DB53T+1457-2026月季杂交育种技术规程

ICS65.020.20CCSB6253云南省市场监督管理局发布DB53/T1457—20261本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。DB53/T1457《月季杂交育种技术规程》与GB/T41201《月季切花等级》、GB/T23897《主要切花产品采后处理技术规程》、NY/T4510《月季霜霉病抗性鉴定技术规程》、NY/T4509《切花月季基质栽培技术规程》、NY/T1745《切花月季脱毒种苗》、NY/T1593《月季切花种苗等级规格》、NY/T1464.48《农药田间药效试验准则第48部分：植物生长调节剂调控月季生长》、NY/T321《月季切花等级规格》、LY/T2773《绿地月季栽培养护技术规程》、LY/T1912《切花月季生产技术规程》、LY/T1868《蔷薇属植物新品种特异性、一致性、稳定性测试指南》、LY/T1666《月季苗木质量》、SB/T11098.2《鲜切花拍卖产品质量等级第2部分：单头月季》、DB53/T1142《微型月季盆花生产技术规程》、DB5《高原切花玫瑰基质栽培技术规程》等共同构成支撑云南省月季花卉产业的地方标准体系。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由云南省农业农村厅提出。本文件由云南省花卉标准化技术委员会（YNTC08）归口。本文件起草单位：云南省农业科学院花卉研究所、云南云秀花卉有限公司、楚雄滇耘花卉园艺有限公司、通海锦海农业科技发展有限公司、国家观赏园艺工程技术研究中心、云南省花卉育种重点实验室、昆明市农业科学研究院。本文件主要起草人：王丽花、王其刚、晏慧君、邱显钦、张颢、蹇洪英、景维坤、王慧纯、陈敏、叶玉、冯德党、段金辉、谭维忠、董春富、杨维、嵇筱。DB53/T1457—20261月季杂交育种技术规程本文件规定了月季（Rosacvs.）杂交育种的场地环境及设施设备、亲本选配、杂交授粉、杂交果实采收与后熟、杂交种子处理、播种育苗、优良单株筛选及扩繁、新品种申报、技术档案的技术要求。本文件适用于月季的杂交育种。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6001育苗技术规程LY/T1868蔷薇属植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南NY/T1593月季切花种苗等级规格DB53/T1128高原切花玫瑰基质栽培技术规程DB53/T1347高原切花玫瑰基质栽培连栋温室主体结构设计与验收3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1杂交育种crossbreeding指利用生物杂种优势，将两个或两个以上的亲本进行杂交，对杂交后代通过多代选择、比较和鉴定，培育新品种的育种方法。3.2杂交配组crosscombination根据育种目标和亲本的遗传特性，将具有不同优良性状的亲本进行配对或组合。3.3去雄emasculation去除母本雄芯的技术措施。4场地环境及设施设备4.1环境条件DB53/T1457—20262年平均气温为14℃~18℃,极端最高气温不超过34℃,极端最低气温不低于-5℃,年平均日照时间为2200h～2750h，光照强度6000Lux～80000Lux，灌溉水源pH为6.5～7.5，EC值＜0.5mS/cm。4.2场地条件选择地势平整，交通便利，水、电、气、网通畅，排灌便利的保护地，且周围5km内无化工、火电厂等可能存在的污染源。4.3温室选择内部环境条件相对稳定一致的温室（大棚）设施，宜采用肩高5.5m～7.0m、拱高8.2m～9.7m、裙膜高1.5m～1.8m、具侧面双开窗的蝶形顶开窗温室，蝶形顶开窗可采用单开窗或双开窗，开窗宽度1.2m～1.5m。温室宜覆盖12丝或15丝防滴漏散射塑料膜，并配备70%～80%遮荫网。