XXXXXX初始污染菌检验修正系数确认方案

XXXXXX初始污染菌检验修正系数确认方案1.人员与职责1.1确认参与人员本次确认工作小组的成员如下：确认工作小组职责范围成员岗位组长

组员

组员

1.2职责说明人员职责分工确认工作小组组长1.负责安排人员起草确认方案2.负责安排与协调确认工作的实施3.对确认中出现的变更、偏差提出初步处理意见4.负责分析评价确认数据5.负责安排人员撰写确认报告6.负责方案及报告的审批组员1.在组长的指导下按照确认方案实施验证工作2.负责确认中所需资源（水、电、汽等）的供给3.负责确认中所有仪器仪表、衡器的校验及其文件管理4.负责收集整理确认过程中产生的数据记录并汇总至组长5.负责将确认中出现的变更、偏差及时报告给组长6.进行确认中出现的异常情况（如变更、偏差）的调查处理

2.概述本公司生产的XXXXXX最终产品形式为无菌产品，在终端灭菌前需要将产品的微生物负载控制在规定的范围内，再使用经过验证的灭菌程序进行灭菌，使产品最终处于一个无菌的状态。由于XXXXXX的体积比较大，根据产品特性以及初始污染菌的限度标准，采用重复回收的方法进行修正系数（校正因子）的测定。该方法的基本原则是应用重复生物负载测定方法，直至所回收的微生物数量显著减少。每次重复后，从产品中完全回收洗脱液并进行计数。比较连续回收累积的结果。

3.目的确定我公司XXXXXX初始污染菌检测方法的适用性，确定产品洗脱的回收率，得出修正系数，从而确保检测结果的准确性。

4.适用范围适用于本公司生产的XXXXXX。

5.依据《医疗器械生产质量管理规范》《医疗保健产品灭菌微生物学方法第1部分：产品上微生物总数的测定》GB19973.1-2023《中国药典》2025年版四部1105非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法

6.程序6.1初始污染菌检测方法描述1）仪器移液枪、生化培养箱、超净工作台、微生物限度仪、旋涡混合器2）培养基和试剂序号名称1pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液2胰酪大豆胨琼脂培养基3）供试液的制备取样品1件，采用无菌操作在一端的一个角将特卫强纸撕开一个小口，往小口中加入400ml的pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液，然后使缓冲液充分和产品接触，轻轻振摇3分钟后，在另一端端的一个角将特卫强纸撕开一个小口，将样品中的液体倒至500ml的无菌蓝盖瓶中，作为供试液。（取3个样品平行操作制备3份供试液）4）初始污染菌计数—薄膜过滤法取40ml供试液至含50mlpH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液的滤杯中，过滤，再用50mlpH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液冲洗，过滤后菌面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂平皿培养基上。倒置于生化培养箱，30～35℃培养5天。阴性对照：取40mlpH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液代替供试液，同法操作，制备一个平皿。5）计算：初始污染菌总数（cfu/件）=平均菌落数×10×修正系数6）可接受标准：阴性对照应无菌落生长，初始污染菌总数≤100cfu/件。6.2确认代表型号选择本次确认的XXXXXX产品共有6个系列，分别为A系列、B系列、C系列、D系列、E系列、F系列，每个系列各有5个型号的产品，同系列中的产品所用的材料相同，同系列不同型号的区别在于gggggggggg长度不一样，不同系列之间的产品的结构和功能相似，使用材料的材质基本相同，初始污染菌修正系数确认是确认在首次浸提的微生物的回收率，微生物的首次浸提回收率主要和产品的材质和浸提方法有关，而对于材质相同结构相似的产品，使用规定体积的浸提液浸提规定的时间，首次浸提的回收率是一样的，而在所有XXXXXX型号中，型号KKKKK长度最长，表面积最大，因此本次确认中选择型号KKKKKK作为代表型号进行确认最具有代表性。6.3确认前准备确认相关文件及验证方案应经批准，对检验方法验证中所使用的仪器仪表及验证过程中使用的计量器具的校验/检定情况进行确认，确保仪器、仪表的有效性。6.4确认程序1）样品溶液制备取1件经过热封后的KKKKK型XXXXXX，采用无菌操作在一端的一个角将特卫强纸撕开一个小口，往小口中加入400ml的pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液，然后使缓冲液充分和产品接触，轻轻振摇3分钟后，在另一端的一个角将特卫强纸撕开一个小口，将样品中的液体倒至500ml的无菌蓝盖瓶中，作为供试液1，重复上述步骤3次，分别得到供试液2、供试液3、供试液4。（在供试液1制备时已经开了小口，因此在其余供试液制备中不用再次重新开小口）2）供试液检验取40ml供试液1至含50mlpH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液的滤杯中，过滤，再用50mlpH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液冲洗，过滤后菌面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂平皿培养基上。倒置于生化培养箱30～35℃培养5天。（对供试液2、供试液3、供试液4采用供试液1的方法同样检验）阴性对照：取40mlpH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液代替供试液，同法操作，制备一个平皿。（阴性对照结果应无菌落生长）3）结果计算共对3个样品进行确认，分别计算每个样品的首次处理回收率A，以3个样品的首次处理回收率的平均值作为首次处理平均回收率B的计算结果。样品首次回收率A（%）=供试液1的菌落数/单个产品4次回收的菌落总数*100%样品首次处理平均回收率B（%）=（A1+A2+A3）/3修正系数=1/B

7.偏差若在确认过程中出现异常，必要时按《纠正和