老年髋部骨折生物样本的采集和处理规范-征求意见稿

Q/LB.□XXXXX-XXXXT/CRHAXXXX—XXXX目次TOC\o"1-1"\h前言 II引言 III1范围 12规范性引用文件 13术语和定义 14样本采集前准备 25血液、骨骼和肌肉样本的采集和处理 46样本保藏 67样本入库、出库和运输 7附录A（资料性）老年髋部骨折样本采集病例报告表 8附录B（资料性）生物样本库标签打印规则 9附录C（资料性）老年髋部骨折生物样本库套装分类范例 10附录D（规范性）血样本处理方法 11附录E（规范性）骨骼、肌肉样本质量分类及处理方法 12附录F（规范性）样本运输 15参考文献 16前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件是T/CRHAXXXX-XXXX《老年髋部骨折生物样本的采集和处理规范》。考虑到本文件中的某些条款可能涉及专利，中国研究型医院学会不负责对任何该类专利的鉴别。本文件由中国研究型医院学会临床数据与样本资源库专业委员会提出。本文件由中国研究型医院学会归口。本文件起草单位：解放军总医院第一医学中心、解放军总医院医学创新研究部。本文件主要起草人：。引言随着人口老龄化的不断加剧，老年髋部骨折的发生率逐年上升。髋部骨折如股骨颈骨折、粗隆间骨折等是老年患者中最为常见的骨折类型之一，其具有高致死率、高致残率、高并发症发生率的特点，严重影响患者健康及生活质量。近年来，针对老年髋部骨折的研究呈现迅猛发展的态势，包括发生机制探索、危险因素挖掘、风险模型建立和临床疗效评估等。随着相关研究的深入，对于髋部骨折生物样本的需求也不断增长。老年髋部骨折样本的采集具有多样性和复杂性。为了确保采样过程的严谨和同质化，保证样本间的可比性，有必要对老年髋部骨折样本的采集和处理进行规范，为后续科研产出奠定坚实的基础。T/CRHAXXXX旨在规范老年髋部骨折生物样本（血液、股骨头、股骨颈、臀大肌等）的采集前准备、采集、处理、保藏和运输等流程。本文件用于开展老年髋部骨折生物样本的采集、处理、保藏和运输的生物样本库。为从事相关科学研究的单位提供完整的参考。老年髋部骨折生物样本的采集和处理规范范围本文件规定了老年髋部骨折生物样本（血液、股骨头、股骨颈、臀大肌等）的采集前准备、采集、处理、保藏和运输等全流程的技术规范。本文件适用于开展老年髋部骨折生物样本的采集、处理、保藏和运输的生物样本库。规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T37864生物样本库质量和能力通用要求GB/T38576人类血液样本采集与处理GB/T38736人类生物样本保藏伦理要求GB/T39767人类生物样本管理规范GB/T39768人类生物样本分类与编码GB/T40364人类生物样本库基础术语WS/T225临床化学检验血液标本的收集与处理WS/T661静脉血液标本采集指南术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1骨骼生物样本bonebiospecimens为开展科学研究，从人体获得的骨骼组织生物样本材料，包括但不限于股骨头、股骨颈和股骨干部位的皮质骨和松质骨。3.2肌肉生物样本musclebiospecimens为开展科学研究，从人体获得的肌肉组织生物样本材料，包括但不限于臀大肌、股四头肌、阔筋膜张肌等。3.3血液生物样本bloodbiospecimens为开展科学研究，从人体获得的血液相关的生物样本材料，包括但不限于全血、血浆、血清、蛋白等。3.4髋部骨折hipfractures指髋关节周围发生的骨折，包括股骨颈骨折、髋臼骨折、粗隆间骨折、粗隆下骨折等。3.5人工髋关节置换术hipjointarthroplasty指使用金属、陶瓷或聚乙烯等材料的假体取代整个或部分病变关节的手术。