ISO 218462025 通过毛细管气相色谱法 在植物油中测定三酰基甘油的组成和二酰基甘油的含量标准立项发展报告

ISO21846:2025植物油中三酰基甘油组成及二酰基甘油含量测定（毛细管气相色谱法）标准立项发展报告EnglishTitle:StandardizationDevelopmentReport:Determinationofcompositionoftriacylglycerolsandcompositionandcontentofdiacylglycerolsinvegetablefatsandoilsbycapillarygaschromatography(ISO21846:2025)摘要研究背景：植物油作为人类膳食的重要组成部分，其品质、营养价值和功能特性直接关联公众健康与食品安全。三酰基甘油（TAGs）作为植物油的主要成分，其组成决定油脂的物理化学性质；而二酰基甘油（DAGs）作为油脂水解与代谢的关键中间产物，其含量是评估油脂新鲜度、加工工艺及贮藏稳定性的核心指标。因此，建立精准、可靠且标准化的检测方法对于油脂行业质量控制、国际贸易及监管科技具有重要意义。主要内容：本报告聚焦于国际标准化组织（ISO）最新发布的《动植物油脂—通过毛细管气相色谱法测定三酰基甘油的组成及二酰基甘油的组成和含量》（ISO21846:2025）标准的立项与发展过程。报告系统阐述了该标准制定的行业背景与技术需求，详细介绍了标准的核心技术原理与试验方法，包括样品前处理、色谱分析条件、定性定量分析步骤等关键技术要点。同时，对标准的主要技术内容、适用范畴及规范性引用文件进行了梳理与解读。重要结论：ISO21846:2025作为替代ISO23275系列标准的集成与升级版本，采用先进的毛细管气相色谱技术，实现了对植物油中复杂TAGs和DAGs组分的同步、高效、精确定量分析。该标准的发布填补了国际范围内通过单一方法同时测定TAGs和DAGs的技术标准的空白，显著提升了检测效率与数据可比性。标准的实施将有力推动全球油脂产业的质量升级、技术互认与贸易便利化，为保障食用油品质安全提供了坚实的技术基础。关键词：ISO21846；植物油；三酰基甘油；二酰基甘油；毛细管气相色谱法；标准制定；质量控制Keywords:ISO21846;VegetableFatsandOils;Triacylglycerols(TAGs);Diacylglycerols(DAGs);CapillaryGasChromatography(GC);StandardDevelopment;QualityControl正文一、前言与背景植物油是全球范围内最重要的食用油脂来源，广泛应用于烹饪、食品加工、生物燃料及化工原料等多个领域。三酰基甘油（TAGs），亦称甘油三酯，构成了植物油重量的95%以上，其脂肪酸链的组成与位置分布直接决定了油脂的熔点、氧化稳定性、营养价值及感官特性。例如，高油酸含量的TAGs结构赋予油脂优良的氧化稳定性，而sn-2位富含棕榈酸的TAGs结构与母乳脂肪相似，对婴幼儿营养至关重要。与此同时，二酰基甘油（DAGs）作为TAGs不完全水解或生物合成过程中的重要中间产物，广泛存在于天然油脂中，其含量水平是反映油脂新鲜度与精炼程度的重要标志。高DAGs含量通常与油脂的酸败、颜色加深及风味劣化相关联。长期以来，国际油脂分析领域迫切需要一套统一、精确、高效的分析方法来同时明确植物油中的TAGs和DAGs组成与含量。虽然此前ISO已发布了针对特定油脂中可可脂等同物（CBE）检测的ISO23275系列标准（涉及TAGs分析），以及针对单个DAGs种类测定的方法，但缺乏覆盖范围更广、集成度更高、适用于多种植物油的综合性标准。在此背景下，国际标准化组织农产品技术委员会（ISO/TC34）下属的动植物油脂分析分技术委员会（ISO/TC34/SC11）启动了《通过毛细管气相色谱法测定植物油中三酰基甘油的组成和二酰基甘油的含量》（ISO21846）标准的研制工作。该标准旨在整合并优化前人技术，通过毛细管气相色谱这一成熟且高分辨率的分离技术，建立一种能够同时测定TAGs组成（基于碳原子数分布）和DAGs含量（包括1,2(2,3)-DAGs和1,3-DAGs异构体）的标准化方法，从而填补一项关键技术空白。二、标准制定背景与需求分析ISO21846:2025标准的立项与制定，源于油脂行业多个层面的迫切需求：1.技术革新的推动：随着食品工业的精细化发展，对油脂成分的表征不再满足于总脂肪酸分析。