《微生物检验技术培训课程》课件-项目9：真菌检验

真菌概述BASICPROPERTIESOFFUNGI一、真菌概述真菌的食用价值与药用价值图15-32马尔尼非青需纯培养的镜下形态图15-34马尔尼菲青霉在SDA上的菌落特征HIV阳性!检出马尔尼菲青霆菌确诊小阳鑫严重感染罕见的马尔尼菲青霉菌真菌是一大类具有细胞壁和典型细胞核，不含叶绿素，无根、茎、叶分化，由单细胞或多细胞组成的真核细胞型微生物。它们以寄生或腐生方式摄取养料。分布广、种类多。病原性真菌能引起人和动物某些疾病的真菌称病原性真菌，可引起感染性、中毒性及超敏反应性疾病。但大多对人无害甚至有益。二、真菌致病性与免疫真菌引起的疾病多为慢性疾病。浅部真菌感染：对机体除产生机械刺激外，并产生酶和酸性物质可引起炎症和细胞病变。如：癣；1深部真菌感染：侵害深部组织及内脏引起慢性肉芽肿性炎症和组织溃疡及坏死。如：念珠菌性阴道炎；2真菌超敏反应性疾病：过敏性鼻炎、哮喘。3二、真菌致病性与免疫真菌性中毒症：黄曲酶毒素B1。4真菌毒素与肿瘤的关系：黄曲霉素与肝癌。5内源性感染：条件致病菌，菌群失调症。6三、真菌的形态与结构（一）形态大小不一，形态多样单细胞真菌：呈圆形或卵圆形，常见为酵母和类酵母菌（

如隐球菌、念珠菌）。芽生方式多细胞真菌由菌丝和孢子组成，菌丝分枝交织成团形成菌丝体（Mycelium)，并长有各种孢子，这类真菌即一般称为霉菌，或称丝状真菌。三、真菌的形态与结构（二）结构大小不一；结构复杂细胞壁不含肽聚糖，由蛋白质和多糖组成，含胆固醇抗生素无效❶菌丝：真菌以孢子出芽方式繁殖，在适宜环境中孢子长出芽管，并逐渐延长呈丝状故称菌丝。可分为营养菌丝体、气中菌丝体、生殖菌丝体等。无隔/有隔（致病性）形态多样石膏样癣菌黄癣菌铁锈色小孢子菌三、真菌的形态与结构（二）结构❷孢子：是真菌的繁殖结构。按细胞核是否融合，分有性和无性孢子：有性孢子：由同一个菌体或不同菌体的两个细胞融合后，经减数分裂形成。如卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子。无性孢子：由菌丝直接形成，不发生细胞融合。病原性真菌多属此类，形态分三类：叶状孢子分生孢子孢子囊孢子酵母菌、隐球菌、念珠菌休眠体，白色念珠菌等地丝菌、球孢子菌根霉、毛霉等四、真菌的繁殖与培养（一）繁殖方式：有性和无性繁殖繁殖方式芽管繁殖出芽繁殖分裂繁殖生隔繁殖四、真菌的繁殖与培养（二）培养特性培养：大多数真菌营养要求不高，在沙保氏培养基（含4%葡萄糖1.0%蛋白胨）pH4.0～6.0，22～28℃，需要较高的湿度和氧。1-2w出现典型菌落。常加放线菌酮和氯霉素。繁殖：酵母菌以二分裂方式，多数产生孢子、出芽、形成菌丝、菌丝的断裂。生长慢。类酵母菌可在1-2天内长出菌落。图14-17石膏样小抱子菌纯培养的镜下形态（乳酸酚棉蓝染色）图14-18石膏样小抱子菌在SDA上的菌落特征（7-10d）图15-37黄曲霉纯培养的镜下形态图15-38黄曲霉在PDA上的菌落特征（2星期）图15-53少根根霉纯培养的镜下形态（乳酸酚棉蓝染色）真菌三种类型菌落酵母型菌落，形态与一般细菌菌落相似，菌落光滑湿润、柔软而致密。以出芽形式繁殖，如新型隐珠菌、酵母菌。酵母样菌落，外观似酵母菌落，但可见伸入培养基中的假菌丝，它是由伸长的芽生孢子形成，由菌落向下生长，伸入培养基中。如白色念珠菌。丝状菌落，为多细胞真菌的菌落，由许多疏松菌丝体组成。丝状菌落呈絮状、绒毛状或粉末状，在下面和背面可显示各称不同色素。见于大多数丝状真菌和霉菌的菌落。