土壤 三氯杀螨醇的测定 气相色谱质谱法

1土壤三氯杀螨醇的测定气相色谱质谱法本文件规定了气相色谱质谱法测定土壤中三氯杀螨醇的方法原理、试剂和材料、仪器和设备、样品、分析步骤、结果计算与表示、精密度和正确度、质量保证和质量控制、废物处理等技术内容。本文件适用于土壤中三氯杀螨醇的测定。方法检出限和测定下限详见附录A。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。HJ/T166土壤环境监测技术规范HJ613土壤干物质和水分的测定重量法HJ783土壤和沉积物有机物的提取加压流体萃取法3术语和定义3.1内标internalstandards在定量分析中，待分析样品中原本不存在的，化学性质与待测组分相近，但在分析过程中能够实现完全分离的已知纯物质。其测得值是计算被测组分含量的参比依据。3.2空白样品加标blanksamplespike向不含目标分析物（或目标物含量低于方法检出限）的清洁基质（如洁净石英砂）中加入已知量的目标分析物。3.3样品加标samplespike在待测样品中加入已知量的目标分析物。4方法原理土壤中的三氯杀螨醇经加压流体萃取方式提取、净化、浓缩、定容后，用气相色谱分离、质谱检测。根据目标化合物的保留时间、碎片离子质荷比及不同离子丰度定性，内标法定量。25试剂和材料5.1除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为新制备的不含目标物的纯5.2丙酮（C3H6O)：色谱级。5.3正己烷（C6H14)：色谱级。5.4正己烷-丙酮混合溶剂：按9+1体积比混合。5.5三氯杀螨醇标准贮备溶液：ρ=1000mg/L，有证标准溶液。5.6三氯杀螨醇标准中间溶液：ρ=10mg/L。用正己烷溶剂（5.3）对标准贮备液（5.5）稀释配置，并混匀。5.7内标贮备液：ρ=1000mg/L。内标物为菲-D10。有证标准溶液。5.8内标中间液：ρ=10mg/L。用正己烷（5.3）对内标贮备液（5.7）稀释配置，并混匀。5.9十氟三苯基膦（DFTPP）溶液：ρ=50mg/L，有证标准溶液。5.10无水硫酸钠（Na2SO4使用前于马弗炉中400℃下灼烧4h，冷却至室温后，放入磨口玻璃瓶中，置于干燥器中保存。5.11石英砂：150µm～830µm（100目～20目）。使用前于马弗炉中400℃灼烧4h，冷却至室温后，放入磨口玻璃瓶中密封保存。5.12固相萃取柱：填料为硅酸镁，1000mg，柱体积为6mL～10mL。5.13氦气：纯度≥99.999%。5.14氮气：纯度≥99.99%。6仪器和设备6.1气相色谱-质谱仪：具有分流/不分流进样口、程序升温功能，采用电子轰击（EI）源。6.2色谱柱：石英毛细管柱，长30m，内径0.25mm，膜厚0.25μm，固定相为5%苯基甲基聚硅氧烷或其他性能相近的色谱柱。6.3提取装置：加压流体萃取仪或其他性能相当的设备。6.4浓缩装置：定量浓缩仪或其他性能相当的设备。6.5真空冷冻干燥仪：空载真空度≤13Pa。6.6固相萃取装置：手动或自动，流速可调节。6.7天平：精度为0.01g。6.8一般实验室常用仪器和设备。7样品7.1样品的采集和保存参照HJ/T166的相关规定进行土壤样品的采集和保存。用预先洗涤干净的具塞磨口棕色玻璃瓶保存土壤样品。运输过程中应密封、避光、4℃以下冷藏。若不能及时分析，应于4℃以下冷藏、避光、密封保存，保存时间不超过10d。7.2水分的测定土壤样品干物质和水分的测定按照HJ613执行。