生物制品稳定性研究技术指导原则(试行)

生物制品稳定性研究技术指导原则(试行)1目的与适用范围本指导原则旨在规范生物制品稳定性研究的设计、实施与结果评价，为生物制品研发、注册申报及上市后变更的稳定性研究提供技术指导，保证生物制品在有效期内质量安全、有效可控。本指导原则适用于治疗类、预防类生物制品，包括但不限于重组治疗蛋白、单克隆抗体/双特异性抗体等抗体药物、疫苗、基因治疗产品、细胞治疗产品、血液制品、多肽类生物制品、毒素/抗毒素类产品。体外诊断试剂不适用本指导原则，已有专门技术规范的产品可结合本指导原则要求开展研究。2基本原则2.1基于风险的原则生物制品具有分子结构复杂、异质性高、对生产工艺和环境因素敏感等特点，需结合产品的分子特征、作用机制、给药途径、剂型、包装系统、贮藏运输条件识别潜在降解风险，根据风险程度确定稳定性研究的考察内容、深度与广度。对易发生降解、聚集、失活的高风险产品，应增加考察频次、扩大考察项目范围。2.2全程研究原则稳定性研究应贯穿生物制品研发、临床试验、上市申报、上市后全生命周期，随研发推进逐步积累数据，不断完善贮藏条件与有效期设定。不同阶段的研究结果互为支撑，早期研究结果支撑后期试验设计，后期研究数据验证早期结论。2.3代表性原则研究用样品需能够代表商业化生产产品的质量特征，工艺、处方、包装应与拟上市产品一致，需覆盖生产过程中正常的工艺波动范围，保证研究结果可反映上市产品的实际稳定性。2.4可比性原则发生生产工艺变更、场地变更、处方变更、包装变更等情况时，需通过可比性分析证明变更后产品的稳定性与变更前一致，未发生不利变化。3稳定性研究设计3.1样品要求3.1.1批次与规模注册申报阶段稳定性研究需采用至少3批生产工艺稳定的样品；临床试验申请阶段至少为中试规模样品，上市申请阶段需为商业化生产规模样品，生产工艺、质量标准需与商业化产品完全一致。多厂区生产的产品，需每个生产场地至少提供3批代表性批次开展研究。原液与分包装生产分离的产品，需分别开展原液稳定性研究和制剂稳定性研究。3.1.2样品质量与包装研究开始前需确认样品初始质量符合注册标准，所有关键质量属性均符合要求，不合格样品不得用于稳定性研究。研究用包装需与拟上市包装完全一致，包括包装材质、规格、密封形式，早期临床阶段可采用模拟包装开展初步研究，但上市申报阶段必须采用正式包装，同时需同步开展包装与产品的相容性研究，考察可提取物、浸出物对产品质量的影响。3.1.3样品量样品量需满足整个考察周期所有项目的检测需求，同时预留不少于10%的备用量，用于异常结果的复检及后续补充研究。3.2考察条件与试验类型根据研究目的不同，稳定性研究分为影响因素试验、长期稳定性试验、加速稳定性试验、中间条件试验、特殊条件考察五类。3.2.1影响因素试验影响因素试验又称强制降解试验，主要用于研发早期明确产品的降解途径、对环境因素的敏感性，为处方工艺优化、包装选择、贮藏条件确定提供依据。试验要求如下：（1）高温试验：将除去内包装的样品放置于60℃条件下考察10天，于第5天、第10天取样检测，若含量/活性下降超过10%，则改为40℃条件重新试验。（2）高湿试验：将除去内包装的样品放置于25℃、相对湿度92.5%±5%（或75%±5%，根据产品吸湿风险选择）条件下考察10天，于第5天、第10天检测，若吸湿增重超过5%，则改为相对湿度60%条件重新试验。（3）光照试验：将样品放置于光照箱中，控制总照度不低于1.2×10⁶lx·h，近紫外能量不低于200W·h/m²，试验结束后全项目检测。