ISO 174682023 食品链微生物学标准化参考方法建立或修订的技术要求和指南标准立项发展报告

食品链微生物学标准化参考方法建立或修订的技术要求和指南ISO17468:2023标准立项发展报告StandardizationDevelopmentReport:Microbiologyofthefoodchain—Technicalrequirementsandguidanceontheestablishmentorrevisionofastandardizedreferencemethod(ISO17468:2023)摘要食品链微生物学检测方法的标准化是保障食品安全、促进国际贸易和推动监管互认的重要技术基础。随着食品微生物检测技术从传统培养法向分子生物学方法、快速检测方法和自动化高通量平台快速发展，如何科学、规范地建立或修订标准化参考方法，已成为国际食品微生物学标准化领域的核心议题。ISO17468:2023《食品链微生物学标准化参考方法建立或修订的技术要求和指南》由国际标准化组织（ISO）于2023年11月13日正式发布，取代了此前实施的ISO17468:2016版本。本标准系统规定了标准化参考方法建立或修订的基本原则、技术流程、验证确认要求及文件化规范，为各标准化技术组织、检测方法开发者及实验室用户提供了全链条的技术指引。本报告从标准立项背景、国内外技术现状、标准主要内容解析、主要参与单位及未来发展趋势等多个维度对该标准进行全面阐述，旨在为标准使用者及相关研究人员提供系统性的参考与指导。关键词：食品链微生物学；标准化参考方法；方法验证；方法确认；ISO17468；国际标准一、引言食品安全是全球公共卫生领域的基础性议题，而食品微生物学检测作为食品安全监管的核心技术支撑，其方法的标准化程度直接关系到检测结果的可比性、可靠性和国际互认水平。随着全球经济一体化进程不断深化，食品贸易的跨国界流动日益频繁，不同国家和地区之间检测方法的不一致已成为技术性贸易壁垒的重要来源之一。世界贸易组织《技术性贸易壁垒协定》（WTO/TBT协定）明确要求各成员国在制定技术法规和标准时，应尽可能采用国际标准，以减少对国际贸易的不必要障碍。在这一背景下，国际标准化组织食品委员会微生物学分技术委员会（ISO/TC34/SC9）长期致力于食品链微生物学方法国际标准的制修订工作，已发布的标准涵盖食品微生物检验的通用要求、特定病原体检测方法、微生物计数方法、分子生物学检测方法等多个领域。然而，随着检测技术的快速迭代和创新方法的不断涌现，如何在标准化层面科学地遴选、验证和确认新的参考方法，成为制约标准质量和适用性的关键问题。ISO17468:2023正是在上述背景下应运而生的重要标准文件。该标准为标准化参考方法的建立和修订提供了统一的技术框架和操作指南，填补了食品微生物学标准化方法学层面的指导性空白，对于提升国际食品微生物学标准的科学性、一致性和适用性具有重要意义。本报告旨在对该标准的立项背景、技术内容、应用价值及参与单位进行系统梳理和深入分析，为相关领域的技术人员和标准化工作者提供参考。二、标准立项背景与编制过程2.1国际食品微生物学标准化的现状与需求食品微生物学检测方法的标准化工作在国际层面主要由ISO/TC34/SC9（食品产品技术委员会微生物学分技术委员会）负责，其工作范围涵盖食品、动物饲料、食品生产及经营环境中的微生物检测方法标准制定。截至目前，该分技术委员会已发布和正在制定的标准逾百项，形成了涵盖样品采集与制备、微生物计数、特定微生物检测、分子生物学方法等较为完整的方法标准体系。然而，在长期的标准制修订实践中，各标准制定工作组面临着一系列共性技术难题。首先，不同来源和不同类型的检测方法在技术原理、操作流程、性能特征和结果表达方式上存在显著差异，如何建立统一的评估框架以客观评价其作为标准化参考方法的适宜性，缺乏系统性的技术指引。其次，随着新技术的快速发展，大量商业化的快速检测方法不断涌现，这些方法在进入国际标准体系之前需要经过严格的验证和确认程序，但验证实验的设计方案、数据要求和判定准则在不同工作组之间缺乏一致性。第三，标准方法在发布后的实际应用过程中，可能出现与实验室操作不适用、性能指标设定不合理、与相关标准不协调等问题，需要建立有效的修订机制。