NYT 1953-2025 猪附红细胞体病诊断技术标准立项发展报告

猪附红细胞体病诊断技术标准立项发展报告StandardizationDevelopmentReport:DiagnosticTechniquesforPorcineEperythrozoonosis摘要猪附红细胞体病是由附红细胞体（*Mycoplasmasuis*，曾用名*Eperythrozoonsuis*）感染引起的一种危害严重的传染性血液原虫病，给我国乃至全球养猪业造成了巨大的经济损失。随着养猪业规模化、集约化程度的不断提高，该病的防控形势日益严峻，而准确、快速、标准化的诊断技术则是实现有效防控的关键前提。本报告基于行业标准NY/T1953-2025《猪附红细胞体病诊断技术》的立项背景，系统梳理了该标准在编制过程中所遵循的技术原则、核心内容框架及关键技术指标，深入分析了标准实施对规范临床与实验室诊断流程、提升疫病监测预警能力、推动兽医学标准化体系建设以及保障肉食品安全等方面的多重意义。报告还介绍了标准主要起草单位——中国农业科学院哈尔滨兽医研究所的基本情况、科研实力及其在标准制定中的关键作用，并对该标准未来在分子诊断技术融合、现场快速检测设备开发以及国际化推广等方面的发展前景进行了展望，旨在为兽医临床工作者、疫病防控机构及相关科研人员提供权威、专业的参考依据。关键词：猪附红细胞体病；诊断技术；农业行业标准；NY/T1953-2025；疫病防控；标准化Keywords:PorcineEperythrozoonosis;DiagnosticTechniques;AgriculturalIndustryStandard;NY/T1953-2025;DiseasePreventionandControl;Standardization一、引言猪附红细胞体病（PorcineEperythrozoonosis）是由附红细胞体（*Eperythrozoonsuis*）寄生于猪红细胞表面或血浆中所引起的一种人兽共患传染性血液原虫病。该病自1932年Doyle首次报道以来，已在世界范围内广泛流行。在我国，自20世纪80年代起，该病在多个省份陆续暴发和流行，尤其在夏季蚊虫孳生季节和猪只应激状态下发病率显著升高，已成为严重威胁养猪业健康发展的主要疫病之一。猪附红细胞体病的临床危害主要表现为发热、贫血、黄疸和生长发育迟缓，急性暴发时可导致母猪流产、仔猪高死亡率，给养殖企业带来严重的经济损失。然而，该病的临床症状与猪瘟、猪蓝耳病、猪圆环病毒病等多种疫病存在相似性，单靠临床诊断极易造成误诊和漏诊，迫切需要建立统一、规范、灵敏、特异的标准化诊断技术体系。在此背景下，由中华人民共和国农业农村部提出并归口管理的农业行业标准NY/T1953-2025《猪附红细胞体病诊断技术》于2025年1月9日正式发布，并将于2025年5月1日起实施。该标准的发布填补了我国在猪附红细胞体病标准化诊断领域的最新规范需求，对于提高我国猪附红细胞体病的综合防控能力和实验室诊断水平具有重要意义。二、标准概况2.1标准基本信息NY/T1953-2025《猪附红细胞体病诊断技术》是一项农业行业推荐性标准，由农业农村部发布，主管部门为农业农村部畜牧兽医局，技术归口单位为全国动物卫生标准化技术委员会。该标准替代了此前实施的NY/T1953-2010版本（如有），根据近年来病原学研究进展和检测技术发展进行了系统修订和完善。标准按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草，遵循了科学性、先进性、适用性和可操作性的编制原则。标准全文以中文编写，分类号归属于兽医学领域，国别为中国。