SNT 5880-2025 进出口婴幼儿配方食品中多种母乳低聚糖的测定 超高效液相色谱法标准立项发展报告

进出口婴幼儿配方食品中多种母乳低聚糖的测定超高效液相色谱法标准立项发展报告EnglishTitleStandardizationDevelopmentReport:DeterminationofMultipleHumanMilkOligosaccharidesinImportandExportInfantFormulaFood-Ultra-HighPerformanceLiquidChromatographyMethod摘要关键词:婴幼儿配方食品；母乳低聚糖；超高效液相色谱法；检测标准；SN/T5880-2025；食品安全KeywordsInfantFormulaFood;HumanMilkOligosaccharides(HMOs);Ultra-HighPerformanceLiquidChromatography(UPLC);DetectionStandard;SN/T5880-2025;FoodSafety正文1.引言婴幼儿配方食品是除母乳外，满足婴幼儿生长发育所需营养的主要来源。近年来，随着生命早期营养学研究的突破性进展，科学家发现母乳低聚糖（HMOs）是母乳中仅次于乳糖和脂肪的第三大固体组分，其含量约为5-15g/L。这些结构复杂的碳水化合物并非直接提供能量，而是通过塑造健康的肠道微生物菌群、作为可溶性诱饵受体阻断病原体附着，以及直接调节免疫细胞功能来发挥重要的生物学效应。基于HMOs显著的生理功效，食品工业界已成功开发出生物合成技术，如2'-岩藻糖基乳糖（2'-FL）、3-岩藻糖基乳糖（3-FL）、3'-唾液酸乳糖（3'-SL）和6'-唾液酸乳糖（6'-SL）等主流HMOs单体已被多个国家和地区批准作为新型食品配料或营养强化剂添加至婴幼儿配方食品中。例如，中国国家卫生健康委员会已陆续批准多款HMOs为新食品原料。然而，随着产品进口与出口贸易量的激增，建立一套高效、准确、且适用于市场监管的多种HMOs同步测定方法，成为检验检疫工作的迫切需求。本标准《SN/T5880-2025》的立项，旨在填补我国进出口商品检验领域关于HMOs检测的技术空白，为海关及第三方检测机构提供权威、统一的检测规范，确保跨境供应链中产品质量的一致性与安全性。2.标准研制背景与意义2.1行业发展的技术需求据统计，全球HMOs市场规模正以年均复合增长率超过20%的速度扩张。大量进口婴幼儿配方食品及国产高端产品纷纷添加HMOs。然而，HMOs种类繁多（已知结构超过200种），且基质复杂（富含蛋白质、脂肪、乳糖等），传统的单糖检测方法（如DNS比色法、液相色谱糖柱法）无法实现多种HMOs的定性定量，且灵敏度低、干扰大。而基于质谱的方法虽灵敏度高，但仪器昂贵、操作复杂，不适合日常快速通关检测。因此，开发一种兼顾灵敏度与普及性的方法势在必行。2.2政策法规的支撑该标准的研制严格遵循《中华人民共和国食品安全法》及其实施条例，符合《中华人民共和国进出口商品检验法》的相关规定。同时，参考了国家卫生健康委员会关于HMOs作为新食品原料的公告要求以及国际食品法典委员会（CodexAlimentarius）关于婴幼儿配方食品的标准框架。标准的立项得到了国家标准化管理委员会及海关总署的批准，体现了国家在食品安全监管领域向精细化管理迈进的战略方向。3.标准主要内容解析3.1适用范围本标准明确规定了采用超高效液相色谱法（UPLC）测定进出口婴幼儿配方食品中多种母乳低聚糖的方法。适用于粉状、液态及浓缩型婴幼儿配方食品的检测。3.2方法原理样品经水溶解或稀释后，利用蛋白质沉降剂去除样品中的蛋白质和脂肪等大分子干扰物。上清液经高速离心及微孔滤膜过滤后，采用配备亲水相互作用色谱（HILIC）柱或氨基色谱柱的超高效液相色谱系统进行分离，并通过蒸发光散射检测器（ELSD）进行检测。依据各组分的保留时间进行定性，采用外标法以峰面积进行定量。3.3试剂与材料本标准详细列出了标准品（如2'-FL、3-FL、3'-SL、6'-SL等，纯度≥95%）的保存和使用要求。强调了使用的超纯水、乙腈、甲醇等均为色谱纯级别，并推荐了具有良好糖类分离效果的色谱柱。3.4样品前处理针对婴幼儿配方食品的高基质复杂性，标准优化了前处理流程：1.提取：准确称取或量取试样，加入适量温水溶解或稀释。2.蛋白沉淀：采用蛋白沉淀剂（如乙腈、特定溶剂）进行等电点沉淀或有机溶剂沉淀，有效去除蛋白干扰。