3.6临床研究骨干clinicalresearchfellow负责老年髋部骨折收集对象的识别入组、捐赠者知情同意的获取、临床-实验室沟通的工作人员，可由相关临床科室的医师担任。3.7临床研究助理clinicalresearchassistant负责血液样本的采集、运送以及填写血液样本流程单的工作人员，可由样本库的技术员或者相关临床科室的护士来担任。3.8样本库技术员biobanktechnician负责各类样本的采集，以及后续的处理、保藏、出库，以及填写样本流程单的工作人员，可专职雇用或由培训合格的医师或护士担任。以下简称技术员。3.9样本流程单sampleworkflowsheet用来记录样本的采集、处理和保藏过程的表单，按照采集的样本类型分为：血液样本流程单、手术切除骨骼组织样本流程单、手术切除肌肉组织样本流程单。3.10样本库管理系统biobankmanagementsystem用来记录和追踪样本库内保藏的样本所处的位置与样本所关联的所有信息的一套完善的信息化软件系统。3.11套装kit为了方便样本的采集，将样本采集或处理流程中所需的相关耗材集中包装在一起，并以标签标注，按照功能不同进行分类，包括血液样本采集套装、血液样本处理套装、骨骼样本采集套装、和肌肉样本采集套装。样本采集前准备4.1伦理审批人类生物样本保藏的伦理方面应符合GB/T38736的要求。在本单位或上级单位伦理委员会对相关方案和文件材料批准同意后，再进行样本采集和保藏的相关工作。此外，任何相关文件的修改必须再次获得伦理委员会批准后实施，同时按照我国相关法规和伦理委员会要求及时递交其他跟踪审查文件。4.2行政审批根据《中华人民共和国人类遗传资源管理条例》（以下简称《条例》）的要求，在《条例》要求内的项目组需在获得伦理批件后向国务院科学技术行政部门报批。样本若需要保藏，则应保藏在有行政许可资质的地点。4.3人员配备4.3.1相关人员主要包括管理人员、临床研究骨干、临床研究助理、样本库技术员。4.3.2相关人员应具有临床医学、临床检验诊断学、护理学、生物学、病理学或管理学等相关专业背景，同时应接受生物样本库的专业培训后上岗。4.3.3相关人员应签署保密协议。4.4设备配备4.4.1信息管理系统：样本库应配备一套完整的信息管理系统，用于追踪样本的详细位置信息，该系统还应具备追踪样本的入库、出库、销毁等记录的功能。4.4.2超低温冰箱：可提供长期稳定的-80℃样本保藏条件。4.4.3液氮罐：便携式液氮罐用于样本采集过程中的临时保藏和运输，大型液氮罐用于样本的长期-196℃保藏。4.4.4其余设备包括但不限于台式冷冻离心机、生物安全柜、水平摇床、电热干燥箱、高压消毒锅。4.5知情同意获取4.5.1临床研究骨干根据纳入标准和排除标准负责确定适合进行生物样本采集的病例，并通知技术员准备采集。4.5.2纳入标准：①对象年龄>50岁；②诊断为股骨颈骨折或股骨头骨折（左/右/双侧）；③拟接受人工髋关节置换术或其他开放性髋部手术；④髋部骨折发生3个月之内。4.5.3排除标准：①患有各种严重传染性疾病的患者，包括但不限于：乙型肝炎、艾滋病、梅毒、新型冠状病毒等各种感染；②患有导致骨质明显发生变化的疾病的患者，包括但不限于骨肿瘤、各种原因导致的骨代谢异常、成骨不全、小儿麻痹后遗症等；③长期服用激素类药物的患者。4.5.4临床研究骨干负责与样本捐赠者沟通，使用捐赠者可以理解的简明语言充分告知捐赠者采集的目的、程序、风险控制和补偿、隐私保护等，并获得捐赠者的书面知情同意。4.6临床信息采集4.6.1基本信息采集：将每一位样本捐赠者注册至信息管理系统，填写基本信息，包括但不限于姓名、住院号、性别、年龄、电话、身份证号等。4.6.2填写病例报告表，包括骨质疏松调查问卷、肌少症调查问卷、骨代谢及骨密度检查结果等（病例报告表详见附录A）。4.7标签准备4.7.1标签使用一套可生成唯一识别号的编号系统对样本进行管理，样本编号由样本库管理系统进行自动分配并管理（样本编号规则参见附录A）。