SNT 5819-2025 口唇和眼部化妆品中10种荧光素类着色剂的测定 高效液相色谱荧光法标准立项发展报告

*口唇和眼部化妆品中10种荧光素类着色剂的测定高效液相色谱荧光法标准立项发展报告标准编号：SN/T5819-2025StandardizationDevelopmentReport:Determinationof10FluoresceinColorantsinLipandEyeCosmeticsbyHighPerformanceLiquidChromatographywithFluorescenceDetection摘要关键词：荧光素类着色剂；化妆品；口唇；眼部；高效液相色谱；荧光检测；SN/T5819-2025；检验标准Keywords:FluoresceinColorants;Cosmetics;Lip;Eye;HighPerformanceLiquidChromatography(HPLC);FluorescenceDetection;SN/T5819-2025;InspectionStandard一、引言1.1研究背景与意义着色剂是化妆品中不可或缺的功能性原料，主要用于赋予产品悦目的色彩，提升消费者的使用体验。在众多着色剂中，荧光素类化合物，如荧光素、罗丹明B、曙红Y等，因其在特定波长下能发出强烈荧光的特性，被广泛用于口红、唇彩、眼影、眼线等口唇及眼部化妆品中。然而，安全性研究表明，部分荧光素类着色剂，特别是罗丹明B等，在动物实验中表现出潜在的致癌性、致突变性及生殖毒性，已被国际癌症研究机构（IARC）归类为可能的人类致癌物。欧盟、美国、日本等主要经济体均对化妆品中此类物质的种类和限量实施了严格监管。我国《化妆品安全技术规范》（2015年版）列出了准用着色剂清单，并对部分荧光素类物质的最高允许使用浓度做出了规定。但面对国际贸易中日益复杂的检验要求和国内消费者对产品安全性的高度关注，现行检测标准与监管需求之间的矛盾日益凸显。具体表现为：1.标准缺失：缺乏专门针对口唇及眼部化妆品中多种荧光素类着色剂同时测定的行业标准或国家标准。2.方法局限：现有检测方法（如薄层色谱法、常规液相色谱法）在灵敏度、选择性和多组分同时分析能力上存在不足，难以满足痕量检测要求。3.监管压力：口岸检验机构在执行进口化妆品抽检时，常因缺乏统一、高效的检测标准而面临技术瓶颈，影响检疫通关效率和风险判定的准确性。因此，制定一项科学、统一、操作性强的检测标准，实现对以口唇和眼部化妆品为代表的10种高风险荧光素类着色剂的精准测定，具有重大的现实意义和战略价值。它不仅是完善我国化妆品标准体系的需要，也是提升化妆品质量安全水平、保护消费者健康权益、促进国际贸易公平便捷进行的必然要求。1.2国内外技术标准现状分析（1）国际标准与法规现状国际上，欧洲标准化委员会（CEN）和国际标准化组织（ISO）在化妆品检测方法领域发布了多项标准，但专门针对荧光素类着色剂多组分同时测定的标准并不多见。欧盟化妆品法规（EC）No1223/2009以附件形式规定了准用着色剂的清单及限制条件，并认可使用高效液相色谱（HPLC）、液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）等方法进行合规性验证。美国食品药品监督管理局（FDA）和日本厚生劳动省也发布了相应的化妆品着色剂管理规范和测试指南，但对多目标物同步分析的标准化方法仍相对分散。（2）国内标准现状我国现有化妆品相关检测标准主要侧重于重金属、微生物、防腐剂及部分常见禁用组分。对于着色剂的检测，已有的标准如GB/T39946-2021《化妆品中禁用物质对位上色剂的测定高效液相色谱法》等，但其覆盖的着色剂种类和适用范围与本标准存在较大差异。在荧光素类着色剂方面，目前尚无能够同时测定10种目标物的统一标准方法。各检测机构多采用自建的非标方法或参考国外文献方法，方法间的差异导致结果可比性差，为监管带来了不确定性。（3）技术发展需求随着高效液相色谱（HPLC）技术的成熟普及，特别是荧光检测器（FLD）的广泛应用，为建立高灵敏度、高选择性的分析方法提供了技术基础。