37.3样品制备将样品放在搪瓷盘或不锈钢盘上，混匀，除去枝棒、叶片、石子等异物，按照HJ/T166进行四分法粗分。新鲜土壤可冷冻干燥或干燥剂脱水干燥。具体操作如下：——方法一：冻干法。取适量混匀后样品，放入真空冷冻干燥仪（6.5）中干燥脱水。干燥后的样品需研磨、过250µm（60目）孔径的筛子，均化处理成250µm（60目）左右的颗粒。然后称取10g（精确到0.01g）样品进行提取。——方法二：干燥剂法。称取10g（精确到0.01g）的新鲜样品，加入一定量的干燥剂（如硅藻土）混匀、脱水并研磨成细小颗粒，充分拌匀直到散粒状，全部转移至提取容器中待用。7.4提取采用加压流体萃取仪提取，萃取剂采用正己烷-丙酮混合溶剂（5.4），其余步骤按照HJ783执行，或采用其他性能相当设备提取目标物。如果提取液存在明显水分，需使用无水硫酸钠脱水，再用少量正冲洗漏斗，全部收集至浓缩器皿中，待浓缩。7.5浓缩使用浓缩仪将提取液浓缩到1.5mL～2.0mL后，用5mL~10mL正已烷置换，再将提取液浓缩到1.0mL，待净化。7.6净化用约8mL正已烷洗涤硅酸镁固相萃取柱。用吸管将浓缩后的提取液转移到硅酸镁固相萃取柱上停留1min后，弃去流出液。加入2mL正己烷-丙酮混合溶剂（5.4）并停留1min，用10mL小型浓缩管接收洗脱液。将净化后的洗脱液按7.5的步骤浓缩并溶剂转换，加入适量内标液，定容至1.0mL，待分析。7.7空白试液的制备按照7.4～7.6步骤制备空白试液。8分析步骤8.1仪器参考条件柱流量：1.0mL/min（恒定流量）；电子轰击源：EI源，离子化能量70eV，离子源温度230℃；四极杆温度：150℃；传输线温度：300℃；扫描模式：选择离子扫描（SIM）。8.2校准8.2.1仪器性能检查分析前用全氟三丁胺对质谱仪进行调谐。注入1.0µL十氟三苯基磷（DFTPP）溶液（5.9），对仪器整个系统进行检查，所得质量离子的丰度应满足表1的要求。4表1DFTPP关键离子及离子丰度评价存在且小于443峰8.2.2校准曲线的绘制准确移取一定体积的三氯杀螨醇标准中间液(5.6)和内标物中间液（5.8）至1.0mL正己烷溶剂（5.3）样品于进样瓶中，配制成三氯杀螨醇浓度依次为0.1mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L，每个进样瓶的内标浓度均为0.1mg/L，立即旋紧瓶盖，混匀。按照仪器参考条件，由低浓度到高浓度依次进行测定，分别记录三氯杀螨醇和内标物的保留时间及响应值。以目标化合物浓度与内标化合物浓度的比值为横坐标，以目标化合物定量离子的响应值与内标化合物定量离子响应值的比值为纵坐标，绘制校准曲线。8.2.3标准样品的气相色谱/质谱图图1目标物总离子流色谱图8.3试样的测定按照与校准曲线的绘制（8.2.2）相同的仪器分析条件测定待测的试样。8.4空白试验按照与试样相同的测定条件（8.3）进行空白试样的测定。9结果计算与表示59.1定性分析通过样品中目标物与标准系列中目标物的保留时间、质谱图、碎片离子质荷比及其丰度等信息比较，对目标物进行定性。应多次分析标准溶液得到目标物的保留时间均值，以平均保留时间±3倍的标准偏差为保留时间窗口，样品中目标物的保留时间应在其范围内。目标物标准质谱图中相对丰度高于30%的所有离子应在样品质谱图中存在，样品质谱图和标准质谱图中上述特征离子的相对丰度偏差要在±30%之内。一些特殊的离子如分子离子峰，即使其相对丰度低于30%，也应该作为判别化合物的依据。如果实际样品存在明显的背景干扰，应扣除背景影响。