为确保样本长期具有可识别性，低温环境下（-196℃/-80℃）保藏的样本，应使用耐低温标签。4.7.2标签内容技术员负责打印套装中各物品所对应的粘性标签，标签所打印内容应包括样本编号和样本类型，也可包括样本库管理系统自动生成的条形码或二维码（标签打印范例参见附录B）。不适宜粘贴标签物品（例如石蜡标本盒）可使用手工标记。4.8套装准备4.8.1使用相同类型但不同颜色标识的容器储存不同类型样本，以方便管理及辨识内容物。并且按照不同的生物样本采集或处理的标准流程，将各耗材归类形成相应套装。4.8.2将粘性标签贴于所对应各物品的合适位置，不适宜粘贴标签物品使用手工标记，以达到套装内所有物品均有明确标记。4.8.3将标记的物品分别放入对应的套装中，同时在套装袋上贴标签标记。4.8.4套装分类：套装按照不同的样本采集或处理流程的应用场景，分为以下四种：血液样本采集套装、血液样本处理套装、骨骼样本采集套装、肌肉样本采集套装（具体套装内容范例参见附录C）。=5\*Arabic5血液、骨骼和肌肉样本的采集和处理5.1血液样本采集和处理5.1.1采集前应由临床研究助理确认知情同意书填写无误，并核对捐赠者身份信息（如：ID号、住院号、姓名等）与所使用血液样本采集套装及物品编号匹配，然后由临床护士负责抽血。5.1.2为满足后期科研用途选择不同的采血管，包括但不限于采用非抗凝管、EDTA抗凝管。5.1.3抽血完成后，将采血管置于4℃的保温转运箱内，由临床研究助理将知情同意书连同所采集血液样本一起送至生物样本库交给技术员，建议血液样本自采集至送达样本库的时间少于2小时并全程置于4℃环境下。5.1.4技术员应对样本质量进行检查，确认样本质量完好（如：血液样本无溶血、采血管完整无破损、采血量足够等）和知情同意书签署符合要求（签字位置准确且完整、字迹清晰等），并做好相关记录并在样本交接单上签字确认。5.1.5技术员使用准备好的血液样本处理套装，按照WS/T225、WS/T661和GB/T38576的要求进行样本处理，分离获得血清/血浆/血细胞等（血样本处理方法也可参照附录D）。5.2骨骼组织样本采集5.2.1手术开始前，由技术员确认需要采集骨骼组织的病例，准备骨骼样本采集套装，确认保温转运箱中有足量的冰块维持温度或者便携式液氮罐中有适量的液氮。5.2.2技术员携带保温转运箱或便携式液氮罐和相应的套装前往手术室，等待手术标本离体，并在样本流程单上记录主要标本离体时间（精确到分），分别包括股骨头和股骨颈，若同一样本分多部分离体取出则记录多个时间。5.2.3骨骼组织样本从手术台上取下后，对样本进行检视，然后进行称重及长、宽、厚度的测量，及拍照留底大体情况，以确保收集的骨骼组织符合取样要求。5.2.4技术员用生理盐水纱布拭去表面过多的血液，后用吸水纸吸干表面水分，随后使用骨骼样本采集套装按需求进行分装，将分装好的样本置于保温转运箱或便携式液氮罐中，并在冷缺血半小时之内根据需要对样本进行下一步处理。5.3肌肉组织样本采集5.3.1手术开始前，由技术员确认需要采集肌肉组织的病例，准备肌肉样本采集套装，确认保温转运箱中有足量的冰块维持温度或者便携式液氮罐中有适量的液氮。5.3.2技术员携带保温转运箱或便携式液氮罐和套装前往手术室，肌肉样本采集时应沿肌纤维走行方向进行分离，于两端垂直肌纤维方向切割。标本离体后在样本流程单上记录主要标本离体时间（精确到分），若同一样本分多部分离体取出则记录多个时间。5.3.3肌肉组织样本从手术台上取下后，对样本进行检视，然后进行称重及长、宽、厚度的测量，及拍照留底大体情况，以确保收集的肌肉组织符合取样要求。5.3.4技术员用生理盐水纱布拭去表面过多的血液，后用吸水纸吸干表面水分，剔除肌肉样本表面中可见的脂肪及多余的结缔组织，然后使用肌肉组织采集套装进行分装，应沿与肌纤维垂直方向分割，组织大小宜为20mm×5mm×5mm，随后置于保温转运箱或便携式液氮罐中，并在冷缺血半小时之内根据需要对样本进行下一步处理。