分子级水平的TAGs分析能够揭示油脂的精确分子结构，对于鉴定油脂真实性（如橄榄油掺假检测）、评价营养价值（如中链甘油三酯MCT的鉴定）以及优化加工工艺（如油脂分提、酯交换）具有不可替代的作用。同时，DAGs作为影响油脂结晶行为的重要成分，其含量的精确测定对于人造奶油、起酥油等产品的质构设计至关重要。2.贸易便利化与法规合规的需求：全球食用油贸易量巨大，各国对油脂质量等级、掺假鉴别、新资源食品（如合成油脂）的准入政策等均提出了严格的检测要求。统一且国际公认的检测方法标准是消除技术壁垒、促进贸易互认的前提。ISO21846:2025作为国际标准，为各国监管机构、认证机构、进出口商及第三方实验室提供了同一技术语言，避免了方法差异带来的争议。3.行业现有标准的局限性：旧有的分析方法往往针对单一组分或特定油脂种类。例如，当前方法无法高效地完成对椰子油、棕榈油等富含短链脂肪酸油脂中TAGs的分离，或是对如橄榄油、高级初榨橄榄油等通过DAGs含量变化判断其新鲜度与掺假情况。ISO21846:2025通过扩展色谱柱选择与程序升温优化，显著提升了方法的通用性与可靠性。三、标准核心技术解读ISO21846:2025标准基于一种高度自动化且成熟的分析技术——毛细管气相色谱法。其核心原理可概括为：1.样品前处理：植物油样品无需复杂的衍生化步骤，直接溶解于适宜的有机溶剂（如正己烷或异辛烷）中，经过膜过滤后进行色谱分析。这种“稀释后直接进样”的流程极大地简化了操作，减少了人为误差。2.色谱分离：采用耐高温的、中等极性的毛细管气相色谱柱（如涂渍有5%苯基-95%甲基聚硅氧烷固定相）。通过精心优化的程序升温（通常从较低温度如100℃开始，以均匀速率升至350-380℃），依据不同分子量的TAGs及其各异构体（DAGs）的沸点差异，在色谱柱内实现高效分离。三酰基甘油依据其总碳原子数（包括甘油骨架和三个酰基链中的碳原子总数）按顺序出峰，而DAGs则按其不同异构体（1,2-DAG与1,3-DAG）以及分子量分别被分离。3.检测与定量：使用氢火焰离子化检测器（FID）对洗脱出的各组分进行检测。由于FID对同系物具有近乎一致的响应因子，可采用面积归一化法进行定量分析，通过计算各色谱峰的面积占总面积的比例，直接获得不同碳原子数的TAGs的相对百分组成以及DAGs各组分的绝对或相对含量。标准中详细规定了基准物质的选用、定性图谱的解析规则以及定量计算公式。4.结果表达：标准规定了最终报告应包括：*三酰基甘油组成：以各碳原子数（如C48、C50、C52等）的TAGs占总TAGs的百分比的形式报告。*二酰基甘油含量：分别报告总DAGs含量、1,2(2,3)-DAGs含量、1,3-DAGs含量，通常以占样品总重量的百分比（g/100g）表示，或以相对于总TAGs+总DAGs之和的摩尔百分比表示。四、标准的结构与主要技术内容ISO21846:2025标准的结构严谨，内容系统，主要包括以下部分：*范围：明确了标准适用于所有来源于植物的脂肪和油品，特别适用于常规植物油（如大豆油、菜籽油、葵花籽油），以及其他特定油脂（如棕榈油、椰子油、橄榄油）。*规范性引用文件：列出了本标准实施过程中必须参考的其他标准文件，如ISO661《动植物油脂—试样的制备》。*术语与定义：对“三酰基甘油”，“二酰基甘油”，“内标法”，“面积归一化法”等核心概念进行了清晰界定。*原理：如前所述，简要概述主要分析过程与技术依据。*试剂与材料：详细列出了所需溶剂、标准品（如甘油三油酸酯、甘油三棕榈酸酯、不同链长的DAGs标准品）、载气（高纯氦气或氢气）及色谱柱规格。*仪器设备：规定了气相色谱仪的配置要求（进样口、FID检测器、程序升温控制器）。*操作步骤：分为：*试样制备：如溶解、过滤、必要时脱除磷脂或游离脂肪酸的预处理。*参考溶液（标准品）的制备：用于定性及可能的外标法定量。*色谱条件设置：详细给出了推荐的气体流速、分流比、进样口温度、检测器温度及程序升温程序。*测定：进行多次平行测定，记录色谱图。*计算与结果表达：提供计算公式及示例，明确有效数字修约规则。*精密度与重复性：基于国际实验室间协同试验的结果，给出了方法的重复性限（r）和再现性限（R）值，作为评价实验结果可靠性的依据。*测试报告：规定了报告应包含的必要信息。五、主要参与单位及技术贡献ISO21846:2025标准的成功研制，是国际油脂分析领域顶尖专家与众多科研机构、行业组织通力合作的结晶。