CN113950625B 靶向人tau的化合物和方法 （伊莱利利公司）

2021.11.29PCT/US2020/0342742020.05.22WO2020/242963EN2020.12.03US2008220449A1,2008.09.11处磷酸化的人tau和仅在CNS中表达的tau同工型的化合物和方法，包括用于神经退行性疾病如2氨酸处磷酸化的人tau；所述特异性结合hTau-pT217的抗体包含轻链可变区(LCVR)和重链SEQIDNO:14，所述LCDR3的氨基酸序列是SEQIDNO:15，所述IDNO:10，所述HCDR2的氨基酸序列是SEQIDNO:11，所述HCDR3的氨基酸序列是SEQID6.药物组合物，其包含根据权利要求1-5中任一项所述的抗体和一种或多种可药用载7.根据权利要求1-5中任一项所述的抗体的用途，用于制备检测患者样品中hTau-使患者样品与第二抗体接触，所述第二抗体结合不与权利要求1-5中任一项所述的抗检测权利要求1-5中任一项所述的抗体与hTau-pT其中所述第二抗体特异性结合CNS表达的人tau同工型，并且所述第二抗体结合包含体包含轻链可变区(LCVR)和重链可变区(HCVR)，其中LCVR包含互补决定区(CDR)LCDR1、NO:23，所述LCDR2的氨基酸序列是SEQIDNO:24，所述LCDR3的氨基酸序列述HCDR3的氨基酸序列是SEQIDNO8.根据权利要求7所述的用途，其中所述检测进一步包括定量患者样品中的hTau-9.根据权利要求7或8所述的用途，其中所述检测包括将患者诊断为以下一项或多项：13.根据权利要求7所述的用途，其中权利要求1-5中任一项所述的抗体或第二抗体之3和hTau-pT217的复合物时检测该可检测21.根据权利要求9所述的用途，其中所述4[0004]此外，为了帮助发现和/或开发改变疾病的治疗，需要对AD进行可靠和灵敏的诊断。经批准的AD诊断应用是AmyvidTM。Flourtaucipir是目前正在接受FDA审评的AD诊断应像(如flourtaucipir和/或amyvid)[0005]因此，在一个实施方案中，本公开提供了针对在残基217(残基编号基于SEQID提供结合在SEQIDNO.1的残基25包含互补决定区(CDR)LCDR1、LCDR2和LCDR3，HCVR包含CDRHCDR1、HCDR2和HCDR3，其中SEQIDNO:13具有至少95％同源性的氨基酸序列，LCDR2具有与氨基酸序列SEQIDNO:14具有至少95％同源性的氨基酸序列，LCDR3具有与氨基酸序列SEQIDNO:15具有至少95%同源性的氨基酸序列，HCDR1具有与氨基酸序列SEQIDNO:10具有至少95％同源性的氨基少95％同源性的氨基酸序列，并且HCVR具有与氨基酸序列SEQIDNO:3具有至少95％同源源性的氨基酸序列，并且HCVR具有与氨基酸序列SEQIDNO:6具有至少95％同源性的氨基酸序列。95％同源性的氨基酸序列，LCDR3具有与氨基酸序列SEQIDNO:25具有至少95％同源性的氨基酸序列，HCDR1具有与氨基酸序列SEQIDNO:20具有至少95％同源性的氨基酸序列，其他实施方案中，LCVR具有与氨基酸序列SEQIDNO:17具有至少95％同源性的氨基酸序6法包括使患者样品与本公开的特异性结合hTau-pT217的抗体接触并检测所述接触步骤提样品与本公开的特异性结合CNS中表达的人tau同工型(即不结合仅在CNS以外表达的人tau同工型)的抗体接触并检测所述接触步骤提供的信号患者样品与本公开的特异性结合hTau-pT217的抗体接触并检测所述接触步骤提供的信号本公开的特异性结合CNS表达的人tau同工型的抗体接触，其中抗体不结合抗体的重叠表方法包括使患者样品与本公开的特异性结合hTau-pT217的抗体接触并检测抗体与患者样断为以下之一的步骤：(i)患有神经退行性疾病；(ii)处于患上神经退行性疾病的风险；[0017]在本公开的一些实施方案中，提供在患者中诊断和治疗神经退行性疾病的方[0018]根据本公开的方法的一些实施方案，此类方法进一步包括定量患者样品中的7签，并且所述检测步骤包括在形成包含所述特异性结合hTau-pT217的抗体、第二抗体和结合hTau-pT217的抗体和第二抗体之一固定在底物上。