其他参数执行DB53/T1347规定。4.4水肥系统宜配置施肥系统、水肥回收系统及紫外线消毒系统。4.5灌溉设施宜采用全自动滴灌系统。4.6其他设备宜配备超微喷雾打药机等植保设备，控温控湿设备及器械等。5亲本选配5.1育种目标确定围绕“好种又好卖”的原则，以观赏、经济及市场认可度等为育种目标，包含花型、花色、芳香、抗性、无刺、生长势、肥水能耗、产量、生产能耗、产品耐贮运性、盆花冠型、观赏期等性状。5.2亲本选择根据育种目标选择观赏性状、经济性状优良且遗传力强、亲和性高、育性强的蔷薇属野生种、品种、优株、自然突变体等材料作为亲本。5.3亲本配组构建杂交组合的亲本配组应遵行以下原则：a)同类型杂交原则：按切花月季（单头、多头）、盆栽月季、庭院月季、加工用月季等分类配组杂交；b)性状互补原则：父母本具不同突出优点，主要性状优势互补；c)遗传差异原则：双亲遗传差异较大，主要优良性状在亲本之一中有突出表现，且具有较强遗传力；d)亲缘性原则：双亲亲缘关系较远；e)适应性原则：杂交亲本之一对当地自然条件适应性强；f)可育性原则：双亲应具有较好的育性和亲和力。DB53/T1457—202636杂交授粉6.1杂交前的准备6.1.1制定杂交计划，包括亲本选择、杂交组合配置、杂交花朵数量、杂交时间等。6.1.2准备洁净的镊子、毛笔、硫酸纸袋、干燥器、变色硅胶、烘箱、培养皿、一次性纸杯，以及标签、铅笔、记号笔、记录本等。6.2亲本植株的选择亲本植株的选择应满足以下要求：a)双亲植株生长健壮，全花器官发育良好，花朵开放正常；g)母本植株宜选择具有梨形花托、子房下位的品种，且雌蕊发育正常、规整，花柱短粗不弯曲，柱头具较高的可授性，授粉后能够正常结实；h)父本植株雄蕊发育正常，花药饱满，花粉量较大，花粉离体萌发率宜≥15%。6.3双亲花期6.3.1花期一致的亲本可直接进行杂交。6.3.2花期不遇的，早花亲本作为父本，采集其花粉贮藏待用。6.3.3如需将早花亲本作为母本，宜采取修剪等调控措施使其延迟开花再进行授粉。6.4母本去雄按以下要求进行：a)选择母本植株中上部即将开放且雄蕊尚未完全发育成熟的花朵；i)每株选留2枝～5枝健壮花枝，单头月季花朵去雄2朵～3朵，多头月季花朵去雄5朵～15朵，其余花朵摘除后带出温室集中处理；j)去雄时宜在晴天15点后，小心剥除内层花瓣，保留1层～2层外层花瓣，用镊子小心去除花药，操作时避免损伤柱头并确保无花药残留；k)去雄完成后立即将整个花朵套上硫酸纸袋；l)一个品种去雄完成后，宜用75%酒精擦拭干净镊子后方可进行下个品种的去雄。6.5花粉的收集和保存6.5.1收集杂交前1d～2d，宜晴天采摘父本植株上即将开放、花药成熟的花朵带回室内，置于硫酸纸上，剥除花瓣后用洁净镊子取出花药收集到一次性纸杯或培养皿中，贴好标签，标签上注明品种名称、编号、日期、采集人等信息。无需低温保存的花粉宜使用一次性纸杯收集，需低温保存的花粉宜用培养皿收集。将一次性纸杯或培养皿放入干燥器内，待花药自然开裂散出花粉后收集花粉备用。收集下一个品种的花药前宜用75%酒精擦拭干净镊子后方可进行。6.5.2保存3d内使用的花粉置于23℃(±1℃)恒温培养箱中保存。保存时间为3d～7d时置于1℃~4℃；保存时间＞7d时宜保存于-20℃,不超过30d。DB53/T1457—202646.6花粉活力检测6.6.1花粉萌发培养基制备授粉前宜采用离体萌发法检测花粉活力，花粉萌发培养基配方为10%蔗糖+2%琼脂+0.01%硼酸。配制好的培养基放入121℃下高压灭菌20min，自然冷却至压力表指针降至0时，开锅取出放在超净工作台冷却至不烫手时，倒入灭菌培养皿中并密封好，培养皿培养基厚度2mm～3mm。6.6.2花粉活力检测用毛刷将花粉粒均匀抖落在培养基上，用封口膜密封好培养皿，置于25℃恒温箱中培养4h～6h，显微镜下观察花粉粒萌发情况，花粉管长度大于花粉直径的视为具活力花粉。6.7授粉6.7.1授粉时间温室内一年四季均可授粉，露天宜3月～9月进行。宜选择上午8时～12时的晴天进行。花粉萌发率<15%的可采取二次授粉，于次日上午重复授粉1次。