五、真菌的变异与抵抗力变异性：容易发生变异，形态、菌落、色素、毒力变异。抵抗力：对干燥、阳光、紫外线及一般消毒剂有较强抵抗力，不耐热，60℃1h即被杀灭。对抗生素不敏感，对石碳酸、碘酒、甲醛、抗真菌药物敏感。小结真菌的致病性真菌的形态结构真菌的繁殖与培养真菌的变异与抵抗力小结感谢观看THANKYOUFORWATCHING浅部感染真菌检验FUNGALEXAMINATIONFORSUPERFICIALINFECTION确诊小阳鑫严重感染罕见的马尔尼菲青霉菌浅部真菌主要为皮肤丝状菌，侵犯皮肤、毛发、指甲等角化组织引起癣症，又称癣菌，分毛癣菌、表皮癣菌和小孢子癣菌三属。均能引起皮肤癣病，我国以红色毛癣菌最常见。一、生物学性状毛癣菌属真菌插图照片摄影毛状小抱子菌三、微生物学检验1.传播方式：间接接触传播直接接触传播2.所致疾病表皮癣菌属：絮状表皮癣菌，体癣、股癣、足癣和甲癣，不侵犯毛发。毛癣菌属：红色毛癣菌、许兰毛癣菌、紫色毛癣菌、断发毛癣菌。及石膏粉状毛癣菌，可引起皮肤、毛发和指（趾）甲感染。小孢子癣菌属：铁锈色小孢子癣菌和犬小孢子菌等，头癣与体癣。三、微生物学检验1.标本的采集浅部：取病变部位皮屑、毛发、指甲等。2.检验方法❶直接镜检：检查有无菌丝和（或）孢子10%KOH微加热，软化标本，低倍或高倍镜检。图14-9紫色毛癣菌病发标本直接压片镜检图14-1红色毛癣菌感染部位皮屑标本直接镜检（KOH处理）三、微生物学检验❷分离培养与鉴定：取毛发、皮屑、甲屑等标本，用70%乙醇消毒，接种沙保弱琼脂斜面培养基，25~28℃培养7~14天，根据菌落形态、颜色，并挑取菌落镜检菌丝及孢子的特征进行鉴定。培养基：沙氏、血平板、普平。图14-17石膏样小跑子菌纯培养的镜下形态（乳酸酚棉蓝染色）图14-18石膏样小抱子菌在SDA上的菌落特征（7~10d）三、微生物学检验❸荧光检查：荧光检查主要用于头癣检查。黄癣菌病发：暗绿色荧光。白癣小孢子菌属的病发：亮绿色荧光。四、浅部真菌感染防治治疗：浅表真菌的感染，通常需要外用抗真菌的药物来治疗，比如应用酮康唑乳膏、硝酸咪康唑乳膏。如果单纯外用药物治疗效果不好，必要的时候还需要口服抗真菌的药物,比如伊曲康唑。预防：增强抵抗力、注意个人卫生。感谢观看THANKYOUFORWATCHING新型隐球菌检验EXAMINATIONFORCRYPTOCOCCUSNEOFORMANS案例导入病例：有位成年淋巴瘤患者起病慢，开始时阵发性头痛，逐渐加剧，并伴有发热、恶心、呕吐、脑膜刺激征阳性。送检脑脊液标本墨汁染色找隐球菌。附化验单案例导入新型隐球菌又名溶组织酵母菌，是土壤，鸽类，牛乳、水果等的腐生菌，广泛分布于自然界及动物体内（如鸽子的肠道）。本菌对人为外源性感染，多发生于免疫力低下者。一、生物学性状1.形态与染色2.培养：在沙保氏琼脂及血琼脂培养基上，于25及35℃能生长，而非病原性隐球菌在35℃不能繁殖。培养数日后生成酵母型菌落，初呈白色，10天后转淡黄或棕黄、湿润粘稠，状似胶汁。本菌能分解尿素，以此与酵母菌和念珠菌鉴别。一、生物学性状3.致病本菌大多由呼吸道转入，在肺部引起轻度炎症，或隐性传染。亦可由破损皮肤及肠道传入。当机体免疫功能下降时可向全身播散，主要侵犯中枢神经系统，发生脑膜炎、脑炎、脑肉芽肿等，此外可侵入骨骼、肌肉、淋巴结、皮肤粘膜引起慢性炎症和脓肿。一、生物学性状4.检查脑脊液中可见圆形厚壁并围以厚荚膜的酵母样细胞。沙保培养基上形成棕黄色粘液样菌落。脑内或腹腔注射小白鼠可导致死亡。血清学方法检出隐球菌荚膜多糖抗原，对该病诊断可提供重要帮助，在已确诊的隐球菌脑膜炎患