耳念珠菌尿路定植及医院感染防控策略总结2026

耳念珠菌尿路定植及医院感染防控策略总结20262026年1月上海多家医疗机构感染、检验、皮肤科专家，在《InfectionandDrugResistance》期刊刊发论著《CandidaaurisUrinaryTractColonizationandNosocomialInfectionControlStrategiesinShanghai》，本研究是国内上海首份耳念珠菌尿路定植流行病学调查，系统分析本地留置导尿管卧床患者菌株耐药特征、定植规律，配套完整院内消毒方案与个体化抗真菌治疗策略，为临床院感防控、抗感染用药提供本土化循证依据，适合感染科医师、ICU医师、临床药师、院感专职人员参考。研究背景耳念珠菌是一种多重耐药致病真菌，其菌株存在地域分化特征，目前在全球多个新型进化分支地区均有新发流行。耳念珠菌主要定植于人体尿路及呼吸道，会大幅增加血流感染发生风险。研究目的借助分子流行病学手段结合临床干预措施，分析上海地区耳念珠菌尿路定植人群流行病学特征，并评估相关防控策略的有效性，为医院感染控制提供循证指导依据。研究方法依托ECIFIG监测网络筛查确诊病例；采集尿道标本分离耳念珠菌菌株，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱联合内转录间隔区测序完成菌株鉴定；通过微量肉汤稀释法、酵母显色检测试剂盒开展抗真菌药物敏感性试验；利用全基因组测序分析耐药基因突变，并基于单核苷酸多态性构建系统发育树；对患者采用两性霉素B膀胱冲洗联合生理盐水冲洗方案；主动筛查密切接触人员、环境物体表面及医护人员手部；评估不同消毒剂在各类材质表面的消毒效果以优化消毒方案，所有干预措施均基于全面风险评估制定。研究结果2024年4月至2025年4月，上海地区共从10例长期卧床留置导尿管患者尿液标本中分离出耳念珠菌。全部菌株对氟康唑耐药；其中1株对两性霉素B耐药，另有1株对棘白菌素类药物耐药，携带FKS1-S639F突变；研究同时检出ERG11、CDR1基因突变。临床证实两性霉素B膀胱冲洗方案疗效确切。环境监测结果显示，优化后的广谱复方消毒剂可彻底清除环境中的耳念珠菌；本研究干预后消毒方案消杀成功率达80%，后续未发生交叉传播事件。研究结论耳念珠菌尿路定植存在血行播散风险。个体化抗真菌治疗联合强化环境消毒可有效控制菌株定植、阻断院内传播，为医院感染防控方案制定提供参考。本研究是中国开放型大都市上海首项耳念珠菌尿路定植流行病学调查。引言2018年我国北京报道首例耳念珠菌感染病例，此后国内多地陆续出现散发病例，主要集中于广东、辽宁、北京，存在明显地域聚集及省际传播特征。耳念珠菌耐盐、耐热，可长期存活于医院环境并定植人体皮肤，对免疫功能低下人群、接受侵入性操作患者构成重大感染风险。当前全球流行优势菌株主要为南非分支、南亚分支。耐药监测数据显示，绝大多数耳念珠菌分离株对氟康唑耐药，部分菌株同时对两性霉素B、棘白菌素类药物耐药。耳念珠菌主要定植人体尿道、呼吸道，可通过院内暴发、跨区域传播、境外输入途径扩散。医疗机构必须将耳念珠菌防控作为重点工作，以此切断传播链条。既往研究报道，尿液培养阳性率存在显著地域差异。欧洲一项单中心研究在41例念珠菌血症患者中分离出5份尿液阳性菌株，其中56%患者在发生念珠菌血症前已存在菌株定植。治疗层面，棘白菌素类、两性霉素B为一线治疗药物，但抗真菌药物耐药仍是临床重大难题。针对难治性感染可采用联合用药方案，或给予两性霉素B膀胱灌注（50毫克/升，持续5~7天）。美国疾控中心虽建议非侵袭性感染无需用药，但由于泛耐药菌株相关病死率极高，仍需尽早采取积极干预措施。2024年4月至2025年4月，上海市东方医院作为ECIFIG中心实验室，联合另外5家医院共同收治10例长期留置导尿管合并耳念珠菌尿路定植患者，其中2例进展为血流感染。该结果提示，导管相关黏膜损伤可能促进病原菌侵入血液。研究对患者实施单人单间隔离、接触人群筛查，并结合不同材质物体表面消毒剂效果评估优化消毒流程。