人员进洁净区洗手效果确认方案

人员进洁净区洗手效果确认方案1.目的确认医疗器械生产洁净区人员使用蓝月亮卫诺500g芦荟抑菌洗手液（瓶装），经规范洗手方法操作后，手部微生物污染水平满足洁净区人员卫生控制标准，降低人员带入微生物对生产环境及产品质量的污染风险，保障生产过程合规。2.依据

2.1.

《医疗器械生产质量管理规范（2025年修订版）》2.2.

《GB15979-2024一次性使用卫生用品卫生标准》2.3.

《GB/T27770-2011医疗器械微生物学检测总则》2.4.

《消毒技术规范（2012年版）》2.5.

蓝月亮洗手液产品技术说明书3.范围3.1.

区域：本公司万级和十万级洁净区3.2.

人员：所有授权进入洁净区的人员（生产、检验、维护、技术人员等）4.职责4.1.确认负责人：审核方案/报告，协调资源，批准确认结论，归档文件

4.2.微生物检验员：采样、样品检验、数据记录与分析，撰写检测报告

4.3.生产部负责人：组织人员参与确认，监督洗手操作规范执行

4.4.设备管理员：确保洗手设施、检验设备正常运行及校准合格

5.准备5.1.物料与设备物料：蓝月亮卫诺500g芦荟抑菌洗手液（瓶装）、无菌采样管（10mL）、无菌棉签、TSA培养基（90mm）、无菌生理盐水、50*0.45μm滤膜、金黄色葡萄球菌标准菌株.物料需要在有效期内，供应商提供合格证明，无菌物品需符合无菌要求；滤膜无破损、孔径达标

设备：超净工作台、生物安全柜、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、菌落计数器、微生物限度仪、均需要经校准合格，在有效期内，功能正常；微生物限度仪需适配50*0.45μm滤膜

5.2.环境与培训环境：洗手设施清洁无污渍，采样区域按洁净区规程消毒；检验区域温度18-28℃，湿度45%-65%培训：对参与人员进行洗手方法、采样配合要求培训，确保操作规范6.洗手方法6.1.洗手前准备

取下手上首饰（戒指、手镯、手表等），检查双手无伤口、化脓等异常，穿着洁净区专用工作服。6.2.规范洗手步骤（七步洗手法）1）湿润双手：打开非手触式水龙头，用流动水充分湿润双手（手掌、手背、指缝、指背、拇指、指尖及手腕以上10cm）2）涂抹洗手液：按压蓝月亮洗手液分配两次，将洗手液均匀涂抹于双手所有部位，揉搓至产生丰富泡沫3）七步揉搓（总时长≥30秒）-步骤1（掌心揉搓）：掌心相对，手指并拢相互揉搓（示意图对应手部动作：双手掌心贴合，手指伸直交叉揉搓）-步骤2（指缝揉搓）：双手交叉，掌心对手背揉搓指缝（交换双手）（示意图对应手部动作：右手掌心贴左手手背，手指张开交叉揉搓指缝）-步骤3（指揉搓）：掌心对手心，手指揉交叉搓指（示意图对应手部动作：掌心相对，手指交叉）-步骤4（指关节揉搓）：弯曲手指，指关节在另一手掌心旋转揉搓（交换双手）（示意图对应手部动作：左手手指弯曲，指关节在右手掌心画圈揉搓）-步骤5（拇指揉搓）：拇指弯曲，在另一手掌心旋转揉搓（交换双手）（示意图对应手部动作：左手拇指弯曲，在右手掌心顺时针旋转揉搓）-步骤6（指尖揉搓）：指尖并拢，在另一手掌心旋转揉搓（交换双手）（示意图对应手部动作：双手指尖并拢，在对方掌心画圈揉搓）-步骤7（手腕揉搓）：手掌包裹手腕，旋转揉搓（交换双手）（示意图对应手部动作：右手掌心包裹左手手腕，旋转揉搓至手腕以上10cm）4）冲洗干净：指尖向下，用流动水冲洗至无洗手液残留（双手无滑腻感）5）干燥处理：用干手器吹干（≥30秒）