（4）特殊因素考察：针对生物制品特点，需额外开展冻融试验、振荡试验、氧化试验：冻融试验至少完成3次-20℃/室温的冻融循环，考察活性、聚集体变化；振荡试验采用摇床以100~150rpm振摇72小时，考察聚集体、不溶性微粒、活性变化；氧化试验采用适宜浓度过氧化氢处理，明确氧化降解途径与产物。3.2.2长期稳定性试验长期稳定性试验是确定产品有效期、贮藏条件的核心依据，试验条件为拟定的上市贮藏条件，温度、湿度控制要求为：①拟定2~8℃冷藏的产品：控制温度5℃±3℃；②拟定室温贮藏的产品：控制温度25℃±2℃，相对湿度60%±5%；③拟定-20℃冷冻贮藏的产品：控制温度-20℃±5℃；④拟定-70℃超低温贮藏的产品：控制温度-70℃±10℃。考察时间点设置：一般为0、3、6、12、18、24、36个月，有效期超过3年的，每年增加1次检测直至有效期结束；降解速率缓慢的产品可适当延长考察时间间隔，短有效期产品（如细胞治疗产品）可适当加密时间点。3.2.3加速稳定性试验加速稳定性试验用于评估短期偏离贮藏条件对产品质量的影响，验证降解动力学趋势，支持有效期设定，试验条件设置：①2~8℃冷藏产品：加速条件为25℃±2℃，相对湿度60%±5%；②室温贮藏产品：加速条件为40℃±2℃，相对湿度75%±5%；③冷冻贮藏产品：加速条件为5℃±3℃，考察偏离冷冻条件的稳定性。考察时间点一般为0、1、3、6个月，有效期1年以内的产品考察至3个月即可。3.2.4中间条件试验若加速试验条件下产品质量在考察期末发生明显变化，超出可接受限度，需增加中间条件试验，试验条件为30℃±2℃，相对湿度65%±5%，考察时间为12个月，用于进一步评估产品在温和偏离条件下的稳定性，支撑有效期设定。3.2.5特殊条件考察包括运输稳定性考察与使用中稳定性考察：运输稳定性需模拟实际运输过程中的极端温度、温度波动、振动条件，考察周期不短于实际最长运输周期，证明产品在运输过程中质量稳定；使用中稳定性考察针对多剂量包装、需复溶/稀释后使用的产品，考察产品开启、复溶、稀释后在使用条件下的质量变化，确定开启后的使用期限，支撑说明书标注。3.3考察项目考察项目需全面覆盖产品的关键质量属性，包括物理属性、化学属性、生物学活性、纯度、杂质、安全性相关项目，具体要求如下：（1）原液：考察项目包括外观、pH、蛋白含量、比活性、纯度（分子排阻色谱、电泳法）、产品相关杂质（聚集体、降解片段）、工艺相关杂质（宿主细胞蛋白、宿主细胞DNA、残余蛋白A）、微生物限度，冷冻原液需额外考察反复冻融对质量的影响。（2）液体制剂：考察项目包括外观（颜色、澄清度、可见异物）、pH、渗透压、装量、不溶性微粒、含量、活性、聚集体、降解产物、内毒素、无菌。（3）冻干制剂：在液体制剂考察项目基础上增加水分、复溶时间、复溶后外观检查。（4）特殊产品根据特征增加考察项目：细胞治疗产品增加细胞活率、细胞计数、表型、功能；基因治疗产品增加载体滴度、感染性、基因组完整性；疫苗增加抗原含量、病毒滴度；血液制品增加凝血活性、多聚体含量。所有用于稳定性研究的分析方法需经过方法学验证，符合灵敏度、准确度、精密度要求，能够准确检测关键质量属性随时间的微小变化。4不同研发阶段的稳定性研究要求4.1临床前研究阶段本阶段核心目的是筛选处方工艺、确定初步贮藏条件，支撑非临床研究样品质量。需完成完整的影响因素试验，开展至少3批样品的初步长期与加速稳定性研究，研究周期需覆盖整个非临床研究周期，证明非临床研究用样品在试验期间质量稳定。