2.2标准适用范围该标准适用于各级动物疫病预防控制机构、动物卫生监督机构、科研院所、兽医诊断实验室及相关养殖企业从事猪附红细胞体病的诊断、检疫、监测和流行病学调查等工作。标准首次明确了适用于不同场景下的诊断方法选择策略，既适用于实验室确诊，也兼顾了养殖场现场的初筛需求。2.3规范性引用文件标准在编制过程中引用了以下规范性文件作为技术依据：-GB/T6682-2023《分析实验室用水规格和试验方法》-GB19489-2008《实验室生物安全通用要求》-GB/T27634-2023《实验动物寄生虫学等级及监测》-NY/T541-2016《兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范》-《病原微生物实验室生物安全管理条例》（国务院令第424号）三、标准编制背景与必要性3.1产业发展需求我国是全球最大的生猪养殖国和猪肉消费国，生猪存栏量和出栏量均居世界首位。据国家统计局数据，近年来我国生猪年出栏量维持在7亿头以上，生猪养殖产值超过万亿元。在如此庞大的产业规模下，疫病防控的重要性不言而喻。猪附红细胞体病在我国各地普遍存在，感染率呈现逐年上升趋势。据相关流行病学调查显示，我国部分省份规模化猪场的附红细胞体感染率可达30%～70%，个别地区甚至更高。该病不仅直接影响生猪健康和养殖效益，还可能导致猪群免疫功能抑制，从而继发或并发其他病原感染，使疫病防控形势更加复杂。3.2现有诊断技术的问题与挑战在NY/T1953-2025标准发布前，我国猪附红细胞体病的诊断工作主要面临以下突出问题：第一，诊断方法不统一。各实验室采用的诊断技术各不相同，有的以血液涂片镜检为主，有的采用PCR检测，有的依赖血清学方法，检测结果之间缺乏可比性，严重影响了诊断结论的一致性和权威性。第二，传统方法与现代方法缺乏衔接。血液涂片镜检是国内基层兽医实验室最常用的方法，但该方法敏感性较低，在隐性感染或慢性感染病例中容易出现假阴性结果，且无法区分附红细胞体的种属和感染状态。而分子生物学方法（如PCR、实时荧光PCR等）虽具有高灵敏度和高特异性，但尚未在基层得到普及和规范。第三，国际标准对接不足。世界动物卫生组织（WOAH，原OIE）对包括猪附红细胞体病在内的多种猪病诊断技术提出了参考性要求，但国内标准体系与国际标准之间尚存在一定差距。3.3法规与政策依据近年来，国家高度重视动物疫病防控标准化工作。《中华人民共和国动物防疫法》（2021年修订）明确要求加强动物疫病诊断检测标准化建设。《全国动植物保护能力提升工程建设规划（2017—2025年）》和《“十四五”全国畜牧兽医行业发展规划》均将动物疫病诊断标准化作为重点建设内容。此外，农业农村部陆续发布了《兽医诊断制品注册分类及注册资料要求》《国家动物疫病监测与流行病学调查计划（2021—2025年）》等文件，对标准化诊断技术提出了明确要求。四、标准主要技术内容4.1标准编制原则NY/T1953-2025标准的编制遵循以下原则：一是坚持科学性和先进性原则，充分吸收国内外最新研究成果，纳入实时荧光PCR、套式PCR等分子生物学检测技术，确保标准的前瞻性和引领性。二是坚持实用性和可操作性原则，兼顾不同层级实验室的技术条件和设备配置水平，推荐方法覆盖从基层初筛到确诊确认的完整技术层级。三是坚持系统性和完整性的原则，将临床诊断、病原学检测、血清学检测和分子生物学检测有机结合，构建多层次诊断技术体系。4.2主要内容框架本标准的章节结构如下——范围、规范性引用文件、术语和定义、缩略语、诊断方法分类与选择、样品采集与处理、临床诊断、病原学检测方法、分子生物学检测方法、血清学检测方法、结果判定与报告、生物安全要求及附录部分。