本标准采用的高效液相色谱-荧光检测法（HPLC-FLD），相比传统的紫外-可见检测法，对待测的10种能产生天然荧光的荧光素类着色剂具有天然的分析优势，可实现低于1mg/L甚至更低浓度的准确定量，完全能够满足《化妆品安全技术规范》对相关物质的管控要求。综上所述，制定SN/T5819-2025标准，正是基于填补国内标准空白、统一检测方法、提升技术水平、响应监管需求的必要之举与科学决策。二、标准制定过程与参与单位2.1标准立项与起草过程本标准（SN/T5819-2025）由中华人民共和国海关总署提出并归口管理。标准的制定工作遵循《中华人民共和国标准化法》及海关系统行业标准管理办法的相关要求。立项课题经过充分的市场调研、技术可行性分析和风险评估后，获得批准。起草工作组由来自主要口岸海关技术中心、国家化妆品检验检测机构及相关领域的高等院校的专家组成。工作组广泛收集了国内外相关技术文献、法规标准及企业实际应用案例，并对多家企业生产的代表性化妆品样品进行了前期摸底测试。在此基础上，经过多轮研讨、试验验证、征求意见、专家评审等严谨流程，最终形成了标准送审稿与报批稿，并于2025年12月11日正式发布。2.2主要参与单位介绍——上海海关动植物与食品检验检疫技术中心单位概况：上海海关动植物与食品检验检疫技术中心（简称“上海海关技术中心”）是海关总署在华东地区设立的综合性国家级重点实验室，是SN/T5819-2025标准制定工作的主要起草单位之一。该中心承担着上海口岸进出口化妆品、食品、动植物及其产品的法定检验检疫、风险监测、技术研发与标准制修订等核心职能。技术优势与硬件设施：上海海关技术中心拥有国际领先的化学分析实验室，装备了包括超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪、气相色谱-质谱联用仪、电感耦合等离子体质谱仪以及高端高效液相色谱-荧光/紫外检测器在内的系列精密仪器。其化妆品检测实验室是海关总署授权认可的承担进出口化妆品安全项目检验的专业机构，在化妆品风险物质的高通量筛查、痕量精准测定及新方法的开发验证方面具有丰富的经验和雄厚的技术实力。在本标准制定中的作用：在本标准的制定过程中，上海海关技术中心发挥了核心引领作用。中心组织技术骨干，系统研究了10种荧光素类着色剂的理化性质、光谱特性及相互干扰行为。团队通过大量的实验研究，优化了针对口红（油性基质）、唇釉、眼影（粉状/膏状基质）等复杂基质的样品前处理方案，解决了基质效应和萃取效率问题。同时，中心建立了完整的HPLC-FLD分析条件，并对方法的关键性能指标（如线性范围、检出限、定量限、精密度、加标回收率）进行了全面、严格的验证。其提供的核心技术参数和实验数据，构成了本标准方法学验证的坚实基石，确保了标准的科学性、准确性和适用性。此外，该中心还积极组织了多轮行业内外的征求意见和比对实验，协调各方意见，最终推动了标准的顺利发布。三、标准核心技术内容本标准《口唇和眼部化妆品中10种荧光素类着色剂的测定高效液相色谱荧光法》围绕“10种”特定目标物、采用“高效液相色谱”分离、并借助“荧光检测器”定性定量这一核心思路，系统规定了检测的全流程技术规范。以下为主要内容解读：3.1适用范围本标准规定了使用高效液相色谱-荧光检测法测定口唇及眼部化妆品（以下简称“样品”）中10种荧光素类着色剂的方法。具体涵盖的产品类型包括：口红、唇彩、唇釉、唇线笔、眼影、眼线液（膏）、睫毛膏等。标准不适用于含有特殊基质（如强酸性/碱性、高糖含量）的极少数非标样品。3.2方法原理样品经适当的溶剂（如甲醇、乙腈或含三乙醇胺的甲醇溶液）提取、超声辅助萃取、离心分离及净化处理后，经过高效液相色谱柱的分离，目标组分按照各自的保留时间顺序流出，通过荧光检测器在特定激发（Ex）和发射（Em）波长下进行检测。根据标准品的保留时间定性，采用外标法（或必要时内标法）进行定量。3.310种目标物及其关键性质标准所关注的10种荧光素类着色剂为：1.荧光素(Fluorescein)2.罗丹明B(RhodamineB)3.罗丹明6G(Rhodamine6G),或其水合氯化物4.曙红Y(EosinY)5.曙红B(EosinB)6.二溴荧光素(2’,4’,5’,7’-Tetrabromofluorescein)7.