在本公开的方法的一些实施方案ProteinsofImmunologicalInterest,FifthEdition,U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIHPublicationNo.91-3242(1991))和North编号约定(North等,ANewClusteringofAntibodyCDRLoopConformations,JournalofMolecularBiology,[0022]根据本公开的一些实施方案，将LC分类为κ或[0023]本发明的抗体是单克隆抗体。单克隆抗体是源自单个拷贝或克隆(包括例如任何菌体展示技术、合成技术(例如CDR移植)或此类或本领域已知的其他技术的组合来产生单[0024]产生和纯化抗体的方法在本领域中众所周知，可见于例如Harlow和Lane(1988),Antibodies,ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratoryPress,Cold多个围绕源自非人抗体的CDR的人框架区的抗体。例如，可以通过其网站http://8imgt.cines.fr从ImMunoGeneTics(INGT)或从TheImmunoglobulinFactsBookbyMarie-PauleLefrancandGerardLefranc,AcademicPress,2001,ISBN012441351获得人构架处的磷酸化苏氨酸的人tau表位区域的相应理解，此类已知的变体可导致本文参考SEQIDNO.1所示的人tau序列提供的SEQIDNO.1的一些氨基酸残基(包括磷酸化苏氨酸)的残基编号发达的人tau同工型的共同或存在于其上的表位区域的相互作用，该表位区域不存在于仅在CNS以外表达的人tau同工型上。特异性结合CNS表达的人tau同工型的抗体不结合仅在CNS以外表达的人tau同工型(例如仅在身体其他区域如外周神经系统表达的同工型)。根据一型的表位区域，该表位区域包含残基124处的谷氨酰胺(Q124)和残基125处的丙氨酸并且可提供特定的电荷特征。构象表位和非构象/线性表位的区别在于，在变性溶剂存在9备，且包含本发明的抗体和一种或多种可药用载体和/或稀释剂(例如Remington,TheScienceandPracticeofPharmacy,第22版,LoydV.编辑,PharmaceuticalPress,列比较算法时，可将测试序列和参考序列输入计算机(可根据需要进一步指定子序列坐标和TFASTA(在WisconsinGeneticsSoftwarePackage,GeneticsComputerGroup,定百分比序列同一性和序列相似性的算法的一个实例是Altschul等,J.Mol.Biol.215:403-410(1990)中所述的BLAST算法。执行BLAST分析的软件可通过国家生物技术信息中心[0035]本公开的特异性结合hTau-pT217的抗tau抗体可用于通过诸如亲和层析、免疫沉[0036]本公开的特异性结合CNS表达的人tau同工型的抗tau抗体可用于通过诸如亲和层析、免疫沉淀、免疫组织化学或基于ELISA的测定等的技术分离和/或检测CNS中表达的人tau同工型(排除仅在CNS以外表达的人tau同工型)。这种测定可用于检测和/或评价CNS表[0037]本发明的测定所提供的hTau-pT217的水平或测量值可以是绝对值(例如生物样品法指示患者样品中hTau-pT217的水平或浓度高于参考值，则称患者样品中的hTau-pT217特异性结合CNS表达的人tau同工型(例如，其可包括在残基217处的苏氨酸处磷酸化的技术人员可通过其估计和/或确定患者是否患有给定疾病或病状的概率(“可能性”)的方ActaNeuropathol112(4):389-4[0044]本公开的抗hTau-pT217抗体或特异性结合hTau-pT217的抗体用杂交瘤方法产生Antibodies:PrinciplesandPractice,59-103页(AcademicPress,1986))。杂交瘤在合后使用hTau-pT217和在苏氨酸残基217(编号基于对SEQIDNO.1的参考)处未磷酸化的重组tau通过体外结合测定法(例如免疫沉淀、放射免疫测定法(RIA)或酶联免疫吸附测定法MonoclonalAntibodies:PrinciplesandPractice,59-103页(AcademicPress,1986))。