4.2临床试验阶段Ⅰ/Ⅱ期临床试验阶段，需至少提供1~3批中试规模样品的稳定性数据，研究周期需覆盖整个临床试验周期，证明临床试验用样品在试验过程中质量合格。Ⅲ期临床试验阶段，需采用接近商业化生产工艺的样品，开展正式的长期与加速稳定性研究，积累不少于12个月的长期稳定性数据，为上市申报提供支撑。处方工艺发生重大变更的，需重新开展稳定性研究。4.3上市申报阶段需提供至少3批商业化规模样品、采用拟上市包装的完整长期与加速稳定性数据，申报时长期稳定性数据至少覆盖12个月（申报2年有效期）或18个月（申报3年有效期），剩余周期数据可提交后续承诺研究计划，上市后继续考察直至有效期结束。4.4上市后阶段发生生产场地变更、生产规模放大、处方变更、包装材料变更、原料供应商变更、新增适应症等情况时，需根据变更风险等级开展稳定性研究：微小变更需提供至少6个月加速稳定性数据；中等变更需提供至少12个月长期稳定性数据；重大变更需提供完整的长期加速稳定性数据，证明变更后产品稳定性不低于变更前，质量可比。上市后需持续开展上市后稳定性考察，每年度汇总稳定性数据，若发现产品降解速率加快，需及时开展调查，调整贮藏条件或有效期。5结果分析与评价稳定性研究结果需采用趋势分析结合统计方法进行评价，不得仅依据单个时间点结果判断。首先对所有批次所有考察时间点的检测结果进行整理，分析关键质量属性随放置时间的变化趋势，采用线性回归或适宜的非线性模型拟合降解曲线，计算降解速率与95%置信区间。其次评估批间一致性，分析不同批次的降解速率差异，若批间降解速率差异较大，需排查工艺稳定性，设定有效期时需采用最保守的降解速率计算。第三，结合加速试验结果验证长期降解趋势，若加速试验未发生明显降解，长期降解趋势平稳，可支持申报的有效期；若加速试验降解明显，需结合中间条件结果调整有效期。第四，若出现单个时间点结果不合格，需开展OOS（检验结果异常）调查，排除检测误差、样品处理误差、贮藏条件偏差等因素后，若确认是产品降解导致的不合格，需调整处方工艺或缩短有效期。最后，需评估包装容器与产品的相容性，确认浸出物水平符合安全性要求，未对产品质量产生不利影响。6贮藏条件与有效期/复检期确定贮藏条件需根据长期稳定性研究结果确定，不得仅依据加速试验结果推定：若产品在2~8℃条件下有效期内符合要求，25℃条件下6个月不符合要求，则必须标注2~8℃冷藏，不得放宽贮藏条件。原液一般设定复检期，制剂设定有效期。有效期确定需采用拟合降解曲线95%置信区间的下限计算，保证在有效期内所有批次产品的关键质量属性均符合注册标准限度要求。基于部分长期数据申报的有效期，后续获得完整周期数据后，若数据支持更长有效期，可申请延长有效期。标签说明书中贮藏条件需明确标注温度范围、特殊要求（如避光、严禁冻融、避免反复冻融），有效期需标注至具体月份，开启后使用期限需根据使用中稳定性结果明确标注。7特殊类型生物制品的特殊要求7.1细胞治疗产品细胞治疗产品有效期通常较短（多为数小时至数周），需重点考察运输过程中温度波动对细胞活率、表型、功能的影响，开展冻存复苏后稳定性考察，明确不同冻存时间复苏后细胞质量的变化，同时需考察回输前复温、稀释、离心等操作过程中的稳定性，确定操作后的最长放置时间。7.2基因治疗产品病毒载体类基因治疗产品易发生聚集、滴度下降，需重点考察载体滴度、感染性、聚集体含量、基因组完整性随时间的变化，非病毒载体类产品需重点考察粒径分布、转染效率的变化。7.3mRNA疫苗mRNA疫苗易发生降解、二级结构改变，需重点考察