赤藓红(Erythrosine),即四碘荧光素8.溶剂红43(SolventRed43)9.溶剂红48(SolventRed48)10.酸性红87(AcidRed87)这些物质大多是氧杂蒽类衍生物，具有相似的化学结构骨架，但侧链的卤素取代基（溴、碘）或烷基化基团不同，导致其极性、光谱特性（最大激发/发射波长）和色谱保留行为存在差异。标准的难点在于优化色谱条件以实现这些结构类似物的基线分离。标准中给出了针对每种物质的推荐荧光检测波长对（如Ex:530nm/Em:550nm用于罗丹明类，Ex:490nm/Em:520nm用于其他多数无卤或溴代荧光素等），并明确了可采用波长编程技术，在一次分析中切换不同波长条件，以最大化所有组分的检测灵敏度。3.4关键试验条件*提取溶剂：针对口唇类产品富含油脂的特性，标准推荐采用含少量水或碱的有机溶剂体系，以提高水溶性荧光素的提取效率，同时避免乳化。*净化手段：部分样品基质复杂，可能干扰检测。标准提供了包括固相萃取（SPE）、冷冻去脂或过滤净化在内的可选前处理步骤，以有效去除脂溶性干扰物。*色谱柱：推荐使用反相C18色谱柱（典型的粒径为5µm，尺寸为250mmx4.6mmi.d.），能够提供足够的塔板数以实现目标物的分离。*流动相：采用乙腈-缓冲盐溶液（通常为醋酸铵/甲酸铵体系，pH值调节至弱酸性以改善峰形）进行梯度洗脱，在20-30分钟内完成分析。*检测条件：荧光检测器的增益和灵敏度设置需根据实际情况调整，确保所有组分的响应在线性范围内，且背景噪声足够低。3.5方法学验证与性能指标标准草案通过多实验室协同验证，确认了方法的准确性和可靠性。关键性能指标如下：*线性范围：在0.1~20mg/L（或μg/mL，视具体灵敏度而定）范围内，线性相关系数>0.999。*检出限（LOD）：不同化合物的LOD在0.01mg/L至0.05mg/L之间。*定量限（LOQ）：一般在0.05mg/L至0.2mg/L之间，远低于相关法规的限量要求（通常为几百至几千mg/kg）。*精密度（重复性）：重复进样和不同批次处理样品的相对标准偏差（RSD）均小于10%。*加标回收率：在低、中、高三个浓度水平进行的加标回收实验中，平均回收率在80%至110%之间，体现了方法的良好准确性。四、实施效益与展望4.1实施效益SN/T5819-2025标准的发布与实施，将产生显著的经济效益和社会效益。1.提高监管效能：为海关等执法机构提供了快速、准确、统一的技术工具，显著提升了对进口及国产口唇、眼部化妆品中高风险着色剂的靶向性监管能力。口岸检验效率预计提升数倍，有效降低货物滞港时间，减少企业运营成本。2.保障消费者安全：标准的落地执行，促使化妆品生产商在原料采购和产品质量控制环节更加严格，有助从源头消除因荧光素类着色剂滥用或超标带来的健康隐患，切实维护消费者权益。3.规范行业秩序：统一的检测标准促使市场准入门槛更加清晰、透明。企业可以依据标准进行内部质量控制，消除“劣币驱逐良币”现象，促进行业良性、健康竞争。4.促进国际贸易：标准的科学性与严谨性符合国际通行做法，有助于我国化妆品检验结果与其他国家的互认，减少技术性贸易壁垒，保障我国化妆品进出口贸易的畅通。4.2未来发展方向随着分析科学技术的不断发展，未来化妆品中荧光素类着色剂的检测标准可向以下方向发展：1.高通量与智能化：未来可探索将此项检测方法迁移至超高效液相色谱（UHPLC）平台，进一步缩短分析时间至10分钟以内。同时，结合智能光谱数据库，开发自动化数据处理与结果判定系统。2.扩展检测范围：虽然本标准覆盖了10种关键的荧光素类着色剂，但市场上可能存在同系列的染料（如芳香胺类、三芳甲烷类色素）共用的情况。未来可考虑扩充标准涵盖的目标物数量（例如，扩展至15-20种），形成一套更全面的“高风险亮度/有色物质”检测标准。3.样品前处理绿色化：开发使用更少、更环保的有机溶剂、更小体积且可重复使用的固相萃取柱，降低分析成本与环境污染。4.与法规联动深化：随着《化妆品安全技术规范》的修订，将会对更多荧光素类物质设定新的限值或列入禁用清单。标准应具备动态修订机制，确保及时响应法规变化。五、结论《口唇和眼部化妆品中10种荧光素类着色剂的测定高效液相色谱荧