杂交瘤(和/或亚克隆)分泌的单克隆抗体按照常规流程纯化，例如亲和层析(例如蛋白A或链可变区和SEQIDNO.7的重链及SEQIDNO.8的轻链可变区和SEQIDNO.9的轻链的示例基方便地应用于已用相容的缓冲液(如磷酸缓冲盐溶液)平衡的蛋白A或G琼脂糖凝胶FF柱。[0047]本公开的特异性结合CNS表达的人tau同工型的抗体可以用杂交瘤方法产生(例处的谷氨酰胺和残基125处的丙氨酸(编号如SEQIDNO.1所示)的人tau蛋白(例如SEQIDNO.1给出的hTau)或其肽免疫非人哺乳动物(例如鼠或兔子)。可以分离能够产生特异性结形成杂交瘤细胞(Goding,MonoclonalAntibodies:PrinciplesandPractice,59-103页(AcademicPress,1986))。杂交瘤可以在合适的培养基(优选含有一种或多种抑制未融合均通过体外结合测定法(例如免疫沉淀、放射免疫测定(RIA)或酶联免疫吸附测定法(ELISA))来测定杂交瘤产生的单克隆抗体的结合特异性。能够鉴定特异性结合CNS表达的行亚克隆，并通过标准方法培养，包括在动物体内作为腹水肿瘤(Goding,MonoclonalAntibodies:PrinciplesandPractice,59-103页(AcademicPress,1986))。杂交瘤(和/或亚克隆)分泌的单克隆抗体按照常规流程纯化，例如亲和层析(例如蛋白A或蛋白G-琼脂达其组分。[0050]用可从ForteBio获得的OctetRed96®仪器(使用HBS-EP+运行缓冲液(GEHealthcare，10mMHepespH7.4+150mMNaCl+3mMEDT行)测量的生物膜层干涉(BLI)测定法来测量本公开的特异性结合hTau-pT217的抗体与具有氨基酸序列SEQIDNO:1的重组hTau-pT217蛋白传感器用于固定目的抗体进行分析。本发明的示例性抗体样品(mAbA)通过稀释到运行缓冲液中制备为5μg/mL。将重组hTau-pT217蛋白通过稀释到运行缓冲液中制备为300、100、用系列稀释的重组hTau-pT217蛋白孵育加载了抗体的生物传感器300秒来监测结合阶段；[0052]使用标准双参考处理结合数据，并使用DataAnal[0057]使用可从ForteBio获得的OctetRed96®仪器(使用HBS-EP+运行缓冲液(GEHealthcare，10mMHepespH7.4+150mMNaCl+3mMEDTmAbA4.4178mAbB[0061]用于测量血浆中hTau-pT217的免疫测定法设计用于测量AD患者的疾病相关差异。作为示例，使用MesoScaleDiscovery(MSD)平台在链亲和素小点板(smallspotplate)TAG第二抗体如mAbC(本公开的特异性结合CNS表达的人tau同工型的抗体)用作检测抗体。按照厂家流程，将抗体用Sulfo-NHS-Biotin(ThermoScientific，目录号：21329)或MSD冰上融化，短暂涡旋，血浆1:4稀释在样品缓冲液中：对于mAbA(磷酸缓冲盐溶液(PBS)，与Knock-OutSerumReplacement(Gibco,10828[0062]用200uL含3％牛血清白蛋白的PBS在摇板机上以650rpm的转速摇动，室温下封闭读板。结果由MSD软件使用标准曲线的4PL患者中的hTau-pT181。所有患者都进行了通过flortaucipir神经成像测量的tau正电子发℃下用于将来的生物标志物研究。FlortaucipirSUVR是根据白质中的参考信号在目的新皮质区域测定。flortaucipirSUVR和血浆pTau(分别为pT181和pT217)的相关性采用用混合效应模型评价预测未来认知衰退的基线p[0065]如表3中所示，在两项研究中，hTau-pT217免疫测定法显示统计学上显著高于[0068]在两项研究中，flortaucipir阳性的ROC下面积显示hTau-pT217的值高于hTau-免疫测定法能够鉴定适合神经成像和处于神经退行性疾病引起的认知下降风险的受试者，并且相对于hTau-pT181免疫测定法显[0070]使用所述免疫测定法评估CSF中hTau-pT217的水平，并与hTau-pT181免疫测定法的评估结果进行比较。简言之，用hTau-pT217和hTau-p181免疫测定法对来自瑞典n＝29)、AD痴呆症(n＝43)和其他神经退行性疾病(n＝57)进行评估。