5.4骨骼和肌肉样本处理5.4.1根据骨骼和肌肉样本的后续用途需要进行不同的样本质量分类以及相对应的不同处理（详情见附录E），其中包括但不限于细胞提取冻存法、程序性降温法、RNAlater固定法、异戊烷速冻法、常规液氮速冻法和福尔马林固定法。5.4.2细胞提取冻存法：在取得样本后立刻对样本进行细胞提取，能够最大保证组织的活性及细胞培养的成功率。5.4.3程序性降温法：可保存样本生物活性，用于细胞培养、RNA测定、蛋白质测定、DNA测定。通过添加DMSO冻存液并逐步降温，可避免冰晶形成。5.4.4RNAlater固定法：能够迅速破坏组织中存在的RNA酶，对于RNA的保护效果最佳。5.4.5异戊烷速冻法：制作冰冻切片成片质量高。冻存的组织在冰冻切片检查中具有较好表现。5.4.6常规液氮速冻法：放入冻存管后直接置入液氮中，可以保证DNA、RNA、蛋白质的保存。5.4.7福尔马林固定法：福尔马林固定的骨骼、肌肉样本可以用于制作石蜡切片。6样本保藏6.1保藏环境6.1.1场地：生物样本库应明确规定其活动所需要的场地及环境要求，应设置专用场地。场地划分应包括但不限于接收/分发区域、储存区域、办公区域、污染区、清洁区等。6.1.2通风、温湿度：生物样本库储存空间，尤其是有多台产热设备（如：超低温冰箱）的房间，应配置环境温湿度控制设备，室内温度应控制在16℃-28℃，湿度应控制在30%-80%。建议在液氮罐储存区域内安装气体监测装置（如O2监测器），在冰箱存储区域保证足够的空气流动。6.1.3供电保障：生物样本库应配备双电路供电系统和/或备用不间断供电电源。6.1.4储存环境包含但不限于上述内容，详情参考ISBER最佳实践。6.2保藏方法6.2.1低温保藏法6.2.1.1可选用液氮直接保藏或组织保护液保藏。6.2.1.2液氮直接保藏法：组织分装至冻存管后，立即将冻存管置于液氮（-196℃）中保藏。6.2.1.3组织保护液保藏法：组织分装至装有组织保护液的冻存管内，组织保护液与样本的体积比应至少为10:1，应保证样本全部浸入保护液，然后将冻存管置于液氮中保藏。6.3信息登记完成上述保藏程序后，技术员将样本基本信息、储存位置和标准分析前代码登记于各类文件和/或样本库管理系统中。6.4安全监控6.4.1场地安全：生物样本库应配备无水阻燃剂灭火器和消防给水系统，并且定期对消防设施进行检修和维护。同时，还应具备完善的应急预案以应对各种紧急事故（包括但不限于火灾、水灾、生物安全灾害、人员触电/缺氧急救等），并对该预案进行定期测试。6.4.2实体设备安全：超低温冰箱应配备冷链系统，同时设置每隔一段时间对冰箱内温度进行监测，当出现超出设定温度范围时能够及时发出警报，通知工作人员采取合理的处理措施。对于液氮罐，应定期测量液氮的液面高度，或直接使用能够自动检测液氮剩余量并填充液氮的液氮罐。6.4.3样本数据安全：所有涉及患者个人信息的数据均应储存在安全的环境中，并与外界设有安全措施（如电子密码、物理锁或指纹锁等）。生物样本库的所有数据应定期备份于物理地址隔绝的另一个完全的环境中。7样本入库、出库和运输7.1样本入库：申请提出和协议签署：申请者提交入库申请。并与样本库签订协议，了解双方的权利和义务，确保样本的质量，维护捐赠者在伦理、法规等方面的权益，避免日后的纠纷。7.2样本出库：由申请者提交样本使用申请及研究计划伦理审批书，经项目组负责人、样本库负责人审核通过、学术委员会签字批准同意方可进行样本的出库。样本出库由样本库技术人员执行，并留档保存过程文件。7.3样本运输：应根据样本类型不同，选择不同的运输保温措施，根据样本运输的预计时间准备保温材料，充分保证运输过程中的温度控制符合要求（具体参见附录F）。附录A

（资料性）