6.7.2授粉方法取下母本植株上的硫酸纸套袋备用，用干净毛笔蘸取父本花粉均匀涂抹在母本雌蕊柱头上，重复2次～3次，直至肉眼看到柱头上覆盖一层花粉后，及时套上硫酸纸袋，封住袋口。杂交多个组合时，不同父本应更换洁净毛笔。6.7.3标记和记录在授粉套袋的花枝挂上标签，写明父母本、花朵编号、授粉日期、操作人等信息，并做好记录。授粉记录表见附录A的表A.1。6.8杂交后管理温室授粉后3d～5d去除硫酸纸袋，露天环境应套无色纱网袋（10cm×15cm、40目），及时剔除母本植株坐果枝的侧芽，母本的种植养护应符合DB53/T1128的规定。7杂交果实采收及后熟7.1杂交果实采收杂交果实自然成熟至橙黄或红色，按不同组合及时对杂交果实进行采收。果实采收后清除花梗、萼片、花蕊等杂质后，将果实和标签一并放入透明纱袋中。7.2杂交果实后熟装有杂交果实的透明纱袋置于温度为23℃~25℃,相对空气湿度为35%～45%的环境下存放30d~35d完成后熟。8杂交种子处理8.1种子剥离DB53/T1457—20265取出后熟果实的种子，去除杂质装入纱网袋（10cm×15cm、40目）中。8.2种子浸泡将装有种子的纱网袋完全浸入洁净清水中浸泡，浸泡时间24h～36h，5h～8h更换清水一次。8.3种子清洗及筛选浸泡完成后，当种子充分吸水至种胚饱满时，清洗种子，去除杂质及漂浮于水面的空瘪种子，保留沉于水底的饱满种子。8.4种子消毒用0.10%～0.15%的高锰酸钾溶液浸泡20min～30min。8.5种子装袋完成消毒的种子应及时装袋，按以下流程进行：a)苔藓基质用0.10%～0.15%的高锰酸钾溶液浸泡消毒20min～30min，沥水至基质含水量为60%～80%，备用；b)根据种子量多少选择规格为5号～8号的干净PE透明自封袋，并在自封袋上端位置双面打孔，每面两孔，孔径0.6cm～0.8cm；c)将种子与消毒苔藓按体积比1∶3～5的比例均匀混合，装于打孔自封袋中，装入量不应超过自封袋容积的1/2，密封袋口；8.6低温春化将装有种子的自封袋整齐摆放在2℃~4℃的黑暗环境（不应遮蔽密封袋上的孔洞春化处理10周～14周，每隔3d～5d检查一次，确保基质含水量为60%～80%。自封袋摆放忌靠近冰箱内壁，避免袋内基质结冰。9播种育苗9.1播种育苗盘中装入8.0cm～10.0cm厚的消毒细椰糠（0mm～6mm）作为播种基质，清水淋透备用。种子完成春化后，同一杂交组合30%的种子萌发后，均匀撒播于育苗盘基质表面，再覆盖一层1.0cm~1.5cm厚的基质，及时喷透水，保持育苗环境温度为10℃~16℃,空气相对湿度≥65%，并用70%~80%的遮荫网全天遮阴。杂交苗养护执行GB/T6001的规定。9.2幼苗移栽及管理宜选择12cm×14cm的干净营养钵，装入消毒细椰糠（0mm～6mm）清水淋透备用。当实生苗形成完整的3片～4片真叶时移栽至营养钵中，生长至6片完整叶时进行第一次摘心，摘除顶芽促侧枝萌发，以后每15d侧枝摘心一次，连续摘心2次～3次。期间育苗温室应用50%～60%的遮荫网全天遮阴，视天气情况每天喷1次～2次清水，5d～7d淋施1次EC值为0.8mS/cm～1.0mS/cm的肥水溶液，肥水配方按DB53/T1128执行。9.3成苗定植及管理DB53/T1457—20266经摘心处理的实生苗形成4个～8个分枝后移栽定植于种植栽培槽，种植基质选择粗椰糠（10mm~K+<2.0mmoL/L、含水量<18%。种苗定植前1d～2d苗床基质应用清水冲淋2次～3次，定植后1周内每天上午9:00～10:00浇灌清水1次，1周后按DB53/T1128进行肥水管理及营养枝、开花枝培育，灌溉肥水EC值为1.3mS/cm～1.6mS/cm，滴灌6次～10次/天。10优良单株筛选及扩繁10.1杂交优株筛选待植株开花时观测并记录单株的植物学性状，根据花枝长度、花型、花色、花香、花瓣数量、花朵直径、生长势、抗性、产量、盆花株型等综合评价，优选单株并编号。性状测定执行LY/T1868的规定，对优选单株持续开展6茬～8茬的性状观测。10