184名参与者接受了期及更差)中tau病理相关的先验定义的区域中定量18F-Flortauc域18F-Flortaucipir和hTau-pT217免疫测定法之间的相关性在统计学上显著优于hTau-pT181免疫测定法和18F-Flortaucipir之间的相关性[0072]与hTau-pT181免疫测定法相比，hTau-pT217免疫测定法在所有区Flortaucipir的相关系数统计学上始终显著更高(均p<0.001)：为hTau-pT217(0.698-hTau-pT181：AUC0.914)方面表现出统计学上显著的改进(p＝0.026)。这些结果表明，hTau-pT217免疫测定法与18F-Flortaucipir神经成像相关，能够将AD与其他神经疾病和分185名患者进行了TauPETSUVr测定法。使用spearman检验对数据进行分析，观察到血清中的hTau-pT217。在这187名受试者中，182名进行了TauPETSUVr测定法。使用修正p值<0.001的显著相关。结果支持用在CSF、血浆或血清中测量的pTau217水平来鉴定N14.26.213.46.2684.9531.1[0079]本文公开的hTau-pT217免疫测定法与轻度AD患者的认知状态(基于简易精神状态Spearman检验评价在基线时具有hTau-pT217测量结果(如本文所述)和MMSE评估结果以及[0083]*由于针对MMSE偏离基线变化评估的患者样本量较小，因此不认为在统计学上显淀粉样蛋白状态(基于PET神经成像)的四组不同患者的血浆样品进行hTau-pT217相关性评估：(i)未受影响的老年淀粉样蛋白阳性(CU-A+)；(ii)未受影响的老年淀粉样蛋白阴性(CU-A-)；(iii)老年淀粉样蛋白阳性AD(AD-A+)；和(iv)临床上未受影响的年轻人(CUY-N3.61.3[0096]1.抗体，其特异性结合在SEQIDNO.1的残基217处的苏氨酸处磷酸化的人tau[0100]其中LCDR1具有与氨基酸序列SEQIDNO:13具有至少95％同源性的氨基酸序列，基酸序列SEQIDNO:15具有至少95％同源性的氨基酸序列，HCDR1具有与氨基酸序列SEQIDNO:10具有至少95％同源性的氨基酸序列，HCDR2具有与氨基酸序列SEQIDNO:11具有至少95％同源性的氨基酸序列，HCDR3具有与氨基酸序列SEQIDNO:12具有至少95％同源性的氨基酸序列。[0101]4.实施方案2或3的抗体，其包含选自以下的轻链可变区(LCVR)和重链可变区[0104]5.实施方案2或3的抗体，其包含选自以下的轻链可变区(LCVR)和重链可变区[0106]b.具有与氨基酸序列SEQIDNO:8具有至少95％同源性的氨基酸序有与氨基酸序列SEQIDNO:6具有至少95％同源性的[0110]9.药物组合物，其包含实施方案1-8中[0116]其中LCDR1具有与氨基酸序列SEQIDNO:23具有至少95％同源性的氨基酸序列，基酸序列SEQIDNO:25具有至少95％同源性的氨基酸序列，HCDR1具有与氨基酸序列SEQIDNO:20具有至少95％同源性的氨基酸序列，HCDR2具有与氨基酸序列SEQIDNO:21具有至少95％同源性的氨基酸序列，HCDR3具有与氨基酸序列SEQIDNO:22具有至少95％同源性的氨基酸序列。[0118]15.实施方案12或13的抗体，期包含具有与氨基酸序列SEQIDNO:17具有至少[0123]20.治疗神经退行性疾病的方法，其包括[0127]24.实施方案1-19中任一个[0130]27.实施方案1-19中任一个实施方案[0134]使患者样品与实施方案1-8中任一个实施方案所述的抗体接触；并检测由所述接[0136]使患者样品与实施方案1-8中任一个实施方案所述的抗体接触；并检测由所述接二抗体和hTau-pT217的复合物时检测由可检测标签提供的信号；使对照标准品与抗体接在形成包含实施方案1-8的抗体、第二抗体和对照标准品的复合物时检测由可检测标签提样品与实施方案1-8中任一项的抗体接触；检测抗体与患者样品中的hTau-pT217之间的结[0142]37.实施方案36的方法，其中所述诊断步骤包括在患[0144]39.实施方案38的方法，其中所述定量hTau[0146]41.实施方案30-32和34-40中步骤包括在形成包含实施方案1-8的抗体、第二抗体和hTau-pT217的复合物时检测由可检[0148]43.实施方案41-42中任一个的方法，其[0149]44.