其中，德国油脂科学协会（DeutscheGesellschaftfürFettwissenschafte.V.,DGF）及其下属的方法学委员会扮演了核心角色。德国油脂科学协会（DGF）简介：成立于1936年的德国油脂科学协会（DGF），是世界上最权威的油脂与脂质科学技术组织之一。DGF总部位于德国法兰克福，其核心职能是推动油脂科学与技术的进步，包括基础研究、应用开发以及最重要的——方法标准化与认证。DGF拥有全欧洲乃至全球最为庞大且严谨的油脂分析方法专家库，其出版的《DGF统一方法》（DGFEinheitsmethoden）被广泛视为与IUPAC（国际纯粹与应用化学联合会）和AOCS（美国油脂化学家学会）方法并列的三大权威油脂分析标准体系之一。DGF在ISO21846标准制定中的核心技术贡献：1.方法提案与草案起草：DGF及其成员（如德国联邦食品与农业部食品安全办公室下属的实验室，以及Unilever德国公司实验室等）在长期从事植物油中TAGs和DAGs分析的基础上，率先提出了利用毛细管气相色谱法进行同步测定的技术路线，并起草了标准的第一版工作草案。DGF专家依据其《DGF统一方法C-VI17a》中对同系物分析的深厚积淀，将原有针对可可脂及其等价物的分析方法进行了扩展与优化。2.国际协调与实验室间验证：作为ISO/TC34/SC11的积极成员，DGF代表牵头组织了针对该标准草案的多轮国际专家评议，并作为主导实验室之一，协调了全球超过20个国家的权威油脂分析实验室，完成了大规模的国际协同试验（RoundRobinTest）。通过协同试验，系统地评估了方法的重复性、再现性、准确性及对不同样品基质（如棕榈油、大豆油、菜籽油、橄榄油、椰子油等）的适用性，最终确定了方法的关键技术参数及精密度数据，为标准的发布提供了最坚实的实证基础。3.解决技术难点：在方法开发过程中，DGF的专家团队解决了多个技术难点。例如，如何优化色谱柱的长短、膜厚度及程序升温速率，以实现对碳原子数范围非常宽（如C30-C56）的TAGs组分及低浓度DAGs异构体的完全基线分离；如何应对高活性、高沸点物质对色谱柱的污染；以及如何建立统一的内标法或校正因子，以克服可能存在的FID响应差异问题。DGF通过发布技术报告和进行方法演示，帮助全球用户克服了这些技术障碍。4.专业培训与推广：DGF通过其常年举办的“油脂分析高级培训课程”及国际学术会议，面向全球实验室技术人员，系统培训该标准的操作细节与数据分析要点，极大促进了标准在全球范围内的快速传播与正确实施。DGF还出版了多篇在《欧洲脂质科学与技术杂志》（*EuropeanJournalofLipidScienceandTechnology*）等权威期刊上的相关研究论文，为标准提供了详细的技术背景和科学依据。结论性评价：可以说，如果没有DGF及其引领的科学家群体的持续投入与国际协作，ISO21846:2025核心方法的提出、验证与标准化将无法在如此高的技术和严谨程度上完成。DGF的标准制定模式，即以深厚的学术研究为支撑、以广泛的工业界需求为导向、以严谨的协同试验为验证手段，为本次标准的成功树立了典范。六、结论与展望ISO21846:2025《动植物油脂—通过毛细管气相色谱法测定三酰基甘油的组成和二酰基甘油的组成和含量》国际标准的正式发布，是国际油脂标准化领域的一项重要里程碑。它成功地将两项重要的分子级分析需求整合于单一、标准化、精密的气相色谱方法之中，实现了技术上的集成与突破。主要价值体现：*提升检测效率：一套方法同步完成两项以前需要分别进行的实验，显著降低了油脂实验室的检测时间与成本。*增强结果可比性：统一了全球范围内TAGs组成与DAGs含量的测定方法，使得不同国家、不同实验室出具的数据更具权威性和可互认性，为消除国际贸易中的技术壁垒提供了有力工具。*保障产品品质：为食品、饲料、化妆品及生物燃料行业提供了更加精细化的质量评价手段。精确的TAGs分析有助于榨油企业优化精炼工艺、研发定制油脂配方；而DAGs的监控则为评估产品新鲜度与货架期预测提供了科学依据。*支持监管与反欺诈：该方法为监管部门检测油脂掺假（如将便宜的棕榈硬脂掺入橄榄油）、鉴定新资源食品（如结构脂质）以及验证营养标签提供了技术支撑。未来发展展望：1.技术融合趋势：未来，毛细管气相色谱法可能会与质谱（MS）检测器更深度结合（GC-MS或GC×GC-MS）。这将不仅提供基于保留时间的分离数据，还能提供每个色谱峰的分子质荷比信息，从而实现对已知和未知TAGs及DAGs的更精确的指纹图谱鉴别和