本研究通过分析患者定植数据、环境监测数据，首次建立国内医院耳念珠菌感染防控及消毒规范，为提升临床识别与处置能力提供关键依据；同时为本市首项耳念珠菌尿路定植流行病学调查。材料与方法菌株来源收集10例住院留置导尿管卧床患者尿液标本，标本均检出耳念珠菌。后续开展每周多部位监测采样，采集定植患者及同病房其他患者尿液、肛周、腋窝、口腔、鼻腔、外耳道标本；使用无菌棉拭子采集耳念珠菌定植患者病房环境物体表面标本，包括监护仪、输液泵、床头柜、床栏、床品、卫生间台面、水龙头、地面、门把手；采用相同方式采集医护人员手部标本。所有采样操作严格遵循美国疾控中心耳念珠菌筛查指南（网址：/fungal/candida-auris/c-auris-screening.html）。标本采集后将棉拭子震荡20秒，取1毫升标本混悬液接种于沙堡葡萄糖琼脂平板，37℃恒温培养。本研究经上海市东方医院伦理委员会审批（伦理审批编号：2025YS-038）。本研究未纳入人体受试者、实验动物，未采集、使用任何可识别个人身份信息，仅开展体外真菌学研究；研究所用真菌菌株均分离自医院检验科临床标本。纳入标准时间范围：2024年4月至2025年4月入院患者地域范围：上海市东方医院专家门诊会诊收治患者目标人群：长期卧床、留置导尿管患者微生物确诊标准：尿道标本培养检出耳念珠菌，并经基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱联合内转录间隔区测序确诊定植病例来源：ECIFIG监测网络上报病例排除标准标本来源：尿道以外部位分离的耳念珠菌菌株予以排除时间范围：规定时间范围外确诊病例予以排除患者基线：非长期卧床、未留置导尿管患者予以排除混合感染/鉴定存疑：未通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱联合内转录间隔区测序明确鉴定的标本，或合并多种主要病原体混合感染病例予以排除耳念珠菌分离与鉴定将耳念珠菌菌株接种于沙堡葡萄糖琼脂、念珠菌显色培养基，37℃培养24小时。10株尿路定植临床分离株均通过EXS3000型基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱完成菌种鉴定。由上海生工生物工程股份有限公司采用ITS1/ITS4引物完成PCR扩增及测序，引物序列：ITS15’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’，ITS45’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’；测序结果通过BLASTN数据库比对验证。医院环境耳念珠菌监测本研究采用前瞻性纵向研究方法，对住院患者开展为期10周多部位定植监测。每周系统采集尿液、肛周、腋窝、鼻腔标本；持续2个月采集病房高频接触物体表面（床栏、呼叫按钮等）、直接接触患者医护人员手部标本并检测。所有标本接种于念珠菌显色培养基，可疑菌落采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定。体外抗真菌药物敏感性试验本研究共评估9种抗真菌药物。分别依据临床和实验室标准协会M27-A3文件、试剂盒说明书，采用微量肉汤稀释法、酵母显色检测系统开展药敏试验。由于目前尚无耳念珠菌官方最低抑菌浓度判定折点，试验结果参照美国疾控中心发布的临时判定折点标准（网址：/fungal/candida-auris/c-auris-antifungal.html）。疾控中心临时最低抑菌浓度判定阈值：氟康唑≥32毫克/升，两性霉素B≥2毫克/升，卡泊芬净≥2毫克/升，米卡芬净≥4毫克/升，阿尼芬净≥4毫克/升。分别采用近平滑念珠菌ATCC22019、克柔念珠菌ATCC6258作为质控菌株，保障试验结果可靠准确。全基因组测序与系统发育分析对全部分离菌株开展全基因组测序，系统分析菌株特征。