实施方案30-43中任一个的方重链可变区(HCVR)，其中LCVR包含互补决定区(CDR)LCDR1、重链可变区(HCVR)，其中LCVR包含互补决定区(CDR)LCDR1、[0153]其中LCDR1具有与氨基酸序列SEQIDNO:23具有至少95％同源性的氨基酸序列，基酸序列SEQIDNO:25具有至少95％同源性的氨基酸序列，HCDR1具有与氨基酸序列SEQIDNO:20具有至少95％同源性的氨基酸序列，HCDR2具有与氨基酸序列SEQIDNO:21具有至少95％同源性的氨基酸序列，HCDR3具有与氨基酸序列SEQIDNO:22具有至少95％同源性的氨基酸序列。HCVR具有与氨基酸序列SEQIDNO:17具有至少95％同源性的氨基酸序列。[0158]50.用于检测在CNS中表达且在SEQIDNO.1的残基[0162]MAEPRQEFEVMEDHAGTYGLGDRKDQGGYTMHQDQEGDTDAGLKESPLQTPTEDGSEEPGSETSDAKSTPTAEDVTAPLVDEGAPGKQAAAQPHTEIPEGTTAEEAGIGDTPSLEDEAAGHVTQARMVSKSKDGTGSDDKKAKGADGKTKIATPRGAAPPGQKGQANATRIPAKTPPAPKTPPSSGEPPKSGDRSGYSSPGSPGTPGSRSRTPSLPTPPTREPKKVAVVRTPPKSPSSAKSRLQTAPVPMPDLKNVKSKIGSTENLKHQPGGGKVQIINKKLDLSNVQSKCGSKDNIKHVPGGGSVQIVYKPVDLSKVTSKCGSLGNIHHKPGGGQVEVKSEKLDFKDRVQSKIGSLDNITHVPGGGNKKIETHKLTFRENAKAKTDHGAEIVYKSPVVSGDTSPRHLSNVSSTGSIDMVDSPQLATLADEVSA[0164]QSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGLSPSWYGVHWVRQAPGKGLEWIGVLRAGSHTYYAGWAKGRFAISKTSTTVALKITSPTTEDTAIYFCGSVGRGIWGPGTLVTVSLGQPKAPSVFPLAPCCGDTPSSTVTLGCLVKGYLPEPVTVTWNSGTLTNGVRTFPSVRQSSGLYSLSSVVSVTSSSQPVTCNVAHPATNTKVDKTVAPSTCSKPTCPPPELLGGPSVFIFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQDDPEVQFTWYINNEQVRTARPPLREQQFNSTIRVVSTLPIAHQDWLRGKEFKCKVHNKALPAPIEKTISKARGQPLEPKVYTMGPPREELSSRSVSLTCMINGFYPSDISVEWEKNGKAEDNYKTTPAVLDSDGSYFLYSKLSVPTSEWQRGDVFTCSVMHEALHNHYTQKS[0166]QSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGLSPSWYGVHWVRQAPGKGLEWIGVLRAGSHTYYAGWAKGRFAISKTSTTVALKITSPTTEDTAIYFCGSVGRGIWGPG[0168]AQVLTQTASPVSATVGGTVTINCQASLAVYNNNYLAWYQQKPGQPPKRLIYLASSLSSGVSSHFKGSGSGTQFTLTISDVQADDAATYFCQGSYDCTIADCVAFGGGTEVVVKGDPVAPTVLIFPPAADQVATGTVTIVCVANKYFPDVTVTWEVDGTTQTTGIENSKTPQNSADNTYNLSSTLTLTSTQYNSHKEYTCKVTQGTTSVVQS[0170]AQVLTQTASPVSATVGGTVTINCQASLAVYNNNYLAWYQQKPGQPPKRLIYLASSLSSGVSSHFKGSGSGTQFTLTISDVQADDAATYFCQGSYDCTIADCVAFGG[0172]QSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGLSPSWYGVHWVRQAPGKGLEWIGVLRAGSHTYYAGWAKGRFAISKTSTTVALKITSPTTEDTAIYFCGSVGRGIWGPG[0174]QSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGLSPSWYGVHWVRQAPGKGLEWIGVLRAGSHTYYAGWAKGRFAISKTSTTVALKITSPTTEDTAIYFCGSVGRGIWGPGTLVTVSLAKTTPPSVYPLAPGSAAQTNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGSLSSGVHTFPAVLQSDLYTLSSSVTVPSSTWPSETVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRDCGCKPCICTVPEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISKDDPEVQFSWFVDDVEVHTAQTQPREEQFNSTFRSVSELPIMHQDWLNGKEFKCRVNSAAFPAPIEKTISKTKGRPKAPQVYTIPPPKEQMAKDKVSLTCMITDFFPEDITVEWQWNGQPAENYKNTQPIMDTDGSYFVYSKLNVQKSNWEAGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKS[0176]AQVLTQTASPVSATVGGTVTINCQASLAVYNNNYLAWYQQKPGQPPKRLIYLASSLSSGVSSHFKGSGSGTQFTLTISDVQADDAATYFCQGSYDCTIADCVAFGG[0178]AQVLTQTASPVSATVGGTVTINCQASLAVYNNNYLAWYQQKPGQPPKRLIYLASSLSSGVSSHFKGSGSGTQFTLTISDVQADDAATYFCQGSYDCTIADCVAFGGGTEVVVKRADAAPTVSIFPPSSEQLTSGGASVVCFLNNFYPKDINVKWKIDGSERQNGVLNSWTDQDSKDSTYSMSSTLTLTKDEYERHNSYTCEATHKTSTSPIVKS[0192]QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSPYYWSWIRQPPDKGLEWIGEINWSGDTNYNPSLKSRVTISLDTSKNQFSLNLSSVTAADTAVYYCARSFDRWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVEPRGPTIKPCPPCKCPAPNLLGGPSVFIFPPKIKDVLMISLSPIVTCVVVDVSEDDPDVQISWFVNNVEVHTAQTQTHREDYNSTLRVVSALPIQHQDWMSGKEFKCKVNNKDLPAPIERTISKPKGSVRAPQVYVLPPPEEEMTKKQVTLTCMVTDFMPEDIYVEWTNNGKTELNYKNTEPVLDSDGSYFMYSKLRVEKKNWVERNSYSCSVVHEGLHNHHTTKSFS[0194]QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSPYYWSWIRQPPDKGLEWIGEINWSGDTNYNPSLKSRVTISLDTSKNQFSLNLSSVTAADTAVYYCARSFD[0196]EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRSNYFAWYQQKPGQAPRLLIYGVSRRAFGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGASLITFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKS[0198]EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRSNYFAWYQQKPGQAPRLLIYGVSRRAFGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGASLITF[0215]AEPRQEFEVMEDHAGTYGLGDRKDQGGYTMHQDQEGDTDAGLKESPLQTPTEDGSEEPGSETSDAKSTPTAEDVTAPLVDEGAPGKQAAAQPHTEIPEGTTAEEAGIGDTPSLEDEAAGHVTQEPESGKVVQEGFL