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文档简介
本发明提供了一种荧光发射比率超分辨成激光棱镜其中一束激光传向高速光电二极管探2两束激光,其中一束激光传向高速光电二极管探测器(11所述高速光电二极管探测器延长或缩短环型激发光斑的光程在时间上控制高斯型激光和环形激光之间的脉冲间隔;首先,以环形激光脉冲所在的时间通道为界限将荧光信号分为的灰度值,高斯图像和环形图像中各像素的灰度值分别由IGaussian(x,y)和IDount(x,IFERN(x,y)图像中对应坐标像素的灰度值为IGaussian(x,y)/IDount(x,y),根据上述4.根据权利要求1所述的一种荧光发射比率超分辨成像方法,其特征在于,所述物镜34[0002]人类对信息的摄取主要是通过眼睛,但是人类眼睛的敏感性与光的波长息息相关。由于只能识别波长为400~760nm范围内的光波,正常视力的人眼只能在明视距离处5器通过延长或缩短环型激发光斑的光程在时间上控制高斯型激光和环形激光之间的脉冲[0023]本发明中的在低激光功率下突破光学衍射极限的荧光发射比率纳米显微成像技6所述格兰激光棱镜3用于分离不同偏振方向的光子计数器12同时接收高速光电二极管探测器11和光电倍增管14采集的参考信号和荧光[0034]经过螺旋相位板6的激光传向第二反射镜9,经过第二反射镜9后传向角反射器10所述角反射器10通过延长或缩短环型激发光斑的光程在时间上控制高斯型激光和环[0043]所述载物台22的样品被激发后产生荧光,荧光被物镜21收集后经四分之一玻片7二反射镜9和第三反射镜8分别用于改变激[0046]具体的,脉冲激光器1的激光出射后经格兰激光棱镜2和第一分束器4分束后形成三条光路,其中一路光被高速光电二极管探测器11收集后作为荧光寿命成像时的参考信[0050]图2为本发明实现荧光发射比率纳米显微成像的原理图。对染料标记后的样品进[0052]图3是本发明实现荧光发射比率纳米显微图像像素灰度值的判定方案。对采集到照射后采集到的荧光衰减曲线。高斯光和环形光之间的脉冲间隔为激光脉冲周期的一半[0054]以3×3均匀分布的9个点物体作为成像对象,图(b)和(c)分别为经过数据处理后8
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