培养基管理规程

培养基管理规程1.目的本规程规范微生物实验室的培养基管理，确保所使用的培养基符合药典要求。规范微生物实验室培养基的申购、验收、配制、培养基质量控制、储存、使用、废弃处理等，确保实验结果的准确性和微生物实验室的安全。2.范围适用于微生物实验室使用的培养基。3.职责品质部负责对本文件的起草；品质部负责人负责文件的审核和批准微生物检验员按照本规程执行。4.依据《药品生产质量管理规范（2010年修订）》《中国药典》现行版《药品微生物学检验技术》5.定义培养基是人工配制的生物营养物质，即用人工方法将多种物质按各种微生物生长繁的需要配制成的一种混合营养物。对照培养基按培养基处方特别制备、质量优良的培养基，用于培养基适用性检查，由中国药品生物制品检定所研制及分发。6.程序6.1培养基的分类：公司从外面购买的培养基分为脱水培养基、对照培养基和外购成品培养基。6.2培养基选用原则：依据公司产品质量标准，首选与其对应的《中国药典》中登载的培养基。6.3培养基的种类1）常用脱水培养基种类见下表：序号脱水培养基名称序号脱水培养基名称01胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）06沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)02胰酪大豆胨液体培养基(TSB)07沙氏葡萄糖液体培养基(SDB)03营养琼脂培养基(NUA)08液体硫乙醇酸盐培养基(FTM)04R2A琼脂培养基(R2A)09麦康凯琼脂培养基(MCA)05麦康凯液体培养基(MCB)10哥伦比亚琼脂培养基（COA）2）常用对照培养基种类见下表：序号对照培养基名称序号对照培养基名称01胰酪大豆胨琼脂对照培养基06麦康凯液体对照培养基02胰酪大豆胨液体对照培养基07硫乙醇酸盐流体对照培养基03沙氏葡萄糖琼脂对照培养基08R2A琼脂对照培养基04沙氏葡萄糖液体对照培养基09营养琼脂对照培养基05麦康凯琼脂对照培养基10哥伦比亚琼脂对照培养基6.4培养基管理1）培养基申购：培养基管理人员每月根据本月库存量和计划使用量申购所需培养基，申购时填写采购申请单，由品质部负责人审批后交至采购部，由采购部进行采购，购买时供应商能提供质量分析报告书（COA）；2）培养基的接收、领用：培养基购买回来后交培养基管理人员验收，验收项目包括：名称、批号、品牌、生产日期和有效期、培养基质量报告、包装的完整性等，如果有MSDS的，要求生产厂家提供或在相关网站下载，并于现场存放以供查阅。验收合格后入库，填写《培养基接收、领用记录》，并在瓶子上贴上《培养基标签》并存放于规定的环境中，日常领用应遵循先入先出的原则并填写《培养基接收、领用记录》。3）培养基的配制、分装与灭菌培养基干粉第一次开瓶使用时在《培养基标签》上面写上开口人、开口日期和有效期等信息；检验人员应参照培养基配制清单或说明书或药典的规定的方法进行配制，配制时将称量的脱水培养基干粉放在一个清洁、干燥的玻璃或不锈钢器皿中加纯化水加热溶解完全，再分装，称量后迅速拧紧培养基干粉瓶盖，贮存于干燥器内；配制时应填写《培养基配制使用记录》，配制记录上写明培养基的批号；盛装培养基的容器外壁应贴《培养基标签》，标签应注明：名称、批号、配制人、配制日期、有效期等信息。配制后的培养基必须在分装灭菌前进行校正PH值，如需调节PH值，一般可用酸或碱校正至比最终PH高0.2-0.3。培养基配制批号定义为：同一种干粉培养基同时配制并且同时灭菌的定为一批。批号编号方式为培养基代号“AAA”+“YYMMDDXX”，“AAA”代表为培养基的代号，“YY”代表“年”，“MM”代表“月，“DD”代表“日”，“XX”为“流水号”例如2025-10-16配制的第一批胰酪大豆胨琼脂培养基批号为：TSA25101601。如果同一品种培养基使用不同干粉批配制同时灭菌或同一品种培养基同时配制不同时灭菌或不同品种培养基同时灭菌都不能认为是同一批号。