6.3.七步洗手法完整示意图7.验证实施7.1.取样过程1）取样准备：-取样人员穿戴无菌手套、口罩、帽子，在洁净环境下操作-提前核对样本标识（批次、日期、时间、人员姓名、样本类型）-检查采样工具（棉签、采样管）无破损、无菌状态良好2）对照组取样：-空白对照组（洗手前）：人员未洗手时，用无菌棉签蘸取适量无菌生理盐水（湿润不滴水），从掌心开始，沿指缝、指背、指尖、手腕以上5cm部位均匀涂抹采样（横向、纵向、斜向各涂抹1次，力度适中，避免摩擦破损皮肤）；采样后将棉签放入50mL无菌生理盐水采样管，反复挤压棉头10次，振荡1分钟充分洗脱微生物，旋紧盖子，标注信息。-阴性对照组：无菌棉签蘸取无菌生理盐水后，直接放入50mL采样管，不接触任何表面，同步标注信息-阳性对照组：提前制备金黄色葡萄球菌标准菌株稀释液（浓度约100CFU/0.1mL），备用。3）洗手后取样：-人员按规范完成洗手后1分钟内采样-采样部位、方法与空白对照组一致，确保操作手法统一-每次选取5名人员，每人1个样本，采样后送至实验室进行检验7.2样品检验过程（薄膜过滤法）1）检验环境准备：-空白对照组、阴性对照组、洗手后样品的检验在超净工作台内进行-阳性对照组检验在生物安全柜内进行-提前对超净工作台、生物安全柜、微生物限度仪进行清洁消毒。2）样品接收与处理：-核对样本标识、状态，记录接收时间，确保样本无破损、污染-取出采样管，在对应操作环境内振荡30秒，使微生物充分混匀3）阴性对照组检验：-打开微生物限度仪，安装50*0.45μm无菌滤膜，确认密封良好-取阴性对照组采样管内10mL，全部注入微生物限度仪过滤杯，启动仪器进行抽滤-过滤完成后，用40mL无菌生理盐水分2次冲洗过滤杯（每次20mL），确保杯壁无残留-取出滤膜，无菌操作下菌面朝上贴于TSA培养基平板中央（滤膜与培养基完全贴合，无气泡）-平板倒置放入30-35℃恒温培养箱，培养5天4）空白对照组与洗手后样品检验：

取空白对照组采样管内10mL，加入到含90ml的无菌生理盐水中，摇匀，取10ml注入微生物限度仪过滤杯，启动仪器进行抽滤-过滤完成后，用40mL无菌生理盐水分2次冲洗过滤杯（每次20mL），确保杯壁无残留取洗手后样品，取用10mL样品溶液全部过滤，40mL无菌生理盐水分2次冲洗。-每个样本对应1个TSA培养基平板，做好标识（样本编号、检验日期）-平板倒置放入30-35℃恒温培养箱，培养5天5）阳性对照组检验：-在生物安全柜内，取10mL无菌生理盐水注入过滤杯，加入0.1mL金黄色葡萄球菌标准菌株稀释液（含菌量约100CFU），轻轻混匀-按上述过滤步骤操作（10mL溶液全部过滤，40mL无菌生理盐水分2次冲洗）-滤膜菌面朝上贴于TSA培养基平板，倒置培养（30-35℃，5天），验证培养基有效性及过滤操作合规性。6）结果观察与计数：-培养结束后，取出平板，用菌落计数器计数TSA平板上的菌落数（CFU）8.可接受标准8.1.

阴性对照组：TSA培养基平板均无菌落生长，证明采样工具、培养基、检验过程无无菌污染8.2.

阳性对照组：TSA培养基平板菌落数在80-120CFU之间（符合100CFU左右的浓度要求），证明培养基有效、过滤操作合规8.3.

空白对照组：菌落数≥5000CFU/手（作为洗手效果对比基准）计算公式：总数＝平皿数×508.4.

洗手后样本：-微生物总数≤300CFU/手计算公式：总数＝平皿菌数×58.5.

验证合格：3次测试（每次间隔24小时以上）均满足上述要求，且每次洗手后样本合格率100%9.再确认9.1.正常情况下：每3年今晚全面再确认9.2

洗手液品牌、型号、配方变更9.3人员结构发生重大变化（如新增50%以上洁净区人员）10.偏差异常处理10.1结果超标处理1）立即暂停相关人员进入洁净区，隔离涉事批次产品（若有）2）调查原因：人员操作：核查洗手是否规范（揉搓时间、覆盖部位、冲洗是否彻底）、采样配合是否到位物料问题：检查洗手液有效期、无菌状态，培养基、滤膜是否合格环境/设备因素：洗手设施、检验环境、仪器设备是否存在污染或故障3)纠正措施：操作不规范：重新开展专项培训，实操考核合格后方可上岗物料问题：更换合格洗手液、培养基、滤膜，追溯不合格物料批次并隔离环境/设备问题：强化清洁消毒流程，维修校准设备后验证合格4）重新验证：采取纠正措施后，重新进行3次验证。10.2样本污染处理1）若阴性对照组出现菌落生长：排查污染来源：培养基灭菌不彻底、滤膜无菌性不合格、检验环境/操作污染更换合格物料，重新消毒操作环境，对检验人员再培训，重复该批次验证2）若空白对照组或洗手后样本出现异常污染：重新采样检验，扩大对照组样本量（每次新增3个阴性对照）检查采样环境、检验设备的洁净状态，必要时进行环境微生物监测10.3设备故障处理

1）检验过程中设备故障（如微生物限度仪抽滤异常、培养箱温度波动）：立即停止检验，记录故障时间、状态，保护已处理样本维修校准设备，确认合格后重新处理样本（已污染或处理中断的样本作废）2）滤膜破损处理：过滤过程中发现滤膜破损，该样本作废，重新取样检验检查滤膜储存条件、设备夹持力度，避免再次破损10.4操作失误处理1）采样操作失误（如棉