雅培洛匹那韦利托那韦口服液质量标准A20010012

-PAGE1-洛匹那韦/利托那韦口服溶液LuoPiNaWei/LiTuoNaWeiKouFuRongYeLopinavirandRitonavirOralSolution本品含洛匹那韦（C37H48N4O5）和利托那韦（C37H48N6O5S2）均应为标示量的90.0%~110.0%。【规格】每1ml含洛匹那韦80mg 利托那韦20mg【性状】本品为淡黄色至橙色的澄清液体。【鉴别】（1）本品在含量测定项下记录的色谱图中，供试品主峰保留时间应与洛匹那韦对照品和利托那韦对照品主峰保留时间一致。（2）取本品1.0g，加乙腈-水（1：1）混合液5ml，强烈振摇，加庚烷10ml，再强烈振摇数分钟，静置使分层，分取下层溶液离心10分钟（4000rpm）,取离心后的溶液作为供使品溶液；另取洛匹那韦对照品约30mg，利托那韦对照品约7.5mg，分别加乙腈-水（1：1）混合液1.0ml使溶解，作为对照品溶液①和②。照薄层色谱法（中国药典2000年版二部附录ⅤB）试验，吸取上述三种溶液各3µl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以醋酸乙酯-丙酮-二乙胺（7：3：0.15）为展开剂，展开后，晾干，置紫光灯（254nm）下检视，供使品溶液所显两个成分的主斑点的颜色和位置分别与对照品溶液①和②主斑点相同。【检查】有关物质照高效液相色谱法（中国药典2000年版二部附录ⅤD）测定。色谱条件与系统适用性试验用丁烷基硅烷键合硅胶为填充剂（YMCpackC43µ150×4.6mm柱适用）；以磷酸盐缓冲液（KH2PO43.8g，K2HPO4·3H2O0.33g加水溶解至1000ml）-乙腈-丁醇-四氢呋喃（690：180：50：80）为流动相（pH6.3±0.1，必要时用1mol/L磷酸或1mol/L氢氧化钾调整）；流速为1.0ml/min；柱温60°C，检测波长分别为215nm和240nm。取对照品溶液50µl，进样测试，在240nm的波长处检测，调节仪器的检测灵敏度，使利托那韦峰为满刻度的15%以上，利托那韦容量因子（K’）应大于13，理论板数按利托那韦峰计算应不低于5000，拖尾因子应在0.8~1.2之间，用校正相对保留值[α=（t有关物质-t0）/(tRitonavir-t0)]识别各有关物质峰，各有关物质峰的校正相对保留值分别为：单乙酰缬氨酸0.11；丙二醇加合物0.24，氧化杂质0.36，酸性水解物0.39；乙醇加合物0.45。在215nm的波长处检测，利托那韦与洛匹那韦的分离度应大于2.5。测定法取洛匹那韦对照品与利托那韦对照品各约10mg，精密称定，置同一50ml量瓶中，加0.03mol/L磷酸二氢钾-乙腈（1：1）混合液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取3ml，置50ml量瓶中，加0.03mol/L磷酸二氢钾-乙腈-丁醇（80：15：5）混合液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。另精密量取本品5ml，置100ml量瓶中，加0.03mol/L磷酸二氢钾-乙腈（35：65）混合液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取25ml，置50ml量瓶中，加0.03mol/L磷酸二氢钾-乙腈-丁醇（80：15：5）混合液稀释至刻度，摇匀，量取15ml，置60ml分液漏斗中，用庚烷提取3次，每次20ml，取水层离心10分钟（4000rpm），取澄清液作供试品溶液。精密量取对照品溶液和供试品溶液各50µl，注入液相色谱仪，记录色谱图至利托那韦峰保留时间的两倍，扣除空白溶剂出现的峰，量取校正相对保留值为0.11以后的峰，按百分面积归一法计算在240nm检测大于0.01%以上的所有峰的面积，按利托那韦自身对照法分别计算单乙酰缬氨酸、丙二醇加合物、酸性水解物、乙醇加合物、氧化杂质和其他单个未知有关物质的量，并将结果分别除以0.81、0.59、0.73、0.66、0.86、1.00进行校正。单乙酰缬氨酸、丙二醇加合物、酸性水解物、乙醇加合物、氧化杂质，其他单个未知有关物质分别不得过利托那韦标示量的0.8%、0.5%、0.4%、0.7%、0.5%、0.2%，总有关物质不得过利托那韦标示量的3.3%。按百分面积归一法计算在215nm的波长处检测大于0.01%以上的所有峰的面积（在240nm检测中已确定的有关物质，在215nm的波长处检测中相应保留时间的有关物质峰不再计算）按洛匹那韦自身对照法计算，单个未知有关物质不得过洛匹那韦标示量的0.2%，总有关物质不得过洛匹那韦标示量的0.5%。乙醇量照气相色谱法（中国药典2000年版二部附录ⅤE）测定。色谱条件与系统适用性试验用直径为0.25~0.18mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球为载体，柱温：165°C，理论板数按异丙醇峰计算应不低于500，乙醇峰与异丙醇峰的分离度应大于2.0。测定法精密量取本品2ml，置100ml量瓶中，精密加入内标溶液（每1ml含异丙醇50µl的甲醇溶液）10ml，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另精密量取无水乙醇2ml置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置50ml量瓶中，精密加入内标溶液5ml，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。量取对照品溶液和供试品溶液各1µl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，按内标法以峰面积计算。本品种含乙醇量应为36.0%-48.8%（V/V）。微生物限度取本品，依法检查（中国药典2000年版二部附录ⅪJ）应符合规定。其它应符合口服溶液剂项下有关的各项规定（中国药典2000年版二部附录ⅠO）。【含量测定】照高效液相色谱法（中国药典2000年版二部附录ⅴD）测定。色谱条件与系统适用性试验用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂（BDS—HypersilC85µ150×4.6mm柱适用）；以0.03mol/L磷酸二氢钾-乙腈-甲醇-四氢呋喃（600：187：107：107）为流动相；柱温40°C，检测波长为215nm，流速2.0ml/min。理论板数按利托那韦峰计算应不少于5000，利托那韦的拖尾因子应在0.8-1.2之间，利托那韦与内标物质峰的分离度应大于3.5。内标溶液制备取联苯（Biphenyl）5mg，精密称定，置100ml量瓶中，加0.03mol/L磷酸二氢钾-乙腈（1：1）混合液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。测定法精密量取本品5ml（相当于利托那韦100mg，洛匹那韦400mg），置100ml量瓶中，加0.03mol/L磷酸二氢钾-乙腈（35：65）混合液稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加0.03mol/L磷酸二氢钾-乙腈（1：1）混合液稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置20ml量瓶，精密加内标溶液2ml，加0.03mol/L磷酸二氢钾-乙腈（1：1）混合液稀释至刻度，摇匀，量取50µl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取利托那韦对照品约10.5mg和洛匹那韦对照品约42mg，分别精密称定，置同一50ml量瓶中，加0.03mol/L磷酸二氢钾-乙腈（1：1）混合液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取3ml，置50ml量瓶中，精密加内标溶液5ml，加0.03mol/L磷酸二氢钾-乙腈（1：1）混合液稀释至刻度，摇