麦康凯琼脂培养基MCA麦康凯液体培养基MCB胰酪大豆胨琼脂培养基TSA胰酪大豆胨液体培养基TSB沙氏葡萄糖琼脂培养基SDA沙氏葡萄糖液体培养基SDBR2A琼脂R2A接触皿琼脂培养基CPM营养琼脂NA备注：表中没有的不常用的培养基代号使用英文名称首字母缩写或中文拼音首字母缩写。若培养基包装上有代号的则使用包装的代号。配置后的培养基分装到适宜的蓝盖瓶中，应在2小时内，按培养基配制清单或说明书规定的温度和时间进行灭菌，避免微生物滋生。灭菌前应贴上湿热灭菌指示带；灭菌后应观察其条码是否变成黑色，变为黑色时，表示该培养基已经过高压蒸汽灭菌；否则表示未经过灭菌或灭菌不彻底，不能使用。培养基灭菌后不允许储藏在高压灭菌器中，应及时取出按规定存放。对厂家配制说明不需要灭菌就可以使用的培养基其分装容器应预先进行灭菌，以保证培养基的安全性。为保证培养基的营养成分不被破坏，配制好的工作培养基只能灭菌一次，不得反复灭菌，培养基经高温灭菌后颜色会略有加深，但如果颜色过深，则表明灭菌温度过高或时间过长引起营养成分炭化，该批培养基作为不合格品废弃处理；灭菌后的培养基pH应冷却至室温（25±2℃）测定。琼脂培养基应采用固体pH电极，液体培养基应采用可浸没式pH电极，以确保符合药典及生产厂家的规定。除非经验证标明培养基的PH值允许的变化范围很宽，否则，PH值的范围不能超过规定值的±0.2；需融化的琼脂培养基，应采用水浴或流通蒸汽加热。融化后的培养基放在水浴温度为45℃-50℃中保存不超过8小时。需加热熔化的琼脂培养基每瓶装量体积不应超过500ml；琼脂培养基熔化次数不得超过1次。使用前应检查培养基的外观。瓶装培养基、平板或分装于试管的培养基应进行下列检查：容器和盖子不得破裂，尽量避免形成汽泡，固体培养基表面不得产生裂缝或涟漪，在冷藏温度下不得形成结晶，不得有污染微生物等；液体培养基应澄清，不得有污染微生物等。应在有效期内使用并填写《培养基配制使用记录》。6.5固体培养基灭菌后平皿的分装：1）在微生物实验室洁净区超净工作台内将灭菌后冷却至40-50℃的培养基分制成平皿；倾注培养基时，应先擦干培养基容器外表面的水分，避免容器外壁的水滴进入培养基中造成污染。2）在每个平皿中倒入约15-20mL已灭菌培养基，盖好平皿盖，自然冷却凝固后登记平皿总数；接触皿中倒入约20mL已灭菌培养基确保有凸起的表面，盖好平皿盖，自然冷却凝固，登记平皿总数；填写《培养基平板使用记录》。3）固体培养基灭菌后只允许再融化一次，避免因过度受热造成培养基质量下降或微生物污染。4）制成平板或分装于试管的培养基应进行下列检查：容器盖子不得破裂、装量准确、尽量避免形成气泡、固体培养基表面不得产生涟漪、在冷藏温度下不得形成结晶、不得污染微生物。6.6培养基储存及效期1）已灭菌的培养基保存于2~8℃药品保存箱中，暂定有效期为3个月（或经验证确定其有效期），即当日所配制的培养基的效期为三月后当日的前一天，例如2025.18.23所配制的培养基的效期为2025.11.22，后面根据培养基有效期验证确定其有效期；已经分装好的固体平皿贮存2-8℃药品保存箱内，暂定有效期为7天，如2025.10.25所配制的培养基平板的效期为2025.10.31（或经验证确定其有效期）。6.7培养基适用性试验为了确保微生物检验的可靠性，每批新配置的培养基都应进行培养基质量控制试验；其内容包括无菌性检查、促生长能力试验，对于某些培养基还应进行抑制能力试验、指示能力试验。进行培养基适用性试验检查按照《培养基适用性试验标准操作规程》上的内容做相对应的培养基试验，填写相应的培养基适用性试验记录，培养基的质量控制试验应在其用于样品检验前完成或与样品检验同时进行，并且是符合要求的。6.8培养基的日常检查1）未开包装的脱水培养基每月由培养基管理人员检查其保存条件、密封性和有效期，按照保存条件保存、密封且在有效期内为合格，否则为不合格；2）外购成品培养基和自配灭菌后的培养基使用前或同步进行培养基的适用性试验，包括：无菌性、促生长、抑菌性和指示性（视培养基用途选择检查项目），培养基的适用性试验合格方可用于日常使用。6.9培养基的储存有效期1）脱水培养基按说明书要求的条件保存。在使用过程中如发现有结块等异常情况则不能再继续使用，应当进行报废处理。2）外购成品培养基的储存和有效期按