9.2定量分析在对目标物定性判断的基础上，根据定量离子的峰面积，采用内标法进行定量。当样品中目标化合物的定量离子有干扰时，可使用辅助离子定量。定量离子、辅助离子参见附录B。9.3结果计算 9.3.1平均相对响应因子（RRF）的计算校准系列第i点中目标化合物的相对响应因子（RRFi），按照公式（1）计算。RRFi式中：RRFi——校准曲线系列中第i点目标化合物的相对响应因子；Ai——校准曲线系列中第i点目标化合物定量离子的响应值；AISi——校准曲线系列中第i点与目标化合物相对应内标定量离子的响应值；ISi——校准曲线系列中内标物的质量浓度，µg/mL；i——校准曲线系列中第i点目标化合物的质量浓度，µg/mL。 校准曲线系列中目标化合物的平均相对响应因子RRF，按照公式（2）计算。式中：RRF——校准曲线系列中目标化合物的平均相对响应因子；RRFi——校准曲线系列中第i点目标化合物的相对响应因子；n——校准曲线系列点数。9.3.2土壤样品的结果计算土壤样品中的目标化合物含量⑴（mg/kg），按照公式（3）进行计算。6式中：——样品中的目标物含量，mg/kg；Ax——试样中目标化合物定量离子的峰面积；AIS——试样中内标化合物定量离子的峰面积；IS——试样中内标的浓度，µg/mL；RRF——校准曲线系列中目标化合物的平均相对响应因子；Vx——试样的定容体积，mL；m——样品的称取量，g；Wdm——样品干物质含量，%。9.4结果表示当测定结果小于0.01mg/kg时，结果保留小数点后三位，当测定结果大于等于0.01mg/kg时，结果保留两位有效数字。10精密度和正确度10.1精密度6家实验室分别对加标浓度为0.01mg/kg、0.05mg/kg和0.10mg/kg的统一样品进行了测定，实验室内相对标准偏差分别为0%～18.8%，1.1%～9.7%，1.9%～9.7%；实验室间相对标准偏差分别为：5.2%~12.6%，5.8%～7.6%，10.3%～11.4%；重复性限分别为：0.002mg/kg～0.002mg/kg，0.004mg/kg~0.006mg/kg，0.008mg/kg～0.012mg/kg；再现性限分别为：0.003mg/kg～0.004mg/kg，0.007mg/kg~0.015mg/kg，0.019mg/kg～0.060mg/kg。10.2正确度6家实验室分别对含三氯杀螨醇浓度为0.01mg/kg、0.05mg/kg和0.10mg/kg的空白石英砂、砂质土壤和黏质土壤加标样进行了6次重复测定：加标回收率范围分别为60.0%～90.0%，76.0%～100%，77.0%~111%。精密度和正确度数据详见附录C。11质量保证和质量控制11.1空白实验每批样品（少于20个样品/批）至少分析一个实验室空白，其目标物的测定值应低于方法检出限。11.2校准曲线校准曲线的相关系数≥0.995，或者校准曲线中目标化合物相对响应因子的相对标准偏差应≤20%。连续分析时，每批样品（少于20个样品/批）应分析1个曲线中间浓度点标准溶液，其测定结果与初始曲线在该点浓度的相对误差≤±20%，否则应重新绘制校准曲线。11.3精密度每批样品（少于20个样品/批）至少分析1个平行样，单次平行样品测定结果的相对偏差应在20%以711.4正确度每批样品（少于20个样品/批）至少测定一个空白加标样，加标回收率应控制在70%～120%之间；每批样品（少于20个样品/批）至少测定一个基体加标样，加标回收率应控制在60%～120%之间。12废物处理实验过程中产生的废液和废物应分类收集和保管，委托有资质的单位进行处理。8