上述问题的存在直接催生了对一项专门针对标准化参考方法建立或修订的技术指导性标准的需求。ISO17468的制定旨在为负责食品微生物学标准制定的各工作组提供统一的方法学框架，确保标准化参考方法的遴选、验证、确认和修订工作建立在科学、透明、一致的技术基础之上。2.2标准编制历程ISO17468:2023的编制工作由ISO/TC34/SC9下设的特定工作组（WG22）牵头组织，来自各成员国标准化机构和相关技术机构的专家共同参与起草工作。该标准的第一版ISO17468:2016于2016年发布，在多年的应用实践基础上，工作组根据各成员国反馈的技术意见和标准实施中积累的经验，启动了系统修订工作。修订工作主要聚焦于以下几个方面：一是进一步明确标准化参考方法与替代方法之间的技术关系，完善了参考方法性能特征的评估指标体系；二是根据食品微生物学技术发展的最新趋势，增加了对分子生物学方法、质谱鉴定方法等新型技术在标准化应用中的技术指引；三是优化了验证和确认实验的设计框架，使方案设计更具可操作性和灵活性；四是加强了与ISO16140系列标准（食品链微生物学方法验证标准）和ISO7218等基础标准的协调一致性。经过多轮工作讨论、草案征求意见和正式投票程序，修订后的ISO17468:2023于2023年11月13日正式发布实施。三、标准主要内容解析ISO17468:2023作为食品链微生物学标准化参考方法建立和修订的纲领性技术文件，其内容涵盖了从方法需求识别、方法遴选、验证评估、确认审定到最终发布与修订的全生命周期技术管理要求。标准的核心技术框架可以概括为以下几个层面。3.1标准化参考方法建立的基本原则标准明确指出，标准化参考方法的建立应当遵循科学性原则、代表性原则和可操作性原则。科学性原则要求参考方法的选择和评估必须建立在充分的科学证据基础之上，包括方法的检测原理的合理性、性能特征的可靠性和统计学评价的严谨性。代表性原则强调参考方法所针对的检测目标（如特定微生物或分析物）应当具有明确的食品基质适用范围，并且所选择的验证实验食品类别应当能够代表目标食品矩阵的多样性。可操作性原则要求参考方法在技术性能满足要求的同时，应当兼顾实验室实际操作的可行性和成本效益，确保方法能够在不同类型的实验室中得到可靠实施。3.2方法的建立与遴选在方法建立阶段，标准规定标准化参考方法的来源可以包括：已发布的国家标准方法、经过同行评议的科学文献中报道的方法、标准化组织开展的实验室间联合研究（collaborativestudy）所开发的方法等。在遴选具体方法作为标准化参考方法候选时，标准要求综合考虑以下技术因素：方法的分析性能（包括特异性、灵敏度、检出限、定量限等）、方法的精密度和重现性、方法的适用范围（目标微生物和食品基质）、方法的检测速度和通量、对实验室设备和人员技能的要求、以及方法的经济成本等因素。标准特别强调了由多个实验室参加的协同研究在参考方法确认中的核心地位。协同研究所获得的实验室间重现性数据是评估参考方法性能的基石，也是后续标准方法发布时确定性能指标的依据。3.3方法的验证与确认要求ISO17468:2023对标准化参考方法的验证（verification）和确认（validation）进行了清晰界定和系统规范。方法确认旨在证明方法能够满足预期用途的性能要求，通常由方法开发方或标准制定组织通过系统的实验方案加以实施。方法验证则侧重于使用方实验室对标准方法的性能进行核验，以证明其在本实验室条件下能够达到标准中规定的性能水平。标准规定的确认实验方案涵盖方法特异性、灵敏度/检出限、定量范围、相对准确度、精密度（包括重复性和重现性）等核心性能参数的评估。在实验设计方面，标准要求选择具有代表性的食品基质类别（通常涵盖生鲜产品、加工食品、乳制品、肉类产品等），且每种基质的代表性样品数量、添加水平（包括阴性样品、低浓度污染样品和高浓度污染样品）设置应当满足统计学分析的需求。3.4标准化参考方法的修订标准指出，标准化参考方法在使用过程中，如果出现以下情况，应当启动修订程序：（1）方法在实际应用中暴露出技术缺陷或性能不足；（2）相关领域的技术发展催生了性能显著优于现有参考方法的新方法；（3）方法所依据的配套试剂、培养基或设备发生实质性变化；（4）与其他相关标准出现不协调或冲突；（5）用户反馈或监督评审中发现了需要改进的技术问题。