以下对关键技术内容进行阐述。4.3临床诊断要点标准在临床诊断部分根据病程和流行特点将猪附红细胞体病归纳为三种类型：-急性型：多见于仔猪和怀孕母猪，表现为高热（40.5℃～42℃）、食欲废绝、可视黏膜苍白或黄染，耳部、腹下及四肢末端皮肤出现紫红色瘀斑，死亡率可达20%～30%。-亚急性型：体温呈间歇性升高，贫血和黄疸症状较轻，病猪消瘦、生长迟缓，病程可持续数周。-慢性型（隐性型）：无明显临床症状或仅表现为生产性能下降，感染猪成为重要传染源。4.4病原学检测方法病原学检测是确诊猪附红细胞体病的重要依据。标准中规定了以下方法：-鲜血压片法：采集耳尖或尾尖静脉血，加抗凝剂后制作压片，在暗视野或相差显微镜下观察红细胞表面附着的病原体。该法操作简便、成本低廉，适用于基层实验室快速初筛。-血液涂片染色法：制备薄血涂片，采用瑞氏-吉姆萨复合染色法染色后镜检，典型形态为红细胞表面可见蓝紫色球状、杆状或环状病原体。标准明确了阳性判定标准。-动物接种试验：用可疑血液腹腔接种健康易感猪或切除脾脏的试验猪，观察发病情况并回收病原体。4.5分子生物学检测方法分子生物学方法是当前猪附红细胞体病诊断中灵敏度和特异性最高的技术手段，也是本标准的重点和亮点所在，主要包括以下两类：-常规PCR检测方法：针对附红细胞体16SrRNA基因高度保守区域设计特异性引物，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳判定结果。本标准明确了引物序列信息、反应体系组成（包括预变性、变性、退火、延伸等温度和时间参数）以及阳性判定的特异性条带大小。-实时荧光定量PCR（qPCR）方法：采用TaqMan探针法或SYBRGreen染料法，实现对病原核酸的实时定量检测。标准对反应体系和循环参数、阳性判定阈值（Cq值）以及引物和探针序列作出了明确的规定。该方法较之常规PCR具有更高的灵敏度和更低的污染风险，且可实现定量分析，为感染程度的评估和药物疗效监测提供了可靠工具。4.6血清学检测方法标准中纳入了间接ELISA和间接免疫荧光试验（IFA）两种血清学检测方法，用于检测猪血清或血浆中的抗附红细胞体特异性抗体。ELISA方法适用于大批量样品的流行病学调查和免疫监测，具备操作标准化程度高、结果判读客观等优点；IFA方法则适用于实验室确证和科学研究。标准对包被抗原的制备、血清稀释度、阴阳性临界值的设定、质控品的设置等关键环节均作了详细规定。4.7结果判定与报告标准规定，在临床诊断基础上，综合病原学检测、分子生物学检测和血清学检测结果，按照“病原学阳性+临床特征符合”或“分子生物学阳性”的原则作出确诊结论。标准要求，实验室应严格按照规定格式出具诊断报告，结果报告中应包括动物信息、送检单位、样品类型、检测方法、检测结果和判定结论等要素，确保信息可追溯。4.8生物安全要求鉴于猪附红细胞体病属于人兽共患传染病，标准以规范性附录的形式规定了诊断操作过程中的生物安全防护要求，涵盖个人防护装备的使用、实验室消毒规程、感染性废弃物的无害化处理流程、样品运输的生物安全规范等方面的内容，切实保障实验室操作人员和环境的安全。五、标准实施的意义与影响5.1对行业发展的积极推动NY/T1953-2025标准的发布实施，将从根本上改变我国猪附红细胞体病诊断方法不统一、检测结果可比性差的局面。通过标准化的诊断技术规范和统一的操作流程，不同实验室之间的检测结果将具有一致性和可比性，为疫情数据的汇总分析、疫病的空间分布研究和精准防控策略的制定奠定坚实基础。5.2对实验室能力建设的促进作用标准的实施要求各级实验室配备相应的仪器设备和专业技术人员，这将促进基层兽医实验室的标准化建设和能力提升。