NYT 4719-2025 生姜茎基腐病抗性鉴定技术规程标准立项发展报告

生姜茎基腐病抗性鉴定技术规程标准立项发展报告StandardizationDevelopmentReport:TechnicalCodeofPracticeforResistanceIdentificationofGingerBasalStemRot摘要关键词：生姜；茎基腐病；抗性鉴定；行业标准；NY/T4719-2025；技术规程Keywords:Ginger;BasalStemRot;ResistanceIdentification;AgriculturalIndustryStandard;NY/T4719-2025;TechnicalCodeofPractice一、引言1.1生姜产业背景与病害概况生姜（*Zingiberofficinale*Rosc.）原产于亚洲热带地区，是我国传统的药食两用经济作物，在调味品、中药材、食品加工及日化产品等领域具有广泛应用。我国是全球最大的生姜生产国和出口国，生姜种植遍布山东、河南、湖南、湖北、四川、贵州、广西、广东等20余个省（自治区），其中山东省潍坊市安丘、昌邑等地形成了高度集约化的连片种植区。据国家特色蔬菜产业技术体系统计，近年来我国生姜年种植面积稳定在400万亩以上，年产值超过千亿元，生姜产业已成为多地农民增收致富的支柱型特色产业。然而，随着种植面积持续扩张、连作年限不断延长以及集约化程度的日益提高，生姜土传病害的发生日趋严重。其中，茎基腐病是危害最为严重的病害之一。该病在生姜整个生育期均可发生，主要侵染植株茎基部，初期表现为茎基部出现水渍状褐色病斑，随后逐渐扩展、凹陷、缢缩，导致输导组织坏死，地上部叶片黄化、萎蔫，严重时全株枯死。田间病株率一般可达10%~30%，重病田块甚至超过70%，造成大幅减产甚至绝收，给姜农带来严重的经济损失。1.2生姜茎基腐病病原与发病规律生姜茎基腐病的病原组成较为复杂，不同产区、不同年份优势致病菌可能存在差异。综合国内外研究报道，该病的病原主要包括以下几种：腐皮镰孢菌（*Fusariumsolani*）是生姜茎基腐病最主要的病原菌之一。该菌在土壤中腐生能力极强，可在病残体和土壤中长期存活，是一种典型的土传兼性寄生病原菌。腐皮镰孢菌寄主范围广，除生姜外还可侵染多种作物。在生姜上，该菌主要通过根部伤口或自然孔口侵入，沿维管束向上扩展，导致茎基部组织坏死腐烂。病原菌在4~35℃范围内均可生长，最适生长温度为25~30℃，高温高湿条件下病情发展尤为迅速。尖孢镰孢菌（*Fusariumoxysporum*）也是引起生姜茎基腐病和根腐病的重要病原。该菌寄主专化性较强，具有明显的生理分化现象。尖孢镰孢菌在土壤中可以厚垣孢子形态长期存活，即使在没有寄主的情况下也可存活多年，一旦遇到适宜寄主和环境条件即可萌发侵染。该菌主要通过维管束系统侵染扩散，引起典型的萎蔫症状。此外，群结腐霉（*Pythiummyriotylum*）和禾谷腐霉（*Pythiumgraminicola*）等多种腐霉菌以及部分疫霉菌（*Phytophthora*spp.）也被认为与生姜茎基腐病的发生有关。在高温高湿或者土壤积水条件下，腐霉菌和疫霉菌的致病作用尤为突出，常与镰孢菌复合侵染，进一步加重病情。生姜茎基腐病的发生流行与品种抗性、气候条件、土壤环境、栽培管理等因素密切相关。高温高湿（日平均气温25℃以上，相对湿度85%以上）有利于病害发生；连作地块病原菌逐年积累，发病逐年加重；土壤黏重、排水不良、施肥不当（尤其是氮肥过量）等均会加剧病情。生产实践表明，选用抗病品种是防治该病最为经济有效的措施。1.3抗性鉴定的必要性与标准化需求种质资源抗性评价是抗病育种工作的基础环节。系统、准确地评价生姜种质资源对茎基腐病的抗性水平，筛选出高抗材料，对于抗病品种选育、抗性基因挖掘以及抗病品种的合理布局具有重要意义。然而，生姜茎基腐病抗性鉴定涉及病原菌的分离纯化与致病力测定、接种体的制备与定量、接种方法的选择（伤根接种、基质接种、菌土法接种等）、环境条件的控制、病情调查的时间与标准以及抗性等级的评价指标等多个技术环节。任何环节操作不一致，都可能导致鉴定结果偏差，使得不同实验室、不同批次间的鉴定结果难以直接比对，严重影响抗性评价的科学性和可靠性。