采用商品化DNA提取试剂盒提取基因组DNA，使用NexteraXT文库制备试剂盒构建测序文库；基于IlluminaNextSeq550测序平台完成测序，生成75碱基单端测序读段。使用FastQC软件（网址：https://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/fastqc/）评估原始测序数据质量，通过TrimGalore软件（网址：http://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/trim_galore/）去除接头序列、过滤低质量读段；采用SPAdes拼接软件完成基因组从头组装，保留长度≥1000碱基的重叠群；通过QUAST软件评估组装质量。以B8441参考基因组（基因序列编号GCA_002759435.3）开展单核苷酸多态性分析；采用IQ-TREE软件，基于TVMe+ASC+R3替换模型构建最大似然系统发育树，设置1000次自举检验评估菌株进化亲缘关系，保证统计学可信度。表1耳念珠菌定植患者临床资料分布患者编号性别年龄菌株分离日期基础疾病临床转归临床用药是否进展为血流感染SH1男792024/4/25高血压、糖尿病好转棘白菌素类、两性霉素B是SH2男612024/8/29无好转棘白菌素类否SH3女722024/10/14高血压好转棘白菌素类否SH4女652024/10/30糖尿病好转两性霉素B否SH5男672024/11/14无好转两性霉素B否SH6女792024/11/12糖尿病好转两性霉素B否SH7男572024/12/10糖尿病好转棘白菌素类否SH8男792024/12/14无好转两性霉素B否SH9男762024/12/18高血压、糖尿病好转两性霉素B是SH10男562025/1/9糖尿病好转棘白菌素类否耳念珠菌菌株鉴定结果对10株耳念珠菌分离株全部完成测序，测序序列与美国国家生物技术信息中心数据库BLASTN比对，同源性98%~100%，与质谱鉴定结果一致。耳念珠菌在沙堡葡萄糖琼脂培养基上形成光滑奶油色菌落。10例患者中7例合并基础疾病，3例无明确基础疾病；7例合并基础疾病患者内，2例由尿路定植进展为侵袭性血流感染。耳念珠菌多部位筛查结果开展为期10周的前瞻性监测，对住院患者多解剖部位开展耳念珠菌定植筛查。1号患者前6周内4个解剖部位持续检出菌株（尿液、肛周、腋窝、鼻腔）；口腔、外耳道全程未检出。鼻腔定植持续至第10周；尿液、肛周、腋窝部位菌株清除时间同步。同期56份环境标本、16份医护人员手部拭子标本检测结果均为阴性。表21号患者不同采样部位耳念珠菌主动筛查结果采样时间尿液肛周腋窝口腔鼻腔外耳道第1周阳性阳性阳性阴性阳性阴性第2周阳性阳性阳性阴性阳性阴性第3周阳性阳性阳性阴性阳性阴性第4周阳性阳性阳性阴性阳性阴性第5周阳性阳性阳性阴性阳性阴性第6周阳性阳性阳性阴性阳性阴性第7周阴性阴性阴性阴性阳性阴性第8周阴性阴性阴性阴性阳性阴性第10周阴性阴性阴性阴性阳性阴性注：“阴性”表示未检出耳念珠菌；“阳性”表示检出耳念珠菌抗真菌药物敏感性试验及耐药基因突变结果全部分离株对氟康唑高水平耐药（最低抑菌浓度128~256微克/毫升），但全部对5-氟胞嘧啶敏感（最低抑菌浓度0.06~0.12微克/毫升）。1号5号患者菌株对两性霉素B耐药（最低抑菌浓度2微克/毫升），同时对全部三类棘白菌素类药物耐药，携带FKS1S639F突变；其余菌株均对两性霉素B、棘白菌素类敏感。伊曲康唑、泊沙康唑、伏立康唑最低抑菌浓度范围分别为0.12~0.5微克/毫升、0.06~0.5微克/毫升、0.5~2微克/毫升。系统发育分析对10株分离株全部开展全基因组测序，采用IlluminaNovaSeq6000平台完成双端150碱基测序（上海生工生物工程股份有限公司）。以耳念珠菌B8441菌株（基因序列编号GCA_002759435.3）为参考基因组，采用最大似然法构建系统发育树。