老年髋部骨折样本采集病例报告表老年髋部骨折样本采集病例报告表见表A.1表A.1老年髋部骨折样本采集病例报告表内容范例样本登记号：住院号：ID号：身份证号：姓名：性别：年龄：联系电话：身高：体重：BMI：科室：联系地址：主诉：简要病史：既往史：家族史：过敏史：个人史：临床诊断：样本类型：肌少症调查问卷运动能力评估得分（SCAR-F：AWGS：≥4；SCAR-CalF：AWGS：≥11）：肌肉力量测试（双侧上肢握力测量）：肌肉总量评估（肢体骨骼肌质量，SMI）：骨质疏松调查问卷既往骨折发生史：糖皮质激素服用：□是□否抗骨质疏松药物是否使用及类型：□是药物类型：□否其他疾病史：□类风湿关节炎□1型糖尿病□甲状旁腺亢进□Cushing综合征□性腺功能减退□Paget骨病□成骨不全□慢性营养不良或吸收不良□慢性肝病□__________骨密度检查结果（髋关节/腰椎）骨密度（克/厘米2）：T-评分：Z-评分：分类：□骨质疏松□骨质减少□骨质正常骨代谢检验结果骨钙素：I型胶原羧基端前肽：全段甲状旁腺激素测定：25羟基维生素D3：B-胶原降解产物测定（B-CTX）：患者知情同意：□是□否项目负责人签字：年月日附录B（资料性）生物样本库标签打印规则B.1样本类型分类标签按样本类型分类的代码由两位大写英文字母+年份+编号+一位大写英文字母+四位阿拉伯数字组成，其中两位大写英文字母代表项目编号，一位大写英文字母代表一级代码，四位阿拉伯数字分别代表二级和三级代码。按样本类型分类的标签打印模板见图B.1。图B.1按样本类型分类的标签打印模板B.2器官来源分类标签按器官来源分类的代码由两位大写英文字母+年份+编号+一位小写英文字母+四位阿拉伯数字组成，其中两位大写英文字母代表项目编号，一位小写英文字母代表一级代码，四位阿拉伯数字分别代表二级和三级代码。按器官来源分类的标签打印模板见图B.2。图B.2按器官来源分类的标签打印模板附录C（资料性）老年髋部骨折生物样本库套装分类范例老年髋部骨折生物样本库套装分类及明细内容建议见表C.1表C.1老年髋部骨折生物样本库套装分类及明细内容范例套装名称主要耗材辅助材料流程单标签血液样本采集套装EDTA抗凝血浆分离管×1、血清分离管×1/血样本流程单所有物品对应标签血液样本处理套装冻存管（红色盖）×4、冻存管（白色盖）×4、微量离心管×4//所有物品对应标签骨骼样本采集套装冻存管（蓝色盖）×3，50ml离心管×1，标本袋×3样本称重秤，L型标尺，相机手术切除骨骼样本流程单所有物品对应标签肌肉样本采集套装冻存管（蓝色盖）×3，50ml离心管×1样本称重秤，L型标尺，相机手术切除肌肉样本流程单所有物品对应标签附录D（资料性）血样本处理方法D.1血浆样本处理D.1.1抗凝采血管于离心机中，建议1500g-2000g,离心10分钟。D.1.2离心后，取出采血管，此时血样分为三层：上层即为血浆层，中层为白膜层，下层为红细胞层。D.1.3使用移液器或者一次性吸管吸取上层血浆层，注意避免吸入白膜层。D.1.4将血浆按需分装至冻存管中。D.1.5采血管中剩余血细胞留着处理白膜层。D.2白膜层处理D.2.1吸出血浆后，使用移液器或者一次性吸管吸取中层白膜层。D.2.2将白膜层按需分装至冻存管中。D.3血清样本处理D.3.1将无抗凝剂采血管按要求静置（建议无添加剂普通血清管室温静置1h，含促凝剂血清管室温静置5min，含分离胶血清管室温静置30min）。D.3.2然后采血管于离心机中，建议1500g-2000g,离心10分钟。D.3.3离心后，取出采血管，此时血样分为两层或三层，上层为血清层，中层为分离胶层（含分离胶采血管），下层为血凝块层。D.3.4使用移液器或者一次性吸管吸取上层血浆层，注意避免吸血凝块或分离胶。D.3.5将血浆按需分装至冻存管中。附录E（资料性）骨骼、肌肉样本质量分类及处理方法老年髋部骨折骨骼、肌肉样本质量分类内容见表E.1表E.1老年髋部骨折骨骼、肌肉样本质量分类分类ABCDEF方法用途细胞提取冻存法程序性降温法RNAlater固定法异戊烷速冻法液氮速冻法福尔马林固定法细胞培养/单细胞测序★★★★★××××RNA提取★★★★★★★★★★★★★×蛋白质提取★★★★★★★★★★★×DNA提取★★★★★★★★★★★冰冻切片×★★★★★★★★★★×石蜡切片×★★★★★★老年髋部骨折骨骼、肌肉样本处理方法根据样本质量分类不同分为以下方法：细胞提取冻存法、程序性降温法、RNAlater固定法、异戊烷速冻法、液氮速冻法和福尔马林固定法。