2001年，全国农业技术推广服务中心颁布了中华人民共和国农业行业标准《生姜抗姜瘟病鉴定技术规程》，对生姜种质资源抗姜瘟病的鉴定方法和评价标准进行了规范。然而，对于茎基腐病的抗性鉴定，我国尚缺乏统一的技术标准。各育种和科研单位在具体操作中多参考其他作物类似病害的鉴定方法，或凭各自经验进行，尚未形成统一规范。这种标准化缺失的状况直接导致了以下问题：一是不同来源的抗性鉴定结果缺乏可比性，同一个品种（材料）在不同机构鉴定出的抗性等级不一致；二是鉴定条件不统一导致鉴定结果重复性差，难以真实反映材料的抗性水平；三是无法建立统一的抗性评价数据库，限制了抗性资源的共享利用。因此，亟需制定生姜茎基腐病抗性鉴定的行业标准，统一技术要求和评价标准。1.4标准编制背景2023年，按照农业农村部农业行业标准制定和修订项目计划，全国农业技术推广服务中心组织相关科研单位启动了《生姜茎基腐病抗性鉴定技术规程》的编制工作。编制组在系统收集整理国内外相关研究文献和现有行业标准的基础上，结合各参与单位多年来在生姜茎基腐病抗性鉴定方面的研究成果和实践经验，经过广泛调研、试验验证和多次专家论证，形成了标准送审稿。2025年1月，该标准通过全国植物检疫标准化技术委员会农业植物检疫分技术委员会（TC271/SC3）审定。2025年4月27日，中华人民共和国农业农村部正式发布该标准，编号为NY/T4719-2025，自2025年8月1日起实施。1.5标准适用范围本标准规定了生姜茎基腐病抗性鉴定的术语和定义、病原菌准备、接种体制备、鉴定条件与试验设计、接种方法、病情调查与抗性评价、抗性评价记载表以及鉴定报告撰写等技术要求。本标准适用于生姜种质资源、育种中间材料及品种对茎基腐病抗性的室内人工接种鉴定和田间自然病圃鉴定，为生姜抗茎基腐病育种、品种审定和抗性资源评价提供统一的技术依据。二、标准编制依据与原则2.1编制依据本标准的编制严格遵循GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定，确保标准的结构框架、编写格式和表述规范符合国家标准要求。在技术内容确定方面，主要依据以下文件和研究成果：-《中华人民共和国种子法》及《主要农作物品种审定办法》中关于品种抗性鉴定的相关要求；-NY/T3372-2018《农作物品种抗病性鉴定技术规程第1部分：总则》中的通用方法和原则；-全国农业技术推广服务中心历年发布的相关技术规范和操作规程；-国内外公开发表的生姜茎基腐病病原学、流行学及抗性鉴定方法研究文献；-编制组成员单位多年积累的室内抗性鉴定和田间病圃鉴定的实践经验与试验数据。2.2编制原则科学性原则。抗性鉴定方法的每一个环节均以植物病理学和抗病育种学的基本原理为依据，充分参考国内外相关研究的最新进展和公认方法，确保鉴定结果能够真实反映供试材料的遗传抗性水平。统一性原则。对病原菌的分离与保存、接种体的制备与浓度、接种方法、环境条件、调查时间和抗性评价指标等关键环节进行统一规定，最大限度地减少人为因素和操作差异带来的系统误差，保证不同时间、不同批次、不同实验室鉴定结果的可比性。适用性原则。充分考虑到我国生姜主要产区的气候条件、种植制度和生产实际，确保标准规定的技术方法在科研单位和育种机构具备可操作性和可推广性。兼顾室内人工接种鉴定与田间自然病圃鉴定两种途径，满足不同层次使用者的需求。可操作性原则。在保证鉴定准确性的前提下，尽量简化操作流程，控制鉴定成本，使标准不仅适用于专业的科研实验室，也能在具备基本条件的育种单位和农业技术推广部门实施。三、标准主要内容与技术要点NY/T4719-2025《生姜茎基腐病抗性鉴定技术规程》主要包括以下技术内容：3.1术语和定义标准对以下关键术语进行了明确定义：抗性鉴定：通过人工接种或田间自然感病的方式，评价作物品种或种质资源对特定病害抵抗能力的技术过程。致病型：依据病原菌对寄主品种致病力的差异划分的病原菌类型。生姜茎基腐病菌的致病力存在明显分化，不同来源菌株对同一生姜品种的致病力可能存在差异。病情指数：综合考虑发病株率和发病严重度两方面因素，用以定量描述群体发病程度的量化指标。病情指数的计算公式为：病情指数=Σ(各级病株数×该级代表值)/(调查总株数×最高级代表值)×100。