经过大量实验验证，该步骤能去除超过95%的蛋白及脂肪残留，保证色谱系统稳定性。3.净化：沉淀后上清液经过离心（≥10000rpm）及0.22μm亲水性滤膜过滤，直接进样分析，避免了使用复杂的固相萃取步骤，提高了检测效率。3.5色谱条件*色谱柱：推荐使用亲水作用色谱柱（如WatersACQUITYUPLCBEHAmide,2.1x100mm,1.7μm）。*流动相：A相为乙腈，B相为水（含0.1%氨水或甲酸铵），采用梯度洗脱程序。*检测器参数：蒸发光散射检测器（ELSD）漂移管温度设定为50-60℃，氮气载气压力稳定。*分析时间：一个完整分析周期通常控制在15-20分钟内完成主要HMOs的有效分离。3.6方法性能指标根据标准制定的验证数据，该方法的检出限（LOD）可达5mg/100g，定量限（LOQ）为10mg/100g，线性相关系数（R²）大于0.999，加标回收率在90%-108%之间，精密度（RSD）小于5%。这些指标满足《实验室质量控制规范食品理化检测》（GB/T27404）的要求，确保了检测结果的权威性和可比性。4.主要参与单位介绍4.1核心起草单位本标准的起草工作由中华人民共和国海关总署进出口食品安全局牵头，中国检验检疫科学研究院作为主要技术归口和起草单位之一，承担了核心的实验验证和技术审定工作。4.2中国检验检疫科学研究院（CAIQ）简介中国检验检疫科学研究院（CAIQ）是国家市场监管总局直属的事业单位，是我国检验检疫领域唯一的国家级综合研究机构。该院在食品安全、动植物检疫、化学品检测、工业品与消费品安全等领域拥有雄厚的科研实力和丰富的标准制定经验。在标准研制过程中，CAIQ的科研团队负责了：1.技术路线的确立：团队通过系统比较液相色谱-质谱联用法（LC-MS/MS）与超高效液相色谱法（UPLC）的优缺点，结合海关实验室“快速、准确、成本可控”的实际需求，最终确定了UPLC-ELSD作为核心方法，规避了质谱法高维护成本和技术门槛的限制，使得该标准更容易在基层海关实验室及第三方检测机构推广。2.实验验证：组织开展多实验室间协同实验，选取了来自不同国家、不同生产工艺（湿法、干法、干湿复合）的市售婴幼儿配方食品样品（如雅培、惠氏、飞鹤、伊利等品牌产品），验证了方法在不同基质下的适用性和稳定性。同时，针对HMOs在货架期内的稳定性进行了跟踪测试，确保了检测结果的长期有效性。3.国际比对：积极与国际标准化组织（ISO）及美国分析化学家协会（AOAC）保持技术沟通，参考了AOAC2018.02等国际同类标准的最新进展，确保本标准的各项技术指标达到国际先进水平。例如，在标准品纯度验证、平行样测定偏差计算等细节上，均接轨国际通行准则。4.标准文本撰写：严格按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》进行编写，保证了文本结构的科学性和严谨性。同时，在附录中提供了典型的色谱图、线性范围及不确定度评定示例，极大提升了标准的可操作性和参考价值。5.结论与展望5.1结论《SN/T5880-2025进出口婴幼儿配方食品中多种母乳低聚糖的测定超高效液相色谱法》的发布与实施，标志着我国在新型功能性食品配料的检测标准体系建设中迈出了坚实的一步。*技术先进性：采用超高效液相色谱法，实现了高分离度、高灵敏度，能够在短时间内完成多种主要HMOs的同步检测。*经济适用性：蒸发光散射检测器作为通用型检测器，相比质谱仪成本更低，运行维护简便，使得该标准具有极高的普及性，非常适合在检验检疫一线的快速通关检测中应用。*监管统一性：首次为进出口环节提供了统一的方法标准，有效解决了因检测方法不一致导致的贸易争端，维护了公平的贸易秩序，保障了消费者对“口粮”安全的基本需求。5.2展望尽管本标准已成功制定并获批，但随着科学技术的飞速发展和市场的不断变化，未来仍有以下方向值得关注和持续研究：1.扩展HMOs检测谱系：目前标准主要覆盖了2'-FL、3-FL、3'-SL、6'-SL等商业化的主要品种。未来，随着2'-岩藻糖基乳糖/二岩藻糖基乳糖（LNnT）、乳糖-N-四糖（LNT）等更多种类的HMOs获批，标准须及时修订或增加附录，扩大检测范围。2.融合新型前处理技术：探索在线固相萃取（Online-SPE）、分子印迹等技术，进一步提升自动化水平，减少前处理步骤的人为误差和有机溶剂消耗，实现绿色检测。3.建立溯源与数据平台：建议结合标准实施，建立进出口婴幼儿配方食品中HMOs含量的数据库。通过大数据分析，可以揭示不同品牌、不同产地产品中HMOs添加