同时，标准中涵盖的多种方法适用于不同层级的实验室条件，为实验室的技术发展提供了明确路径。5.3对肉食品安全保障的积极意义附红细胞体感染的猪只因免疫功能受损，更易感染其他病原体，增加了兽药使用量，对食品安全构成隐患。标准化诊断技术的推广有助于生猪屠宰前的健康筛查和早期识别，从源头上保障猪肉产品的安全供给。5.4对国际标准对接的促进效应该标准的发布实施，为中国参与国际动物卫生标准的制定提供了技术支撑和话语权基础。通过与WOAH相关标准的对比和参照，有助于推动我国兽医诊断标准与国际接轨，提升我国动物疫病防控的国际影响力。六、主要起草单位介绍——中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（以下简称“哈兽研”）是NY/T1953-2025《猪附红细胞体病诊断技术》标准的牵头起草单位，也是我国兽医科学研究领域历史最悠久、综合实力最强的国家级科研机构之一。6.1单位概况哈兽研创建于1948年，是农业农村部直属的国家级兽医科研院所，坐落于黑龙江省哈尔滨市。研究所现有在职职工800余人，其中中国工程院院士2人，国家杰出青年科学基金获得者8人，国家级人才计划入选者30余人，形成了结构合理、梯队完善的高水平科研创新团队。研究所在动物疫病病原学、流行病学、诊断技术与疫苗研发等方面拥有雄厚的研究基础和长期的科研积淀，多项研究成果达到国际领先水平。6.2历史沿革与科研成就建所七十余年来，哈兽研始终以保障国家畜牧产业安全和公共卫生安全为己任，先后主持完成了国家“973”计划、“863”计划、国家重点研发计划等重大科研项目数百项。在重大动物疫病防控领域，研究所取得了包括马传贫疫苗、禽流感疫苗等在内的一系列标志性成果，为我国动物疫病防控事业作出了不可替代的贡献。在猪病研究领域，哈兽研在猪瘟、猪蓝耳病、猪圆环病毒病、猪附红细胞体病等方面开展了系统研究，培养了一大批猪病诊断与防控领域的专家和技术骨干。6.3在标准制定中的关键作用在本标准的制定过程中，哈兽研充分发挥了以下几方面的核心作用：一是技术上全面支撑。哈兽研猪病研究团队长期从事猪附红细胞体病的病原生物学、感染与致病机制、诊断技术等方面的基础研究和应用研究，积累了大量的科研数据和技术储备。项目组系统比较了国内外多种诊断方法，通过大量的实验室验证和临床比对试验，筛选确定了敏感性高、特异性强、重复性好的诊断方法纳入标准。二是组织协调和统筹推进。作为牵头单位，哈兽研协调了全国多家科研院所、高校和省级疫病预防控制中心共同参与标准的研究与起草工作，广泛征求各方意见和建议，确保标准的科学性、代表性和适用性。三是试验验证与示范应用。哈兽研依托其P3实验室和国家动物疫病防控高级别生物安全实验室平台，完成了标准中各项方法的灵敏度、特异性、重复性、再现性等系统验证工作，并在多个规模化猪场进行了实际应用验证，为标准技术指标的确定提供了可靠的数据支撑。6.4对外合作与技术服务哈兽研高度重视科技成果转化和技术服务工作，通过共建联合实验室、技术培训、咨询服务等方式，帮助基层兽医实验室提升诊断技术水平。研究所每年举办多期兽医诊断技术培训班，培训学员遍布全国各省（自治区、直辖市），为标准的宣贯和推广实施提供了有力的人才支撑。七、结论与展望NY/T1953-2025《猪附红细胞体病诊断技术》标准的发布标志着我国在猪附红细胞体病标准化诊断领域迈上了新台阶。该标准构建了从临床诊断到病原学检测、从分子生物学检测到血清学检测的多层次、全流程技术体系，既充分体现了当前国内外在该领域的最新技术进展，又兼顾了我国不同层级实验室的实际条件和应用需求，具有显著的科学性、先进性和实用性