氧化剂(硝酸或过硫酸铵)溶液第85页，共122页。

检查不含金属的有机药物或挥发性无机药物中混入的无机杂质(金属氧化物或无机盐类)。

1.原理

样品炭化后+H2SO4湿润→700～800℃炽灼至恒重→炽灼残渣（硫酸灰分）限量一般为0.1%～0.2%七、炽灼残渣检查法第86页，共122页。2.操作方法第87页，共122页。3.注意事项

（1）供试品的取样量应根据炽灼残渣限量和称量误差决定。第88页，共122页。

（3）若残渣需留作重金属检查，则500～600℃炽灼至恒重。

（2）含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚。（4）加硫酸处理是使杂质转化为稳定的硫酸盐，并帮助有机物炭化第89页，共122页。例2.炽灼残渣检查后，将残渣留作重金属检查时，炽灼温度应为（A）A.500～600℃B.600～700℃C.700～800℃D.800～1000℃E.1000～1200℃第90页，共122页。八、溶液颜色检查法

控制药物中有色杂质限量的方法。

ChP(2005)采用三种方法检查。第一法目视比色法即与标准比色液比较的方法，全波长范围定性观察第91页，共122页。观察方法

第92页，共122页。标准比色液的配制

第93页，共122页。第二法分光光度法单一波长定量第三法色差计法全波长范围定量

本法是通过色差计直接测定溶液的透视三刺激值，对其颜色进行定量表述和分析的方法。测色仪器一般为光电积分型色差计第94页，共122页。九、易炭化物检查法

检查药物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的微量有机杂质。

方法：H2SO4炭化后与对照液比较。第95页，共122页。对照液：（1）“溶液颜色检查”项下的标准比色液；（2）由比色用氯化钴液，比色用重铬酸钾液，比色用硫酸铜液按规定方法配成的对照液；第96页，共122页。比色：同置白色背景前，平视观察比较。（3）高锰酸钾液第97页，共122页。十、澄清度检查法

检查药物中的微量不溶性杂质，用作注射剂的原料药一般应作此项检查。

1.检查方法对照法第98页，共122页。2.浊度标准液的配制

中国药典规定用浊度标准液作为澄清度检查的标准。

反应原理：乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛，甲醛与肼缩合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色浑浊。第99页，共122页。1.00％硫酸肼溶液与10％乌洛托品溶液等量混合配制浊度标准贮备液浊度标准原液浊度标准液（5个级号）第100页，共122页。3.判断药典中规定的“澄清”，系指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂，或未超过0.5号浊度标准液。4.溶剂：水、酸、碱、有机溶剂有机酸的碱金属盐类药物强调用“新沸过的冷水”第101页，共122页。十一、干燥失重测定法

干燥失重是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量，主要是水分，也包括其它挥发性物质。测定方法：

第102页，共122页。（一）常压恒温干燥法

适用于受热较稳定的药物。干燥温度一般为105℃。

干燥失重：第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1h后进行。第103页，共122页。

炽灼残渣：第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续炽灼０.5h后进行。

（二）干燥剂干燥法适用于受热易分解或挥发的供试品。干燥剂：硅胶、浓硫酸、P2O5

。第104页，共122页。（三）减压干燥法

适用于熔点低，受热不稳定或水分难赶除的药物。

除另有规定外，压力应在2.67kPa（20mmHg）以下。第105页，共122页。例[1～5]A．干燥失重测定法B．炽灼残渣检查

C．两者皆是D．两者皆不是1.有机物杂质检测法（D）2.不溶物的测定法（D）3.杂质检查法（C）4.有机药物中不挥发无机物的检测法(B)5.药物中挥发性物质的检测法（A）第106页，共122页。例6.干燥失重测定的方法有（BCDE）A．炽灼（500～600℃）法B．常压恒温干澡法C．减压干燥法D．干燥剂干燥法E．减压干燥剂干燥法第107页，共122页。