E.2A级-细胞提取冻存法（人类肌卫星细胞）E.2.1人类肌肉卫星细胞分离E.2.1.1将肌肉组织转移至10cm培养皿，用剪刀剪碎，加入消化液；37摄氏度培养箱，孵育15分钟，而后吹打肌肉组织，重复三次；后将肌肉组织液体转移至50ml离心管中重复离心两次（建议320G，10分钟）；弃上清液，加入PBS液重悬细胞至10cm培养皿。E.2.1.2差贴孵育：将上述培养基置于培养箱中，孵育15分钟，以部分去除成纤维细胞；取出培养基后，将上方液体转移至胶原包被的10cm培养基，培养过夜；次日，弃去上清液，加入0.125%胰酶消化，消化完成后，离心。重复两次差贴孵育后，肌肉卫星细胞原代细胞提取完成。E.2.2人类肌肉卫星细胞冻存E.2.2.1取出肌卫星细胞培养皿，移除培养基，加入1.5ml0.125%胰酶37℃消化10s，当绝大部分肌卫星细胞形态发生改变后，中止消化。后离心（800rpm，3分钟），弃上清液，加入细胞冻存液吹打重悬后置于冻存管中。E.2.2.2将冻存管放入程序降温盒，-80°C过夜；次日，将冻存管转移至液氮中冻存。E.3B级-程序性降温法E.3.1事先将程序降温盒放置于4℃冰箱备用。将样本置于25mm*8mm塑料薄膜上，置入2ml冻存管中。于冻存管上标注编号及样本类型。将冻存管置于程序降温盒中，放入-80℃冰箱过夜。次日，将冻存管转移至液氮中继续保存。程序降温盒放回4℃冰箱备用。E.4C级-RNAlater固定法E.4.1取得样本后，应当尽快将样本浸没至RNAlater中，以尽可能地减少RNA数量及质量的变化。E.4.2在浸没之前对样本进行裁剪，保证至少在任意一个维度上，RNAlater的厚度<5mm。E.4.3将样本放入10ml离心管中，加入至少5倍于样品体积的RNAlater组织保护液后放入4℃冰箱过夜。次日，去除RNAlater溶液，将样本放置25mm*8mm塑料薄膜上。后将样本放入冻存管，转移至液氮罐中继续保存。E.5D级-异戊烷速冻法E.5.1用纸巾将样品吸干除去水分，将样本放置于包埋盒底部，使用OCT在基底部固定组织。包埋盒上做好信息标记。在金属杯中加入异戊烷，将金属杯没入液氮中，当异戊烷杯底形成白色固态物质，则提示温度合适（约-140°C~-149°C），将载有样本的包埋盒放入异戊烷中，冷冻约10-20s，取出样本。用干冰将样本转运至-80°C冰箱中保存。E.6E级-液氮速冻法E.6.1将样本置于25mm*8mm塑料薄膜上；将样本和塑料薄膜一起放入冷冻小瓶的深部中央，用金属镊夹取冷冻小瓶，快速浸入液氮中10-20s，直至液氮停止沸腾；后用长镊夹取塑料薄膜，取出冻结的样品，放入液氮冻存管中，转移到液氮罐中保存。E.7F级-福尔马林固定法E.7.1取得样本后，将样本放入50ml离心管或样本袋中；加入4%多聚甲醛、或10%福尔马林溶液，加入的溶液体积至少应当超过样本体积的5-10倍。放入4℃冰箱保存后，尽早包埋。附录F（资料性）样本运输F.1运输温度F.1.1冷藏样本（2-8℃）：应装入冰块或凝胶袋（-15℃冷藏温度或用相变物质用于冷冻运输）；F.1.2冷冻样本（-20℃）：应使用为冷冻设计的凝胶袋，保持样本温度于-20℃或-20℃以下；F.1.3冷冻样本（-80℃）：应使用干冰颗粒、干冰块、干冰片。干冰冷冻剂被认作危险运输物品，应贴上危险物品的标识符；F.1.4冷冻样本（≤-150℃）：应使用干燥液氮罐运输。将样本置于充有足够量液氮的非密封容器内，液氮被认为是一种危险系数较低的物品，也无需受制于国际航运协会危险物品的管制条约。F.2血液样本运输F.2.1新鲜血样本：常温运输，保证运输过程平稳，切勿剧烈震荡，常温运输，保证采血到运送至生