CN116676234B 耐盐芽孢杆菌jk-25、菌剂及其制备方法和应用 （河南工业大学）

CGMCCNo.267722023.03.09BacillushalotoleransJk-25MediaBiocontrolofWheatCommonCausedbyBipolarissorokiniana”耐盐芽孢杆菌JK-25、菌剂及其制备方法和本发明提供了一种耐盐芽孢杆菌JK_25、菌halotolerans)JK_25保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：效果好。本发明提供的菌剂的制备方法简单方21.耐盐芽孢杆菌(Bacillushalotolerans)JK_25或者菌剂在提高小麦超氧化物歧化酶活性中的应用；所述耐盐芽孢杆菌(Bacillushalotolerans)JK_25保藏于中国微生物菌种保藏管理将耐盐芽孢杆菌(Bacillushalotolerans)JK_25接种于液体培养所述发酵的温度为36_38℃;所述保护剂包括海藻酸钠；3根腐平脐蠕孢菌等引起的根腐病是直接或间接导致小麦减产和品质下降的主要原因之一，[0006]本发明的第一目的在于提供一种耐盐芽孢杆菌(Bacillushalotole该菌株能够高效拮抗麦根腐平脐蠕孢菌(Bipolarissorokiniana)和尖孢镰刀菌[0009]本发明的第四目的在于提供上述耐盐芽孢杆菌(Bacillushalotolerans)JK_25[0010]本发明的第五目的在于提供上述耐盐芽孢杆菌(Bacillushalotolerans)JK_25[0011]本发明的第六目的在于提供上述耐盐芽孢杆菌(Bacillushalotolerans)JK_254述耐盐芽孢杆菌(Bacillushalotolerans)JK_25保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会[0015]将耐盐芽孢杆菌(Bacillushalotolerans)JK_25接种于[0028]本发明提供的耐盐芽孢杆菌(Bacillushalotolerans)JK_25来源于中原地区种植小麦土壤。经发明人研究发现，该菌株能够高效拮抗麦根腐平脐蠕孢菌(Bipolaris[0032]图2为本发明实施例中以菌株JK_25的16SrRNA序列与NCBI数据库对比结果构建5[0033]图3为本发明实施例中菌株JK_25及其发酵液对三种小麦根腐病病原真菌的拮抗[0037]经发明人研究发现，该菌株能够高效拮抗麦根腐平脐蠕孢菌(Bipolaris6[0054]经发明人研究发现，本发明菌株能够高效拮抗麦根腐平脐蠕孢菌(Bipolaris7[0070]16SrDNA序列分析：将JK_25接种于LB液体培养基中37℃培养24h后离心收集菌体，采用细菌基因组DNA提取试剂盒提取菌株JK_25基因组DNA，提取的DNA于_20℃保存备[0073]菌株的拮抗作用：将禾谷镰刀菌(Fusariumgraminearum)、麦根腐平脐蠕孢菌(Bipolarissorokiniana)、尖孢镰孢菌(Fusariumoxysporum)病原菌菌饼(9mm)置于PDA液，采用0.22μm水系滤膜过滤除菌，获得无菌发酵液。分别将禾谷镰刀菌(Fusariumgraminearum)、麦根腐平脐蠕孢菌(Bipolarissorokiniana)、尖孢镰孢菌(Fusariumoxysporum)病原菌菌饼(9mm)置于PDA培养基平板中央，距离菌饼2.5cm处两侧放置无菌牛8[0077](1)将耐盐芽孢杆菌接入发酵培养基中，于37℃,180r/[0078](2)以载体饱和吸附量将种子液添加到无菌载体中，定时搅拌，28℃条件下培养[0081]挑选均匀饱满一致的小麦种SF_2生防菌剂灌根(菌株SF_2为实验室在之前工作中筛选得到并保存的一株耐盐芽孢杆[0087]各实验处理组全部在光照培养箱下25℃,12h/12h光照黑暗交替培养24天后将小9酶活性。使用索莱宝公司的酶活性测定试剂盒测定包括过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶浇灌处理作为