系统发育分析显示，10株患者分离株分为两大进化分支：Ⅰ型分支、Ⅲ型分支，其中Ⅲ型分支为优势流行谱系。1号患者菌株归属于Ⅰ型分支，其余全部菌株归属于Ⅲ型分支。图3图注图3基于全基因组测序的上海地区10株耳念珠菌分离株系统发育树消毒效果现场模拟与监测本研究评估8种临床常用消毒剂在医院不同材质物体表面对耳念珠菌的消杀效果。季铵盐消毒湿巾（有效成分2.0~2.4克/升）作用门把手、床头柜、电脑显示器等无孔硬质表面，接触2分钟无法达到合格消毒标准；75%±5%乙醇、含氯消毒剂（1000毫克/升）、过氧化氢消毒湿巾（8.5~11.5克/升）在全部受试材质表面接触2~3分钟均可稳定达标。织物等多孔材质使用含氯消毒剂需延长接触时间至30分钟，方可彻底清除污染。手部消毒：氯己定醇类消毒剂（乙醇含量54%~66%，氯己定18~22克/升）接触1分钟即可起效。导尿管等医疗器械使用复方碘（0.18%~0.22%）、聚维酮碘（0.45%~0.55%）溶液接触2~3分钟可完成消毒。上述结果证实，消毒剂消杀效果随物体表面材质存在显著差异；无孔硬质表面所需接触时间普遍短于多孔材质。表38种常用消毒剂在不同材质物体表面对耳念珠菌的消杀效果物体表面名称消毒剂名称有效成分浓度接触时间效果判定门把手季铵盐表面消毒湿巾2.0克/升～2.4克/升2分钟不合格乙醇75.0%±5.0%3分钟合格含氯消毒剂1000.0毫克/升3分钟合格过氧化氢消毒湿巾8.5克/升～11.5克/升2分钟合格织物含氯消毒剂1000.0毫克/升30分钟合格手部氯己定18.0克/升～22.0克/升1分钟合格醇类手消毒剂乙醇54.0%~66.0%3分钟合格导尿管复方碘0.18%~0.22%3分钟合格无痛碘0.45%~0.55%2分钟合格地面含氯消毒剂1000毫克/升30分钟合格床头柜季铵盐表面消毒湿巾2.0克/升2分钟不合格电脑显示器乙醇75.0%±5.0%3分钟合格含氯消毒剂1000.0毫克/升30分钟合格过氧化氢消毒湿巾8.5克/升～11.5克/升2分钟合格季铵盐表面消毒湿巾2.0克/升～2.4克/升2分钟不合格（同显示器材质台面）乙醇75.0%±5.0%3分钟合格含氯消毒剂1000.0毫克/升30分钟合格过氧化氢消毒湿巾8.5克/升～11.5克/升2分钟合格讨论我国耳念珠菌感染仍以散发病例为主，多数医疗机构存在诊断能力不足、感染防控处置经验匮乏等问题。菌株定植高危因素主要为接触感染者、接触污染环境，凸显环境消毒工作的重要性。临床选择消毒剂时需综合考量物体表面材质、成本效益、操作安全性、消毒覆盖范围等因素。国外既往研究多为回顾性分析，在确诊念珠菌血症患者中反向追溯尿路定植病史；本研究采用前瞻性主动筛查，提前发现一组耳念珠菌尿路定植聚集病例，证实定植是侵袭性感染高风险前置状态，凸显对高危人群主动筛查的早期预警价值。更为重要的是，既往研究仅证实定植与后续感染存在关联，本研究进一步证实，依托监测数据落实综合干预措施，可有效切断传播链条，将监测结果转化为落地可行的院感防控手段。本研究发现季铵盐类表面消毒湿巾无法有效杀灭耳念珠菌；2%氯己定、1000毫克/升含氯消毒剂、过氧化氢消毒湿巾等均可彻底清除菌株。推荐方案：2%氯己定用于皮肤去定植；碘类制剂用于导管护理；醇类免洗手消毒凝胶用于手卫生；含氯消毒剂用于环境终末消杀。2024年4月至2025年4月，研究团队对10例耳念珠菌尿路定植患者实施标准化感染防控流程，实现病例有效管控，未发生交叉传播。后续可扩大消毒剂评估范围，为临床感染防控策略提供更全面循证依据。现有临床文献显示，耳念珠菌感染常伴随多部位定植，相当比例病例会进展为血流感染。本研究2例患者发生念珠菌血症，高危因素包括留置导尿管、广谱抗生素暴露、合并基础疾病。耳念珠菌可长期存活于环境，感染病死率高，需依据药敏结果、感染部位、患者个体情况制定个体化治疗方案。尿液培养阳性后需立即开展接触人群、环境筛查，每周持续监测直至患者出院，确保污染清除。棘白菌素类单药为初始治疗一线方案；相较于唑类药物，耳念珠菌对棘白菌素耐药率更低，但仍存