修订程序应当遵循与初始制定相同的科学评估流程，但对于仅涉及编辑性修改或小的技术调整的情况，可以采取简化的修订路径，以提高标准维护的效率。3.5与其他相关标准的协调四、标准主要参与单位ISO17468:2023的编制工作由ISO/TC34/SC9/WG22工作组承担。在参与标准编制的各国技术机构中，法国标准化协会（AFNOR）发挥了重要的牵头和协调作用，其下属的食品微生物学标准化技术机构承担了工作组秘书处的工作。法国标准化协会是国际标准化领域的资深成员，也是ISO创始成员机构之一。作为法国国家标准化主管机构，AFNOR负责协调和组织法国各领域的标准化活动，其在食品微生物学标准化方向具有深厚的技术积累和丰富的国际标准制修订经验。在ISO/TC34/SC9的工作框架下，AFNOR不仅积极参与多项食品微生物学检测方法标准的制定，还承担了多个工作组的召集和秘书处工作，为国际食品微生物学标准的体系建设和技术协调做出了持续贡献。法国在食品微生物学技术领域拥有多个世界知名的研究机构和参考实验室，如法国食品安全局（ANSES）下属的食品参考实验室和法国巴斯德研究所等。这些研究机构为ISO17468标准的编制提供了坚实的技术支撑和科学基础。在标准起草过程中，法国专家团队特别是在方法确认实验设计、统计学评价方案以及多实验室协同研究组织等方面发挥了重要的专业优势，为标准技术内容的科学性和严谨性提供了保障。除法国外，来自德国、英国、荷兰、美国、中国、加拿大、丹麦等国家的标准化专家也深度参与了本标准的制修订工作，体现了该标准在国际层面的广泛共识和技术代表性。五、结论与展望ISO17468:2023作为食品链微生物学标准化参考方法建立与修订的系统性技术指导文件，为国际食品微生物学标准制修订工作提供了科学、统一的规范化框架。该标准的发布和实施有效填补了食品微生物学标准化领域在方法学指导层面的关键空白，对于提升国际食品微生物学检测标准的科学性、一致性和国际适用性具有重要的推动作用。从技术发展角度来看，当前食品微生物学检测正处于传统培养方法与分子生物学方法、快速免疫学方法、质谱鉴定技术和下一代测序技术等多元技术并存的快速发展时期。未来，随着数字PCR、宏基因组测序、微流控芯片等新兴技术在食品微生物检测领域的应用不断深入，标准化参考方法的内涵和外延也将持续扩展。ISO17468标准在未来修订中可能需要进一步纳入针对新型分子定量方法的评估框架、生物信息学分析流程的标准化要求、以及快速方法与经典参考方法在法规决策中的等效性判定等前沿议题。对于中国而言，积极跟踪和参与ISO17468及相关国际标准的制修订工作，一方面有助于我国食品微生物学检测标准与国际标准体系的对接与协调，促进我国食品安全监管技术的国际互认；另一方面，通过实质性参与国际标准制定过程，可以将我国在食品微生物检测领域的技术经验和创新成果纳入国际标准体系，提升我国在食品微生物学标准化领域的国际影响力和话语权。建议国内相关标准化技术机构、科研院所和检测实验室在食品微生物学标准方法制修订过程中，充分参考ISO17468确立的技术框架和评估准则，推动我国食品微生物学标准化工作向更加科学化、规范化和国际化的方向发展。参考文献[1]ISO17468:2023,Microbiologyofthefoodchain—Technicalrequirementsandguidanceontheestablishmentorrevisionofastandardizedreferencemethod.Geneva:InternationalOrganizationforStandardization,2023.[2]ISO16140-1:2016,Microbiologyofthefoodchain—Methodvalidation—Part1:Vocabulary.Geneva:InternationalOrganizationforStandardization,2016.[3]ISO16140-2:2016,Microbiologyofthefoodchain—Methodvalidation—Part2:P