抗性评价：根据病情指数计算结果，按照标准规定的分级标准，将供试材料归入相应的抗性等级，作出抗性水平判断的过程。3.2病原菌准备标准规定，用于抗性鉴定的生姜茎基腐病病原菌应使用致病力强、生物学特性典型的标准菌株。标准建议优先采用从生姜茎基腐病典型病株上分离、经单孢纯化、形态学与分子生物学双重鉴定确认、且经柯赫氏法则验证具有致病力的菌株。标准明确列出了几种主要病原菌的名称，包括腐皮镰孢菌（*Fusariumsolani*）、尖孢镰孢菌（*Fusariumoxysporum*）等。若使用多个菌株，应分别制备接种体，或等量混合制成混合接种体使用。病原菌的保存采用甘油管冷冻保存法或玉米粒/沙土管保存法，保存条件为-80℃超低温冰箱或4℃冰箱，定期进行转管活化以保持菌株的致病力和活性。接种前需将保存菌株在PDA培养基上于25~28℃活化培养5~7天，以确保获得足够数量和活力的新鲜菌体。3.3接种体制备接种体的制备是抗性鉴定中影响结果稳定性的关键环节之一。标准明确了以下技术要求：液体培养法：将活化后的病原菌菌块接种于PSB液体培养基（马铃薯葡萄糖液体培养基）或PDB液体培养基中，在25~28℃、120~150r/min振荡培养5~7天，经无菌纱布过滤除去菌丝片段后，用血球计数板计数分生孢子浓度，并用无菌水将孢子悬浮液调节至所需浓度。镰孢菌接种体建议使用分生孢子悬浮液，浓度一般为1×10⁶个/mL。固体培养法：将病原菌接种于PDA平板或PDA斜面培养基上，在25~28℃恒温培养箱中培养7~10天，待培养基表面大量产孢后，用无菌水洗脱孢子，经两层无菌纱布过滤后，调整孢子悬浮液至标准规定浓度。谷物扩大培养法：适用于田间病圃接种或需要大量接种体的场景。将小麦粒或玉米粒浸泡吸水后装瓶灭菌，接入病原菌在25~28℃培养10~15天，待谷物上长满菌丝和孢子后，风干备用。接种时按一定比例混入土壤或基质中。标准要求接种体应在使用前配制，在制备后4小时内完成接种，以确保孢子活力和致病力。使用混合菌株接种时，各菌株孢子浓度应等量混合。3.4鉴定条件与试验设计室内人工接种鉴定采用盆栽法。标准规定供试生姜种姜应选择大小一致、芽体饱满、无病虫害的健康种姜，于适宜条件下催芽后进行盆栽。栽培基质采用经灭菌处理的泥炭土、蛭石和珍珠岩（体积比2:1:1）的混合基质，装盆后浇透水。每盆种植1株，每份材料设3次重复，每重复不少于10株，设已知抗性品种作为抗病和感病对照。田间自然病圃鉴定应选择茎基腐病发生均匀、发病历史清楚的田块作为病圃。供试材料按随机区组排列，每份材料3次重复，每小区不少于20株，四周设保护行。病圃不使用杀真菌剂，栽培管理措施与当地大田生产一致。环境条件控制：室内鉴定期间控制温度25~30℃，空气相对湿度80%以上，光照12h/12h光暗交替。温室或人工气候室应保持良好的通风和温湿度条件。3.5接种方法室内接种方法：生姜长至3~4片叶时进行接种。采用伤根灌根法，用消毒针在植株茎基部造成轻微伤口后，将孢子悬浮液均匀浇灌于植株茎基部周围土壤中，每株接种量为10mL。也可采用菌土法，将制备好的谷物培养物按3%~5%的比例（质量比）与表层基质混匀后用于定植。接种后保持基质湿润，覆盖保湿24~48小时，以利于病原菌的侵入。田间病圃接种方法：在生姜出苗后30~40天进行，在植株茎基部周围开浅沟后均匀撒施病原菌谷物培养物，然后覆土并浇水保湿。也可利用田间病圃中自然积累的病原菌进行自然发病鉴定。3.6病情调查与抗性评价调查时间：室内鉴定接种后20~25天进行调查，田间病圃鉴定在姜株进入旺盛生长期后、发病高峰期进行调查。若对照感病品种病情指数未达到标准规定的最低发病水平（室内≥60，田间≥50），则本次鉴定视为无效，需重新进行。病情分级标准：标准以植株茎基部症状表现为主要依据，将病情分为5级，具体分级标准如下：|病级|症状描述||------|----------||0级|无症状，茎基部无病斑，植株生长正常||1级|茎基部出现水渍状小病斑，病斑面积占茎围1/4以下，植株无明显异常||3级|茎基部病斑面积占茎围1/4~1/2，植株部分叶片轻微黄化||5级|茎基部病斑面积占茎围1/2~3/4，植株明显矮化，大部分叶片黄化或萎蔫||7级|茎基部病斑面积占茎围3/4以上或茎基部缢缩腐烂，植株严重萎蔫